Способ дифференциальной диагностики поражений миокарда у детей раннего возраста Советский патент 1992 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, а именно кардиологии, и может быть использовано, в частности, для дифференциальной диагностики миокардитов и миокардиодист- рофий у детей раннего возраста.

Из практики медицины в настоящее время известны способы дифференциальной диагностики различных поражений миокарда, состоящие в иммунологических и биохимических исследованиях крови (см. например, авт. св. № 839492 Способ диагностики заболеваний миокарда, авт. св. Ms 1289497 Способ дифференциальной диагностики вялотекущего ревматизма и инфек- ционно-аллергического миокардита).

Наиболее близким способом к предлагаемому является авт. св. NS 1204214 автора Т,И.Грековой Способ дифференциальной диагностики органических и неорганических заболеваний миокарда, состоящий в том, что при исследовании крови на 2-3 неделе заболевания выделяют лимфоциты, определяют наличие сенсибилизации к антигену некротизированного миокарда в реакции Е-розеткообразования и при увеличении количества розеткообразующих

лимфоцитов более 10% по сравнению со спонтанным розеткообрэзооанием диагностируют органическое поражение миокарда, а при уменьшении их количества диагностируют неорганическое заболевание миокарда.

Однако известный способ имеет следующие недостатки:

-способ не является достаточно точным, так как на Е-розеткообразование влияние целый ряд факторов;

-способ недостаточно объективен, поскольку оцениваются только изменения ре- цепторного аппарата лимфоцитов без учета синтеза антител к антигенам миокарда;

-способ значительно теряет свою чувствительность при диагностике острого миокардита и миокардиодистрофий, так как в данном случае применяется неочищенный антиген некротизированного миокарда со значительным количеством примесей.

Целью предлагаемого изобретения является повышение точноси способл.

Поставленная цель в изобретении достигается тем, что определяют содержание сенсибилизированных лимфоцитов и антиС

тел к миоглобину на первый и второй день от начала заболевания и через 7-14 дней, и при увеличении первого показателя на 5% и более, а второго в 2 раза и более, относительно исходного уровня диагностируют острый неревматический миокардит, при снижении этих показателей на 5-10% и в 2-3 раза соответственно диагностируют острую миокардиодистрофию.

Предложенный способ был успешно апробирован на базе Областной детской кли- нич еской больницы г. Астрахани в отделении патологии детей раннего возраста и инфекционно-боксированном отделении с апреля 1988 года по октябрь 1989 года на 60 детях раннего возраста с заболеваниями сердца. Ниже приводятся результаты апробации,

Пример 1. Ребенок С., в возрасте 1 года 9 месяцев {история болезни № 7889), поступил 15.12.88 года с жалобами матери на наличие выраженных катаральных явлений, одышки, беспокойства. Известно, что ребенок частоболеющий ОРИ. При поступлении отмечено: состояние средней тяжести, одышка, тахикардия. Границы относительной сердечной тупости расширены влево на 1,0 см, тоны сердца глухие, ритмичные. На верхушке и в V точке - мягкий систолический шум. Частота сердечных сокращений 140 в 1. В легких везикулярное дыхание, непостоянные единичные сухие хрипы, Печень увеличена на 1 см.

Указанные данные объективного обследования и результаты лзбораторно-ивстру- ментальных методов исследования не свидетельствуют с достаточной достоверностью в пользу острого миокардита или мио- кардиодистрофии,

При поступлении у больного берут кровь из вены в количестве 3-4 мл. Выделяют лимфоциты в градиенте фикол-верогра- фина. доводят окончательную концентрацию клеток до 2x10 кл/мл средой 199. Эритроциты барана обязательно свежие, трижды отмывают средой 199 при центрифугировании 1000 об/мин по 5 минут. Из осадка берут 0,1 мл эритроцитов и прибавляют 0.02 мл. миоглобина с концентрацией 0,01 г/л и 0,2 мл среды 199. Смесь выдерживают в термостате при 37°С 30 минут, Затем нагруженные миоглобином эритроциты отмывают в среде 199 3 раза по 5 минут при 1000 об/мин. Из осадка эритроцитов приготавливают 0,5% взвесь на среде 199, которая используется для реакции антигенного розеткообразования и пассивной гемагглютинации для определения антител к миоглобину.

