Способ диагностики гипоксии плода Советский патент 1992 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к перинатологии.

Цель изобретения - доклиническая диагностика гипоксии плода.

Способ осуществляют следующим образом.

Берут 0,1 мл крови из пальца беременной женщины, отмывают эритроциты в физиологическом растворе. К эритроцитам добавляют трис-НС -буфер, растворы грих- лоруксусной, соляной и тиобарбитуровой кислоты и выдерживают в бане 20 мин. Затем центрифугируют и в надосадочной жидкости определяют количество малонового диальдегида (МДА) на спектрофотометре СФ-26. В уплотненной взвеси эритроцитов определяют антиокислительную активность (АОА) по степени торможения образования йода из йодистого калия при добавлении перекиси водорода. Антиокислительную защиту организма (АОЗ) определяют по отношению АОА/МДА.

В контроле обследовано 20 женщин с благоприятным течением беременности и

родов АОЗ в среднем 2,57 + 0,25 (2,0-3,6), родивших здоровых детей без нарушения клеточного метаболизма.

П р и м е р 1. Больная С., срок беременности 37-38 недель, нефропатия II ст., анемия, отягощенный акушерский анамнез (грипп, патологическая прибавка веса). Состояние перед обследованием удовлетворительное. Жалоб нет. Шевеление плода ощущается хорошо, сердцебиение ясное, ритмичное, 140 ударов/мин. Для определения АОЗ у больной утром берут 0,1 мл периферической крови в пробирку с 4-5 мл физиологического раствора с цитратом натрия 20 мл цитрата натрия и 80 мл физиологического раствора) и отмывают эритроциты два раза физиологическим раствором. 20 мл отмытых Эритроцитов (уплотненная взвесь) смешивают с 300 мкл трис-НС -буфера (рН 7,4), добавляют500 мкл.20 %-ной трихлорук- сусной кислоты, 150 мкл 5 н. соляной кислоты и 600 мкл 0.67 %-ной тиобарбитуровой кислоты и выдерживают 20 мин в бане при 98-99°С. После инкубации пробы центрифусл

с

-ч ел

го

ел

ы

гируют 20 мин при 2000 об/мин и в надоса- дочной жидкости, используя спектрофотометр СФ-26, при 532 и 600 им определяют количество МДА. Оно составляет 2,37 нмоль/Ю6 эритроцитов. В 5 мкл уплотненной взвеси эритроцитов определяют АОА путем добавления в пробу 500 мкл смеси хлороформ-уксусная кислота (5:1). 250 мкл образующейся смеси переносят в кювету спектрофотометра, добавляют 250 мкл перекиси водорода и 250 мкл раствора йодистого калия и при 253 нм через 3 мин фиксируют образование йода. Конечный результат определяют по калибровочной кривой по йоду. АОА 2,9 нмоль юда 106 эритроцитов за 1 мин АОЗ 1,22. Диагноз - гипоксия без клинических проявлений. Новорожденный без клинического проявления гипоксии. Оценка по шкале Апгар в момент рождения 8 баллов, через 5 мин 9 баллов. Однако метаболические показатели указывают на наличие гипоксии и на клеточном уровне (механический гемолиз 1,41 %, прирост гемолиза 70 %, интенсивность деградации МДА 30 %, АОА 4,20 нмоль йода 10б эритроцитов за 1 мин).

П р и м е р 2. Больная А,, срок беременности 37 недель, нефропатия II ст., анемия, отягощенный акушерский анамнез (три раза медицинский аборт). Перед обследованием состояние удовлетворительное, жалоб нет. Сердцебиение плода ясное, ритмичное, 146 ударов/мин, шевеление плода ощущается, АОЗ 0,64. Диагноз - гипоксия с клиническими проявлениями. При кесаревом сечении в связи с неподготовленностью родовых путей к родам извлечен живой доношенный ребенок с симптомами внутриутробной гипоксии: сухость и мацерация кожного покрова, акроцианоз, снижение мышечного тонуса и физиологических рефлексов. Оценка по шкале Апгар 6-7 баллов.

ПримерЗ. Больная Е., срок беременности 36-37 недель, нефропатия I ст., хронический пиелонефрит, отягощенный акушерский анамнез. Состояние перед обследованием удовлетворительное, жалобы на слабость, головокружение. Сердцебиение

плода ясное, ритмичное, 146 ударов/мин, шевеление ощущается хорошо. АОЗ 1,95. Родился доношенный здоровый ребенок с оценкой по шкале Апгар 8-9 баллов, без нарушения клеточного метаболизма.

П р и м е р 4. Больная Т., срок беременности 38 недель с благоприятным течением беременности. Общее состояние перед обследованием удовлетворительное. Жалоб нет. Сердцебиение плода 142 удара/мин,

ясное, ритмичное. Шевеление плода ощущается хорошо. АОЗ 2,8. Родился практически здоровый ребенок с оценкой по шкале Апгар 8-9 баллов, без нарушения клеточного метаболизма.

Предлагаемый способ обеспечивает выявление скрытой (доклинической)гипоксии, признаки которой обнаруживаются лишь на уровне клеточной мембраны. Таких детей необходимо включить в группу высокого риска по развитию заболеваний. Выявление группы риска позволит своевременно применить средства, предупреждающие гипоксию плода и новорожденного путем восстановления АОЗ беременной. Способ

абсолютно безвреден, атравматмчен для матери и ребенка, технически прост, может применяться при любой патологии беременности.

Формула изобретения

Способ диагностики гипоксии плода путем биохимического исследования крови, отличающийся тем, что, с целью доклинической диагностики, определяют содержание малонового диальдегида и антиокислительную активность и по отношению антиокислительной активности к содержанию малонового диальдегида определяют антиокислительную защиту организма м при ее значении 1,90-0,82

5 диагностируют гипоксию плода.

Использование: в перинатологии. Сущность изобретения: исследуют кровь, определяют содержимое малонового ди- альдегида (МДА) и антиокислительную активность (АОА) и антиокислительную защиту организма (АОЗ) как отношение АОА/МДА в эритроцитах и при снижении АОЗ до 1,90-0,82 диагностируют гипоксию. Положительный эффект: возможность проведения доклинической диагностики.