Способ определения активности репаративного процесса при язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки Советский патент 1992 года по МПК G01N33/48 

(Л

С

Использование: в области медицины, а именно для оценки эффективности лечения язвенной болезни. Сущность изобретения: определяют микроскопически в слизистой оболочке гастродуоденальной зоны наличие тучных клеток продолговатой формы, вытянутых по базаяьной мембране, и секретиру- емых ими веществ в базальной мембране ямочного эпителия желудка и крипт двенадцатиперстной кишки и при их наличии определяют процесс как активный Способ прост в исполнении и имеет точность 82%

Изобретение относится к области медицины, а именно к терапии, и может быть использовано для оценки эффективности лечения язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки.

Важнейшими критериями эффективного лечения язвенной болезни является скорость заживления язвы и предотвращение рецидивов, а система оценки должна быть основана на наборе адекватных показателей, позволяющих объективно судить о качестве проводимого лечения. В настоящее время таких критериев разработано недостаточно.

За прототип предлагаемого изобретения выбран известный способ определения активности репаративного процесса при язвенных поражениях желудка, включающий определение тучных клеток в собственной пластинке слизистой

Способ заключается в том что осус i,r вляется гистохимическое и морфометричс- ское изучение тучных клеток. Для этшг кусочки слизистой оболочки желудка фиксируют 10% нейтральным формалином зэбу- ференным по Лилли и заливают в парафин. Срезы толщиной 5 мкм окрашивают гематоксилином и эозином Идентификацию тучных клеток осуществляют методом окраски основным коричневым по М.Г. Шубину HCI - толуидиновым синим после кислотного гидролиза и ШИК-реакцией. Тучные клетки дифференцируют по степени зрелости (зрелые, средней зрелости и юные), по степени дегрануляции (максимально дегранулиро- ванные, частично дегранулированные максимально гранулированные) и подсчитывают на площади измерения 1 мм

Предлагаемый способ позволяет установить активный репаративный процесс в рубцующейся язве при наличии значитрль

ного увеличения количества тучных клеток. При этом в крае рубцующейся язвы менее выражена тенденция у омоложению тучных клеток и характерно увеличение количества зрелых тучных клеток с гранулами, насыщенными мукополисахаридами.

Исследование тучных клеток в слизистой оболочке желудка и в крае язвы может быть способом оценки активности репара- тивных процессов, эффективности лечебных мероприятий, решением вопросов прогнозирования рубцевания язвы и дальнейшего течения заболевания. Однако при использовании этого способа оценки активности репаративного процесса определением количества тучных клеток на 1 мм слизистой трудно выявить, где нижняя граница цифровых показателей активно протекающей репарации и верхняя граница процесса текущего замедленно (372 ± 68,4 и 281 ± 49), так как количество клеток имеет больший размах колебаний от средних цифр. Сам количественный подсчет требует значительных временных затрат, определенных условий, кроме того, что еще необходима классификация тучных клеток по степени зрелости) зрелые, средней степени зрелости, юные) и по степени дегрануляции (максимально дегранулированные, частично гранулированные,максимально гранулированные/, и только при сопоставлении целого комплекса количественных и качественных показателей можно судить об активности репаративного процесса. Подобные анализ особенно затруднен в практике изучения биоптатов слизистой, полученных у детей как из-за меньших размеров биоптатов, так и из-за более строгих показаний к получению биопсий.

Целью изобретения является повышение точности и упрощение способа.

Поставленная цель достигается тем, что в известном способе определения активности репаративного процесса при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, включающем определение тучных клеток, определяют наличие тучных клеток продолговатой формы (вытянутых по ба- зальной мембране и секретируемых ими веществ в бэзальной мембране ямочного эпителия желудка и крипт двенадцатиперстной кишки.

Способ осуществляется следующим образом:

Депарафинированные срезы помещают в раствор красителя на 1 ч.