Для реакции антигенного розеткообра- зования в силиконовую пробирку помещают 0,1 мл отмытых лимфоцитов и 0,1 мл взвеси эритроцитов барана, покрытых миокардиальным антигеном. Центрифугируют при 1000 об/минуту 5 минут и инкубируют при +4°С 18 часов. После этого производится фиксация в 0,05 мл 0,06% растворе глюта- ральдегидэ при комнатной температуре в

0 течение 5 минут. Взвесь однократно центрифугируют при 1000 об/мин 5 минут с 0,1 мл среды 199. Из осадка приготавливают мазки и окрашивают по общепринятым методам. Подсчитывают 200 лимфоцитов, вы5 деляя из них процент розеткообразующих (53% антигенных розеток).

Для определения уровней антител к миоглобину в сыворотке крови используется микрометод в полистероловых пластинках с

0 V-образным профилем лунок. В 12 лунках пластины вносят по 0,05 мл 0,85% раствора натрия хлорида, затем в первую лунку добавляют 0,05 мл исследуемого образца сыворотки крови и проводят

5 последовательное двухкратное его разведение (1:2, 1:4, 1:8, 1:16 и т.д.). В последнюю контрольную лунку сыворотку не добавляют, после чего в каждую лунку вносят по 0,025 мл 0,5% взвесь эритроцитов барана,

0 нагруженных миоглобином. Пластину тщательно встряхивают, постукивая по краям, и инкубируют 2 часа при комнатной температуре. Оценку результатов проводят визуально, определяя титр реакции в разведении. У

5 данного больного титр антител 1:16.

При исследовании в динамике через 7 дней содержание сенсибилизированных лимфоцитов (антигенных розеток) было 58%, т.е. наростэло на 5%, титр антител к

0 миоглобину - 1:32, т.е. нарастал в 2 раза.

При исследовании этих показателей через 14 дней содержание сенсибилизированных лимфоцитов было 63% (нарастало на 10%), титр антител к миоглобину 1:64 (нара5 стал в 3 раза). У этого же больного через 3 недели с момента поступления содержание сенсибилизированных лимфоцитов к миоглобину было увеличено на 8% по сравнению с первоначальным, а титр антител к миогло0 бину сохранялся увеличенным в 3 раза.

Полученные данные подтверждают наличие иммунной перестройки организма и свидетельствуют о том, что больной страда5 ет миокардитом. Острое начало заболевания, развитие клинической картины заболевания, динамическое наблюдение за больным с благоприятным исходом через 3 месяца после назначения патогенетической терапии подтверждают предположение об остром неревматическом миокардите.

Пример 2, Ребенок А., в возрасте 3 лет (история болезни № 97), поступил 5.01.89 с жалобами на слабость, вялость, одышку. Известно, что ребенок страдает острой двусторонней пневмонией с 20.12.88. При поступлении отмечено: состояние тяжелое, одышка, тахикардия, Границы относительной сердечной тупости расширены влево на 2 см, тоны сердца глухие, ритмичные. Частота сердечных сокращений 130 в минуту. В легких сухие и влажные хрипы, число дыханий 36 в минуту. Печень увеличена на 2,5 см. Приведенные клинические данные и результаты лабораторно-инстру- ментальных методов исследования не дают возможности с достаточной достоверностью выставить острый миокардит или острую миокардиодистрофию. При поступлении у данного ребенка берут кровь и так же, как описано в примере 1, проводят исследования. Содержание сенсибилизированных лимфоцитов оказалось 55%, титр антител к миоглобину 1:16. В динамике через 10 дней нарастапи уровни сенсибилизированных лимфоцитов на 10%, антитела к миоглобину в 2 раза. Через 3 недели содержание сенсибилизированных лимфоцитов было 63% (т.е. увеличено на 8%), титр антител к миоглобину был 1:32 (сохранялся увеличенным). Эти данные указывают на воспалительные повреждения миокарда - миокардит. Клинические признаки, динамическое наблюдение за больным и его лабо- раторно-инструментальными данными, катамнезнические данные подтверждают предположение об остром неревматическом миокардите.

