Способ культивирования клубеньковых бактерий Советский патент 1992 года по МПК C05F11/08 C12N1/20 

Изобретение относится к микробиологической промышленности и может быть использовано для получения нитрагина для бобовых растений.

Известен способ регуляции клубеньковых бактерий перекисями щелочноземельных металлов.

Известен способ использования аммонийной соли никотиновой кислоты в качестве стимулятора растений. Известная соль синтезирована новым методом в Институте химических наук АН КазССР, стимулирующий эффект на растениях доказан.

Целью изобретения является повышение выхода биомассы клубеньковых бактерий.

Поставленная цель достигается тем. что в качестве стимулятора роста используют аммонийную соль никотиновой кислоты в количестве 0,0005-0,05 мае. % от объема среды культивирования.

Предлагаемый способ заключается в следующем.

Пример 1. Клубеньковые бактерии сои Rhizobium japonicum 646, 6346, S-25 выращивают в условиях аэрации периодическим способом, в колбах на качалке(Ураб 100 мл) на питательных средах, содержащих источники азота, углерода, минеральные соли, г/л: среда 1 - гороховая мука 20,0; глюкоза 5,0: сахароза 5,0; ( 0,5. KH2PO/J 0,5; мел следы; К2НР04 0,5. среда 2 - маннит 10,0; дрожжевой автолизат 1,0; NaCI 0,1; Мд504 7НгО 0,2; К2НР04 0.5: СаСОз следы.

В качестве стимулятора роста бактерий добавляют к среде аммонийную соль никотиновой кислоты в концентрациях 0,0005- 0,05 мас.%. Культивирование клубеньковых бактерий проводят при 27-29°С в течение 5 сут при рН 7,0-7,2

В табл.1 приведены данные динамики роста клубеньковых бактерийсои Rhizobium

w

Ё

VI СО 00 00 О VI

japonlcum при добавлении 0,01 % аммонийной соли никотиновой кислоты.

Как видно из представленных в табл.1 данных, выращивание клубеньковых бактерий сои в присутствии аммонийной соли никотиновой кислоты обеспечивает повышение биомассы на 44-96%. Титр бактерий сои составляет 15-22 млрд/мл.

Пример 2. Клубеньковые бактерии клевера Rhlzoblum trlfoli 348 и 3296 выращивают в колбах на качалке (Vpa6 100 мл) на питательной среде следующего состава, г/л: среда 1 - горох (отвар) 100,0; сахароза 20,0; состав 2 аналогичен приведенному в примере 1. Культивирование.клубеньковых бактерий клевера проводят при 27-29°С и рН 7,0 в течение 48 ч. Биомасса клубеньковых бактерий клевера в среде с добавлением 0,01%-ной аммонийной соли никотиновой кислоты почти в 2 раза превышает контрольный образец (табл.2). Титр бактерий клевера составляет 22-24 млрд/мл.

Пример 3. Влияние аммонийной соли никотиновой кислоты на азотфиксирующую, симбиотическую активность клубеньковых бактерий сои и их конкурентоспособность изучалось в, полевых опытах в Казахском НИИ земледелия, на опытном поле.

Бактеризацию семян сои сорта Эврика 357 проводят штаммами клубеньковых бактерий, выращенных на среде с добавлением

аммонийной соли никотиновой кислоты, и контрольными образцами.

Клубеньковые бактерии, культивированные на среде с стимулятором роста аммонийной солью никотиновой кислоты, вступают в эффективный симбиоз с соей, активно фиксируют атмосферный азот, в результате чего улучшается развитие растений, повышают урожай зерна на 1,2-1,4

ц/га.

Приведенные в табл.3 данные показывают, что эффективность симбиоза сои Эврика 357 с бактериями Rhizobium japonicum обеспечивает также улучшение качества

урожая за счет более интенсивного накопления белка.

Таким образом, предлагаемый способ культивирования клубеньковых бактерий позволит увеличить выход инокулянтов для

бобовых растений, повысить их симбиотическую эффективность, азотфиксирующую активность и конкурентоспособность. Формула изобретения Способ культивирования клубеньковых

бактерий на питательной среде, содержащей источник углерода, азота, минеральные соли и стимулятор роста, отличающий- с я тем, что, с целью повышения выхода биомассы, в качестве стимулятора роста используют аммонийную соль никотиновой кислоты в количестве 0,0005-0,05 мас.% от объема среды.

Использование: микробиологическая промышленность, производство бактериальных удобрений. Сущность изобретения: клубеньковые бактерии, например Rhizoblum Japontcum, Rhlzobium trlfoli, культивируют на питательной среде, содержащей источники углерода, азота, минеральные соли и стимулятор роста, в качестве которого используют аммонийную соль никотиновой кислоты в количестве 0,0005-0,05 мас.% от объема среды. Использование аммонийной соли никотиновой кислоты позволяет увеличить выход биомассы бактерий с 3,3-3,5 до 6.2-6,9 г/я. 3 табл.

Т а б л и ц а 1

Та б л и ца2

Табл и ца 3