Инверсионно-вольтамперометрический способ определения дигидрат-3-(2,2,2-триметилгидразиний)-пропионата Советский патент 1992 года по МПК G01N27/48 

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к инверсионно- вольтамперометрическому способу определения лекарственного препарата дигид- рат-3 2,2,2-триметилгидразиний)-пропионата (милдроната).

Нет экспрессных методик определения дигидрат-3-(2,2,2-триметил гид рази ний) пропионата, который обладает выраженным кардиопротекторным действием при остром ишемическом повреждении миокарда, способствует ограничению зоны некроза при инфаркте миокарда и является средством повышения работоспособности. Количественное определение дигидрат-3-(2,2,2-триметил гидразиний)-пропионата является перспективным и актуальным направлением в оценке эффективности лечения при инфаркте миокарда. Сведения по определению микроколичеств дигидрат-3-(2,2,2-триметил- гидразиний)-пропионатавольтамперометриче- ским и инверсионно-вольтамперометрическим методами также отсутствуют.

Известен способ определения бромистого милдроната методом тонкослойной хроматографии (ТСХ), основанный на его определении методом двумерной ТСХ, путем денсиметрирования хроматограмм при 254 нм и дальнейшем комплексном определе i

Ю

оо

М

1СЛ

нии милдроната по градуировочному графику,

Недостатком данного способа является низкая чувствительность определения, длительность и трудоемкость метода, связанные с предварительной экстракцией органического вещества из листьев и стеблей люпина. Использование большого количества реактивов загрязняет пробу при анализе.

Цель изобретения - увеличение чувствительности и экспрессности определения дигидрат-3-(2,2,2-триметилгидразиний)- -пропионата.

Поставленная цель достигается тем, что дигидрат-3-(2,2,2-триметилгидразиний)-пр- опионат электрохимически концентрируют на поверхности электрода с последующей регистрацией катодных вольтамперных кривых. Способ характеризуется увеличе- чнием чувствительности и экспрессности определения, концентрирование проводят на ртутно-пленочном электроде с серебряной подложкой в перемешиваемом растворе в течение (110-130) с ( гэ ) при потенциале электролиза (Еэ) 0,20-0,25 В на фоне буферного раствора Бриттонэ-Робинсона при ,2-9,6 с последующей регистрацией катодных вольтамперных кривых при скорости развертки потенциала (25-35) мВ/с, а концентрацию дигидрэт-3-(2,2,2-триметил- гидразиний)-пропионата определяют по высоте катодного пика в интервале потенциалов от -0,20 до -0,30 В (отн.нас.к.э.).

В предлагаемом способе в качестве индикаторного электрода использовали пленку ртути на серебряной подложке. Преимуществом такого электрода является возможность получения более узких и высоких пиков, служащих аналитической характеристикой определяемого вещества, что повышает разрешающую способность ме- .тода. Пики, полученные с использованием ртутно-пленочного электрода с серебряной подложкой, характеризуются лучшей воспроизводимостью по сравнению с твердыми электродами, кроме того, они являются менее токсичными, чем ртутно-сферические и капающие и более удобны в практической работе. Кроме того, многие органические вещества способны образовывать с ртутью устойчивые комплексы или трудно-растворимые соли. Это позволяет концентрировать их на электроактивном электроде. Для определения дигидрат-3-(2,2,2-триметил- гидразиний)-пропионата ртутно-пленочный Электрод ранее не применялся. Фон для определения лекарственного препарата подобран экспериментально и тот признак обладает относительной новизной, так как

используется в практике определения органических соединений, однако абсолютной новизной является экспериментально установленный рН раствора 9,2-9,6. При этих

значениях рН наблюдается максимальное значение тока, пики имеют удобную для аналитического измерения форму. Использование 9,,2 нежелательны, так как это приводит к сильному уменьшению величины тока, что снижает чувствительность количественного определения.

Отличием способа являются установленные условия электрохимического концентрирования: Е (0,20-0,25) В на фоне

буферного раствора Бриттона-Робинсона. При этих значениях потенциала величина тока достигает максимального значения, и регистрируют поляризационные кривые с хорошо выраженным максимумом. Это повышает чувствительность и разрешающую способность метода и позволяет определить содержание дигидрат-3-(2,2,2-три- метилгидразиний)-пропионата на уровне г/мл. При потенциале менее 0,20 В

уменьшается величина тока растворения осадков органического вещества с поверхности ртутно-пленочного электрода. При более высокой поляризации ( 0,25 В) появляется дополнительный пик, что затрудняет количественное определение вещества,

Важным для определения дигидрат-3- (2,2,2-тримет.илгйдразиний)-пропионата методом инверсионной вольтамперомет- рии является выбор скорости развертки

потенциала. Оптимальной является скорость (30 ±5) мВ/с. При скорости линейного наложения потенциала более 35 мВ/с увеличивается чувствительность, но при этом резко растет ток заряжения и уменьшается разрешающая способность способа, а также затрудняется обработка вольтамперограмм, что ведет к увеличению времени анализа. При скорости 25 мВ/с падает чувствительность определения, что

не позволяет определять очень низкие концентрации дигидрад -3-(2,2,2- триметилгид- разиний) -пропионата ( 5 10 г/мл). При скорости (30 ±5)мВ/с достигается максимальное значение тока растворения осадков с поверхности ртутно-пленочного электрода, что обеспечивает высокую чувствительность способа и хорошую воспроизводимость поляризационных кривых. Относительное стандартное отклонение Sr

при этом не превышает 0,1.