Пример 3. Ребенок Т., в возрасте 1 года (история болезни № 1133), поступил 2.03.89 с жалобами матери на кашель, вялость, слабость. Известно, ребенок частобо- леющий ОРИ, с 26.02.89 заболел острой правосторонней очаговой пневмонией. При поступлении отмечено: состояние тяжелое, одышка, тахикардия, Границы относительной сердечной тупости расширены влево на 1 см, тоны сердца приглушены, ритмичные. На верхушке и в V точке короткий систолический шум. Частота сердечных сокращений 140 в 1 минуту. В легких справа укорочение перкуторного звука, влажные хрипы, число дыханий 42 в 1 минуту. Печень увеличена на 3 см. Приведенные клинические данные и результаты лабораторно-ин- струментальных методов исследования не дают возможности с достоверностью поставить диагноз миокардит или миокардиоди- строфия. В первый день при поступлении у ребенка берут кровь и так же. как описано в примере 1, проводят исследование. Содержание сенсибилизированных лимфоцитов к миоглобину оказалось 54%, титр антител к миоглобину 1:32. В динамике через 7 дней содержание сенсибилизированных лимфо5 цитов было 48% (т.е. снижалось на 6%), титр антител 1:16(снижался в 2 раза). Исследование через 14 дней указывает, что содержание сенсибилизированных лимфоцитов снижалось на 10%, титр антител снижался

0 от первоначального в 3 раза. Эти данные в динамике свидетельствуют об отсутствии сенсибилизации к миоглобину, и, следовательно, повреждение миокарда носит тран- зиторный характер и укладывается в

5 диагноз острой миокардиодистрофии. Клиническая картина изменений в сердце, динамикаклиническихилабораторно-инструментальных данных, а также быстрое восстановление функций ми0 окарда после реконвалесценции от пневмонии подтверждают предположение об острой миокардиодистрофии.

Пример 4. Ребенок Р., в возрасте 1 год 5 месяцев (история болезни № 1815),

5 поступил 5.04.89 с жалобами на кашель, слабость, раздражительность. Известно, что ребенок частоболеющий ОРИ, последний раз заболел ОРИ 29.03.89. При поступлении отмечено: состояние средней тяжести, вы0 ражены катаральные явления, умеренная одышка, легкая тахикардия. Границы относительной сердечной тупости расширены влево на 0,5 см, тоны сердца приглушены, ритмичные. На верхушке и в V точке выслу5 шивается систолический шум, негрубый, Частота сердечных сокращений 130 в 1 минуту. В легких пуэрильное дыхание, хрипов нет. Печень и селезенка не увеличены. Приведенные данные клинических и лабораторно0 инструментальных методов исследования не дают возможности с достоверностью поставить диагноз острого миокардита или ос- трои миокардиодистрофии.

В первый день при поступлении в отде5 ление у ребенка берут кровь и также, как описано в примере 1, проводят исследования. Содержание сенсибилизированных лимфоцитов к миоглобину оказалось 60%, титр антител к миоглобину 1:16. В динамике

0 через 10 дней уровень сенсибилизированных лимфоцитов снижался на 10%, титр антител снижался в 2 раза. Последующие исследования через 3 недели указывают, что уровень сенсибилизированных лимфо5 цитов стал 54%, титр антител 1:8. Это динамическое исследование свидетельствует об отсутствии сенсибилизации к миоглобину, следовательно, изменения в миокарде носят транзиторный характер и укладываются в диагноз острой миокардиодистрофии. Наблюдение в динамике за клиническими проявлениями изменений о сердце ребенка, частоболеющего ОРИ, лабораторно-инстру- ментальные данные, а также быстрое восстановление функций миокарда на фоне терапии подтверждают предположение об острой миокзрдиодистрофии.

