Штамм бактерий BacILLUS pULVIJacIeNS, используемый для изготовления лечебно-профилактического препарата против бактериальных инфекций у животных Советский патент 1992 года по МПК C12N1/20 A61K35/74 C12N1/20 C12R1/07 

VI

N3 СА)

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, а именно к средствам профилактики и лечения бактериальных инфекций у животных. Цель изобретения - штамм бактерий Bacillus pulvifaciens ВКПМ В- 4348, продуцирующий протеолитические ферменты и антибиотики широкого спектра, действия что позволяет повысить эффективность лечения и профилактики бактериальных инфекций у животных. Штамм депони- рован во Всесоюзной коллекции промышленных микроорганизмов под номером В-4348. Штамм используется для из- готовления живого бактерийного препарата, применяемого для профилактики и лечения гнойно-воспалительных процессов различной локализации. Штамм В. pulvifaciens ВКПМ В-4348 продуцирует протеолитические ферменты, разлагающие альбумин, гемоглобин, фибрин и антибиотик широкого спектра действия. К антибиотику чувствительны условно-патогенные микроорганизмы: стафилококки, стрептококки, кишечные палочки, синегнойные палочки, протей, сальмонеллы, дизентерийные палочки, клебсиеллы, дрожжевые грибки. Рост сапрофитирующей микрофлоры им не подавляется. Кроме того, антибиотик быстро (в течение нескольких часов) полностью разрушается, что исключает формирование пищевой аллергии. Протеолитические ферменты способствуют усвоению кормов. 1 табл. (Л С

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, а именно к средствам для профилактики и лечения пневмонитов, дисперсий, отечной болезни, маститов и других бактериальных инфекций у животных.

Целью изобретения является штамм бактерий Bacillus pulvifaciens ВКПМ № В- 4348, продуцирующий протеолитические ферменты и антибиотики широкого спектра действия, что позволяет повысить эффективность лечения и профилактики бактериальных инфекций у животных.

Штамм В. pulvifaciens № 535 депонирован во Всесоюзной коллекции промышленных микроорганизмов под Ms В-4348.

Штамм выделен из негнойной раны больного и характеризуется следующими свойствами.

Морфологические свойства. Штамм В. pulvifaciens ВКПМ № В-4348 представляет собой палочку, величина клеток односуточ- ной агаровой культуры составляет (-2-4) х х(0,6-0,8) мк. Клетки подвижны, образуют споры и не образуют капсул.

VI

Культуральные свойства. Клетки штамма В. pulvifaciens ВКПМ № В-4348 по грамму окрашиваются положительно. Штамм при росте на МП Б образует морщинистую клетку, на МПА колонки шероховатые, с фестончатыми краями, со слабым розовым оттенком, диаметром 2-9 мм, растут как в аэробных, так и анаэробных условиях, Штамм размножается при 15-50°С, оптимум роста 36-37°С.

Биохимические свойства. Штамм расщепляет до кислоты без выделения газа глюкозу, сахарозу, мальтозу, дульцит, галактозу. Лактозу, маннит, ксилозу, рамнозу, лизин, аргинин, орнитин не ферментирует. Сероводород и индол не образует. Молоко пептонизирует. Лецитиназу не продуцирует. Выделяет ацетилметилкарбинол и ката- лазу, крахмал не гидролизует,

Штамм В. pulvifaciens ВКПМ Kb В-4348 чувствителен к эритромицину, ампициллину, бензилпенициллину, оксациллину, лин- комицину, неомицину, левомицетину, мономицину, ристомицину, канамицину, тетрациклину, олеандомицину, не чувствителен к полимиксину.

Штамм продуцирует протеолитические ферменты, разлагающие альбумин, гемоглобин, фибрин и антибиотик широкого спектра действия, К антибиотику чувствительны условно-патогенные микроорганизмы: стафилококки, стрептококки, кишечные палочки, синегнойные палочки, протей, сальмонеллы, дизентерийные палочки, клебсиеллы, дрожжевые грибки. Рост сап- рофитирующей микрофлоры не подавляет. Кроме того, антибиотик быстро (в течение нескольких часов) полностью разрушается, что исключает формирование пищевой аллергии. Протеолитические ферменты способствуют усвоению кормов.

Безвредность. Штамм нетоксичен и непатогенен, не вызывает гибели животных при внутрибрюшинном введении его белым мышам и крысам породы Вистар в дозе по 10 млрд клеток или при ежедневном в течение месяца введении им в дозу по 200 млн клеток или при алиментарном введении в дозе 200-500 млн клеток, за время наблюдения животные прибавили в весе на 11-17%.

При гистологическом исследовании токсических изменений во внутренних органах не вызывает. В опытах на морских свинках установлено отсутствие аллергизирующего действия.

Дифференциальные свойства. Штамм В. pulvifaciens № В-4348 отличается от штамма В. subtilis отсутствием у последнего гидролиза крахмала и расщепления ман- нита.

Штамм В. pulvifaciens ВКПМ № В-4348 используется для изготовления живого бактерийного препарата, который применяют для профилактики и лечения гнойно-воспа- лительных процессов различной локализации у животных: эндометритов, маститов, отечной болезни, диаррей.

Пример. Для изготовления препарата в бактериологические матрацы разли- 0 вают по 250 см3 3%-ного стерильного мясо-пептонного агара. В каждый из них вносят по 10 см взвеси производственного штамма В. pulvifaciens № В-4348, содержащей по 200 млн. клеток в 1 см3 0,9%-ного 5 раствора натрия хлорида. Культивируют при . Через 24 ч выросшую культуру смывают стерильным раствором 0,9 раствора натрия хлорида из расчета 100 см3 на 1 бактериологический матрац. Полученную 0 взвесь разливают в стеклянные флаконы, В течение 24 ч при давлении 70 Па проводят лиофилизацию. В 1 мг препарата содержится 400 млн. живых клеток штамма.

Препарат стерилен безвреден, подавля- 5 ется рост золотистого стафилококка в зоне 27 мм, протея в зоне 24 мм, дрожжевого грибка в зоне - 30 мм.

П р и м е р 2. Полученный препарат

используют для лечения эндометрита у ко0 ров. Больным животным препарат вводят с

кормом в дозе по 1р-50 млрд клеток один

раз в сутки перед отелом. Из 4174 коров

эндометрит развился у 17% животных, в то

время как в контрольной группе у 80%. С

5 лечебной целью препарат используют в до.зе по 50-100 млрд. клеток 2 раза в сут.

ПримерЗ. Полученный препарат4348 использован для профилактики желудочно- кишечных заболеваний у свиней. Препарат 0 задают с кормом в дозе по 100-200 млн. клеток на 1 кг живого веса.

Результаты испытания препарата, изготовленного из штамма В. pulvifaciens ВКПМ Ms В-4348 для профилактики желудочно-ки- 5 шечных заболеваний у поросят в сравнении с традиционными методами лечения, представлены в таблице.

Отдельные случаи отечной болезни и дисперсий при профилактическом примене- 0 нии препарата Ветбактерин, изготовленного из штамма В. pulvifaciens ВКПМ № В-4348, протекают как правило в легкой форме без потери веса животных.

Осложнений при применении препара- 5 та не выявлено.

Формула изобретения

Штамм бактерий Bacillus pulvifaciens ВКПМ В-4348, используемый для изготовления лечебно-профилактического препарата против бактериальных инфекций у животных.