Время предварительного электролиза выбирают в зависимости от концентрации определяемого соединения. Оптимальное значение Гэ равно (120 ±10) с, при этом достирается максимальное значение величины тока растворения накопленных осадков с поверхности ртутно-пленочного электрода и хорошая воспроизводимость для количе- ственного определения органического вещества (SrЈ 0,05). Пригэ 130с на полярог- рамме появляется дополнительный пик при потенциале -(0,10-0,15) В, что снижает чувствительность определения и воспроизводимость полезного сигнала. При гэ 110 с величина катодного тока растворения не достигает максимального значения, что также снижает чувствительность определения лекарственного препарата, а при тэ -15 с практически пик зарегистрировать невозможно.

Количественному определению дигидрат-3-(2,2,2-триметилгидразиний)- -пропионата с использованием ртутно-пленочного индикаторного электрода мешают неорганические ионы Г, СГ, Br, CNS с содержанием, превышающим концентрацию лекарственного препарата на 2,5-3 порядка; серосодержащие вещества:алкилсульфиды, алкилтиолы с числом атомов углерода в молекуле (СтСз). Не мешают определению фенолы, спирты, мочевина и мочевая кислота, тяжелые металлы (Zn, Cd, Sb, Cu, Fe и др.).

Установленные условия позволили количественно определить дигидрат-3-(2,2,2- триметилгидразиний)-пропионата путем регистрации катодных поляризационных кривых при потенциалах -(0,20-0,30) В на фоне буфера Бриттона-Робинсона. Нижняя граница определяемых содержаний (Сн) этого соединения равна 1,15-10 г/мл. Относительное стандартное отклонение (Sr) для диапазона концентраций г/мл не превышает 0,2. Все условия определения дигидрат-3-(2,2,2-триметилгидразиний)- -пропионата подобраны экспериментально. Приготовление фоновых и стандартных растворов органического вещества в воде является общепринятым.

Пример 1. Определение дигидрат-3- (2,2,2-триметилгидразиний)-пропионата на уровне г/мл.

В кварцевый стаканчик емкостью 10 мл наливают 5 мл буфера Бриттона-Робинсона рН 9,6. Раствор деаэрируют азотом (или аргоном) с содержанием кислорода 0,001% в течение 5 мин и, не прекращая перемешивания, проводят электролиз раствора при условии: ,20 В, гэ 120 с. Отключают газ и фиксируют катодную вольтамперог- рамму при скорости развертки потенциала 30 мВ/с, начиная с потенциала 0,00 В. Отсутствие пиков свидетельствует о чистоте фона. Затем добавляют п капель объемом

0,030 мл стандартного раствора дигидрат- 3-(2.2,2-триметилгидразиний)-пропионатэ (10 г/мл), перемешивают раствор 60 с и проводят электрохимическое концентрирование осадка при Еэ 0.25 В и с Съемку вольтамперной кривой начинают с потенциала 0,00 В. Пик для указанной концентрации дигидрат-З-.-триметилгидра- зиний)-пропионата регистрируют в

диапазоне потенциалрвот-0,20 до-0,30 В при чувствительности прибора А/мм. Время единичного анализа не превышает 20 мин.

Основные условия определения дигид- раттЗ-(2,2,2-триметилгидразиний)-пропионэта на ртутно-пленочном электроде методом ИВ приведены в табл.1.

По сравнению с известным предложенный способ экспрессен, прост и обладает хорошей воспроизводимостью. Нижняя граница определяемых содержаний свидетельствует о высокой чувствительности способа. Предлагаемый способ позволит осуществить фармакокинетические исследования и проводить контроль за лекарственными препаратами, обладающими кардиопротекторным действием, при длительной химиотерапии. Этот способ впервые позволил разработать высокоэффективную и экспрессную методику количественного определения дигидрат-3(2,2,2-триметилгидразиний)-пррпионата.

Зависимость величины восстановления осадков дигидрат-3-(2,2,2-триметилгидра- зиний)-пропионата от потенциала предварительного накопления (Смо 1-10 г/мл,

(120 с) приведена в табл.2.

Формула изобретения Инверсионно-вольтамперометрический способ определения дигидрат-3-(2,2,2-триме- тилгидразиний)-пропионата, заключающийся

в электрохимическом концентрировании вещества на поверхности электрода с последующей регистрацией катодных вольтамперных кривых, отличающийся тем, что, с целью увеличения чувствительности и экспрессности определения, концентрирование проводят на ртутно-пленочном электроде с серебряной подложкой в перемешиваемом растворе в течение 110-120 с при потенциале электролиза 0,20-0,25 В на фоне буферного раствора Бриттона-Робинсона при рН 9,2-9,6 с последующей регистрацией катодных вольтамперных кривых при скорости развертки потенциала (25-35) мВ/с, а концентрацию дигидрат-3-(2,2,2-триметилгидразиний)-пропионата определяют по высоте катодного пика в интервале потенциалов от -0,20 до -0,30 В (отн. нас.к.э.).

Таблица

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к инверсионно-вольтампе- рометрическому способу определения лекар- ственного препарата на примере ди гид рат-3-(2,2,2-триметил гидразин ий)-п роп ионата (милдронат). Сущность изобретения заключается в том, что концентрирование ор- ганического вещества проводят на ртутно-пленочном электроде с серебряной подложкой в перемешиваемом растворе в течение 110-130 с при потенциале электролиза 0,20-0,25 В. В качестве фонового электролита используют буферный раствор Бриттона-Робинсона при рН 9,2-9,6. Регистрацию катодных вольтамперных кривых осуществляют при скорости развертки потенциала 25-35 мВ/с, а концентрацию дигидрат-3-(2,2,2- триметилгидразиний)-пропионата определяют по высоте катодного пика в интервале потенциалов (-0,) В (отн.нас.к.э.). Предел обнаружения 1, г/мл. 2 табл. сл С

Т а бл и ц а