Пример 5. Ребенок В,, в возрасте 3 лет (история болезни Мз 3626), поступил 20,12.88 с жалобами матери на слабость, вялость, раздражительность, снижение аппетита. Известно, что ребенок с 2 лет часто болел ОРИ, б месяцев назад диагностирован хронический тонзиллит, последний раз заболел ОРИ 15.12.88. При поступлении отмечено: состояние средней тяжести, катаральные явления (ринит, конъюнктивит), признаки интоксикации, умеренная тахикардия. Границы относительной сердечной тупости не расширены, тоны сердца приглушены, ритмичные. В Уточке и на верхушке выслушивается систолический шум, не грубый. Частота сердечных сокращений 114 в 1 минуту. В легких жесткое дыхание, хрипов нет. Число дыхание 26 в 1 минуту. Печень увеличена на 1 см. Приведенные данные и результаты лабораторио-инструментальных методов исследования не дают возможности с достоверностью поставить диагноз миокардита или миокардиодистрофии.

В первый день при поступлении в отделение берут кровь и так же, как описано о примере 1, проводят исследования. Содержание сенсибилизированных лимфоцитов к миоглобину оказалось 58%, титр антител к ммоглабину 1:8, в динамике через 7 дней содержание сенсибилизированных лимфоцитов было 60%, титр антител не изменялся. Последующие исследования, проведенные через 14 дней, указывают, что содержание сенсибилизированных лимфоцитов было 61%, титр антител оставался как первоначально 1:8. Исследования этих показателей через 3 недели свидетельствуют о том, что содержание сенсибилизированных лимфоцитов было 58%. титр антител не изменялся (1:8).

Эти данные свидетельствуют об отсу- - ствии сенсибилизации к миоглобину. как по

уровню антител, так и содержания розетко- образующих лимфоцитов, Следовательно, изменения в миокарде у данного ребенка возникли на фоне хронического тонзиллита

и частых ОРИ и носят не воспалительный характер - хроническая миокардиодистро- фия. Наблюдение в динамике за клическими проявлениями повреждений миокарда, ма- лодинамичные лабораторно-инструмеитальные данные, длительное сохранение в катамнезе умеренно выраженной миокар- диальной дисфункции подтверждает предположениеохроническоймиокардиодистрофии на фоне хронического

тонзиллита.

Предлагаемый способ по сравнению с прототипом дает возможность повысить точность дифференциальной диагностики поражений миокарда у детей раннего возраста, т.е. для этого применяются исследования в динамике содержания сенсибилизированных лимфоцитов и антител к миоглобину, т.е. устраняется однонап- равлемностьисследования

иммунологических сдвигов. Он позволяет судить о степени выраженности аутоиммунных процессов при поражениях сердца у детей, дает возможность своевременно назначать адекватную терапию. Данный способ технически прост, надежен и не требует дорогостоящих реактивов и оборудования.

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики поражений миокарда у детей раннего возраста путем исследования лимфоцитов крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, определяют

содержание сенсибилизированных лимфоцитов и антител к миоглобину на первый и второй день от начала заболевания и через 7-14 дней, при увеличении первого показателя на 5% и более, а второго - в 2 раза и

более относительно исходного уровня диагностируют острый неревматический миокардит, при снижении этих показателей на 5-10% и в 2-3 раза соответственно диагностирую острую миокардиодистрофию.

Использование: медицина, в частности кардиология для дифференциальной диагностики поражений миокарда у детей раннего возраста. Сущность изобретения: на первый или второй день от начала заболевания и через 7-14 дней определяют содержание сенсибилизированных лимфоцитов и антител к миоглобину и при увеличении первого показателя на 5% и более и второго в 2 раза и более диагностируют острый неревматический миокардит, а при снижении этих показателей на 5-10% и в 2-3 раза соответственно диагностируют острую миокардио- дистрофию. Точность предлагаемого способа составляет 96%.