Способ моделирования сочетаний патологии турбекулез-описторхоз Советский патент 1992 года по МПК G09B23/28 

1

(21)4785636/14

(22)11.10.89

(46) 23.09.92. Бюл. Ms 35

(71)Тюменский научно-исследовательский институт краевой инфекционной патологии и Ленинградский научно-исследовательский институт фтизиопульмонологии

(72)А.Е.Александрова, В.А.Золотухин и С.В.Волосатое

(56)Авторское свидетельство СССР

№ 1691867 от 5,90, приоритет 21.11.88. (54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ СОЧЕ- ТАННОЙ ПАТОЛОГИИ ТУБЕРКУЛ ЕЗ-ОПИ- СТОРХОЗ

(57)Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной патологии и терапии, и может быть применено при изучении патогенеза, диагностики и лечения сочетанной патологии туберкулез-опистор- хоз. Цель изобретения - приближение к клиническому течению за счет локализации процесса. Для специфического заражения

туберкулезом использовались маловирулентный штамм микобактерий туберкулеза и штамм M.bovis - 8, вводимые в боковую хвостовую вену белых беспородных мышей в количестве 0,1 мг в 0,2 мл физиологического раствора. Заражение описторхозом осуществлялось введением в пищевод через зонд по 15 экз. живых мета- церкариев описторхисов дважды с суточным интервалом. Время между заражением туберкулезом и описторхозом от одних суток до двух недель. Через 60 дней после заражения выявлен специфический туберкулезный процесс в легких, а в печени живые описторхи. Яйцепродукция гельминтов регистрировалась через месяц после заражения и после забоя животных. Максимальный срок наблюдения за животными 12 недель. При воспроизведении модели достигается точное соответствие лопализации патологического процесса клиническому варианту.

Ё

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной патологии и терапии и может быть использовано для изучения патогенеза, диагностики и лечения сочетанной патологии туберкулез-опи- сторхоз.

Цель - приближение к клиническому лечению за счет преимущественно легочной локализации туберкулезного процесса.

Способ осуществляется следующим образом. Для специфического заражения используют маловирулентный вариант культуры микобактерий туберкулеза штамма , штамм M.bovis-8 в количестве 0,1 мг в объеме 0,2 мл физиологического раствора. Культуру вводят шприцем в обработанную 70%-ным спиртом боковую хвостовую вену белой беспородной мыши. Для гель- минтного заражения в пищевод животного через зонд (тупая, с припаянным на конце шариком интекционная игла) при помощи шприца вводят по 15 шт. живых метацерка- риев описторхоза (дважды с интервзлом в сутки). Время между заражениями туберкулезом и описторхозом от одних суток до 2-х недель. При вскрытии .животных через 60 дней после заражения специфический процесс в легких выявлен в 100%, а в печени - 90% мышей выявлены живые описторхи (в среднем по 6 - 8 экземпляров). Яйцепродук 1

О N О

2

ция описторхоз выявлена в результате коп- рологического исследования через месяц после заражения и после забоя животных. Максимальный срок наблюдения за животными 12 недель.

Способ подтверждается следующими примерами.

П р и м е р 1. Подопытную белую мышь (самца) массой 27 г фиксируют в руке и вводят в обработанную 70%-нам спиртом и предварительно разогретую теплой водой (-40°) боковую хвостовую вену 0,2 мл взвеси микобактерий туберкулеза маловирулентного варианта штамма HayRY (0,1 мг), с помощью шприца, внутривенно, стерильно. На следующий день в пищевод вводят через зонд с помощью шприца 15 метацеркариев описторхоза в 0,2 мл физиологического раствора. Следующие 15 метацеркариев по вышеприведенной методике вводят через сутки. Период после заражения протекал без осложнений. Через 8 недель животное было забито путем декапитации под эфирным наркозом. При вскрытии отмечался выраженный специфический процесс в легких в виде некрупных очагов некроза на фоне воздушной ткани. Индекс поражения легких- 3,0. Специфический характер процесса был доказан путем посева ткани легкого на питательную среду, давшего рост микобактерий (высеяно 200 колоний). Селезенка, пе- чень, почки - макроскопически без изменений. Указанные признаки свидетельствуют о наличии у мыши туберкулеза с преимущественным поражением легких. При исследовании печени (путем ее гомогенизации) в физиологическом растворе выявлены 8 живых описторхов, а в экскрементах выделено 80 яиц паразита, что говорит об одно- временном наличии у мыши острого описторхоза. Приведенный пример иллюстрирует эффективность использования для моделирования сочетанной патологии ту- беркулез-описторхоз белых беспородных мышей как в отношении специфического, так и паразитарного процессов.

П р и м е р 2. Подопытную белую мышь (самца) массой 25 г по методике, приведенной в примере 1, заразили внутривенно взвесью микобактерий штамма M.bovis-8. Через 14 дней было проведено заражение мыши метацеркариями описторхоза (по 15 экземпляров, дважды с интервалом в сутки) по методике, приведенной в примере 1. Период после заражения протекал без осложнений. Через 6 недель после гельминтного заражения животное было забито путем ди- капитации под эфирным наркозом. При

вскрытии в легких выявлен специфический процесс в виде множественных, иногда сливающихся очагов на фоне воздушной ткани (индекс поражения легких - 2,0). Специфический характер процесса был доказан путем посева ткани легкого на питательную среду, давшего рост микобактерий (высеяно 150 колоний). Селезенка, печень, почки - макроскопически без изменений. Указанные признаки свидетельствуют о наличии у

мыши туберкулеза с преимущественным поражением легких. При исследовании печени путем ее гомогенизации в физиологическом растворе выявлены 10 живых описторхов, а в экскрементах выделено 100 яиц

паразита, что говорит об одновременном наличии у мыши острого описторхоза. Приведенный пример свидетельствует о возможности равновременного заражения экспериментальных животных туберкулезом и описторхозом и использовании данной модели для излучения патогенеза сочетанной патологии туберкулез-опистор- хоз.

Преимущество предлагаемого способа

состоит в том, что приведенная модель позволяет воспроизвести сочетанную патологию туберкулез-описторхоз в высоком проценте случаев (90%) с преимущественным, как у человека, туберкулезным поражением легких, причем достигается контролируемое дозированное заражение обеими инфекциями.

Формула изобретения Способ моделирования сочетанной патологии туберкулез-описторхоз, заключающийся во введении микобактерий туберкулеза и метацеркариев описторхоза экспериментальному животному, отличающийся тем, что, с целью приближения к

клиническому течению за счет преимущественно легочной локализации туберкулезного процесса, модель создают на белых беспородных мышах, при этом микобактерий туберкулеза в количестве 0,1 мг в 0,2 мл

взвеси вводят в хвостовую вену, а в течение двух недель после заражения животных туберкулезом дважды с интервалом 24 ч внут- рипищеводно вводят по 15 живых метацеркариев описторхоза.