Изобретение относится к медицине и биохимии, и может быть использовано для выделения лактоферрина человека.
Целью изобретения является интенсификация способа за счет сокращения числа стадий.
Способ осуществляют следующим образом.
500 мл сливного женского молока первой недели лактации центрифугируют при 10000 об/мин 60 мин при + 4°С. В полученную молочную плазму медленно при постоянном помешивании добавляют сухой сульфат аммония до конечной концентрации 2М. Раствор выдерживают при +4°С в течение 8-10 ч, а затем центрифугируют при 10000 об/мин 60 мин. Осадок отбрасывают, а надосадочную жидкость пропускают через колонку с силосорбом С-18 (1,5 х 10,0 см). После того, как весь объем (620 мл), содержащий лактоферрин, пропущен через- ко- лонку(15-20 мин), начинают элюцию белков линейным градиентом концентрации ацетонитрила (от 0 до 60%). Весь процесс хроматографии длится 3 ч. Лактоферрин выходит из колонки при концентрации ацетонитрила 47-52%.
Выход лактоферрина -40,2-67,1%, чистота 9 6-98%.
Предлагаемый способ по сравнению с известным позволяет сократить время получения лактоферрина с 72 до 25 ч.
Формула- изобретения
Способ получения лактоферрина, включающий центрифугирование женского молока, фракционирование молочной плазмы сульфатом аммония с последующей хроматографией фракций, содержащих целевой продукт, отличающийся тем, что, с целью интесификации способа путем сокраxj
оо «о
N о
317189464
щения числа стадий, фракционирование сербе С-18 в условиях линейного градиента проводят-сразу после центрифугирования ацетонитрила и при его концентрации 47- сырья, а хроматографию проводят на сило- 52%.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛАКТОФЕРРИНА ИЗ МОЛОЧНОГО СЫРЬЯ | 2008 |
|
RU2390253C1 |
| СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ И ОЧИСТКИ ЛАКТОФЕРРИНА ИЗ МОЛОЧНОГО СЫРЬЯ | 2016 |
|
RU2634859C1 |
| Способ выделения никотинамидадениндинуклеотид-глутаматдегидрогеназы из хлореллы | 1981 |
|
SU958502A1 |
| Способ выделения карбоксилэстеразы семенной плазмы человека | 2019 |
|
RU2755887C2 |
| Способ очистки поверхностного антигена вируса гепатита В (НВ @ А @ ) | 1990 |
|
SU1776415A1 |
| ТЕХНОЛОГИЯ ОПЫТНОГО ВЫДЕЛЕНИЯ ЛАКТОФЕРРИНА ЧЕЛОВЕКА | 2013 |
|
RU2554742C1 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТИОЛ:ПРОТЕИН-ДИСУЛЬФИД ОКСИДОРЕДУКТАЗЫ ИЗ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ | 2004 |
|
RU2310684C2 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛАКТАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ | 2001 |
|
RU2180688C1 |
| СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ СПЕРМАСПЕЦИФИЧЕСКОГО ИНГИБИТОРА ТРИПСИНА ЧЕЛОВЕКА | 2013 |
|
RU2524668C1 |
| Способ получения фермента днк-цитозин-метилазы 1 из клеток | 1977 |
|
SU737443A1 |
Изобретение относится к медицине и биохимии и может быть использовано для выделения лактоферрина человека. Целью изобретения является интенсификация способа. Поставленная цель достигается тем, .что женское молоко центрифугируют, в молочную плазму добавляют сульфат аммония, раствор выдерживают в течение 8-10 ч, повторно центрифугируют. Надосадочную жидкость пропускают через колонку с сило- сорбом С-18 в условиях линейного градиента ацетонитрила и при его концентрации 47-52%. Чистота лактоферрина 96-98%. Предлагаемый способ позволяет сократить время получения лактоферрина с 72 ч до 25 ч.
| Якубовская Р.И., Немцова Е.Р., Кохано- ва И.Д | |||
| и др | |||
| Лактоферрин человека: получе- ние высокоочищенных препаратов из молока женщин, некоторые физико-химические свойства и распределение в нормальных и опухолевых тканях | |||
| - Вопросы мед | |||
| химии, 1986, № 6, с | |||
| Фальцовая черепица | 0 |
|
SU75A1 |