Раствор красителя:

основной коричневый - 0,5 г,

этиловый спирт 96° - 80 мл,

соляная кислота 1 Н - 20 мл, Перед употреблением раствор красителя фильтруют. После часовой экспозиции в красящем растворе, препарат извлекают и

проводят последовательно через три порции 70° спирта по 1 минуте в каждой, просветляют в ксилоле и заключают в бальзам. Срез микроскопируют с использованием иммерсионного объектива. Находят вытяну0 тые по длине базальной мембраны тучные клетки и продукты их реакции в виде цепочек гранул. При их наличии прогнозируется отсутствие рецидивов и завершение регенерации

5 Пример. Больная И. 12 лет, поступила с диагнозом: язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки, язва луковицы двенадцатиперстной кишки в стадии II. Динамический эпикриз через 18 дней

0 после поступления. Проводится курс лечения антицидными препаратами, карнити- ном. Учитывая, что самочувствие ее не нарушено, активна, аппетит хороший, жалоб за время наблюдения не было, язык

5 влажный чистый, живот безболезненный, доступен глубокой пальпации, решено раньше окончания курса лечения провести конт- рольную гастрофибродуоденоскопию, желудочное зондирование.

0 На контрольной гастрофибродуодено- скопии на 22 день хорошая положительная динамика. В срезах, полученных из биопта- та луковицы двенадцатиперстной кишки легко выявляются тучные клетки продолго5 ватой формы вытянутых по базальной мембране и секретируемые ими вещества в базаяьной мембране отдельных крипт. Контрольный осмотр через три месяца; жалоб нет. По результатам гастрофибродуодено0 скопии не отмечено эрозивных проявлений. П ример2. Больная Ш. 9 лет, поступила с диагнозом; хронический гастродуоденит; ожирение II ст.

На 4-й день проведена фиброгастроду5 оденосколия: Пищевод свободно проходим, кардия смыкается полностью. Слизистые кардии умеренно гиперемированы. В желудке натощак обычное количество жидкости с примесью небольшого количества

0 слизи. Тонус желудка резко повышен. Складки утолщены, расправляются плохо. Слизистые тела и антрального отдела желудка бледно-розовые с неровным микрорельефом. Привратник сомкнут не

5 полностью. Складки его утолщены, слизистые привратника бледно-розовые. Луковица двенадцатиперстной кишки деформирована. На месте язвен ного дефекта на передней стенке локализуется в углублении участка грануляционной ткани.

Складки вокруг места дефекта утолщены, до конца не расправляются, умеренно отечны. Непосредственно у места дефекта слизистая гиперемирована. Слизистые остальной части двенадцатиперстной кишки бледно- розовые. Тонус двенадцатиперстной кишки повышен. При прохождении бульбодуоде- нального перехода отмечается болезненность, прохождения затруднено.

Заключение: Язва луковицы двенадцатиперстной кишки в ст. 11. Луковица двенадца- типерстной кишки деформирована. Хронический гастродуоденит вне обострения,

В результате проведенного лечения (режим, диета, отвары трав, витамины, антаци- ды, гастрофарм, викалин, растительное масло, новокаино-атропиновая смесь, но- шпа, молоко, тум, лактобактерин, фенкарон) девочка выписывается домой в удовлетворительном состоянии. Болей в животе нет. Жиеот мягкий, безболезненный, доступен глубокой пальпации. Выписана на 37-ой день.

Данные фиброгастродуоденоскопии, полученные перед выпиской: Язва луковицы двенадцатиперстной кишки в ст. III. Луковица двенадцатиперстной кишки деформирована. Хронический гастродуоденит вне обострения.

При анализе срезов, полученных из био- птата луковицы двенадцатиперстной кишки, окрашенных основным коричневым по М.Г. Шубичу, тучных клеток и сектерируе- мых ими веществ на протяжении базальной мембраны не определяется.

При амбулаторном осмотре у девочки при проведении эндоскопического обследования выявлен эрозивный бульбит.

П р и м е р 3. Больной 33 лет, поступил с диагнозом: язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки в стадии обострения.

При проведении фиброгастродуоденоскопии на задней стенке луковицы двенадцатиперстной кишки выявили дефект около 1 см в диаметре с дном, покрытым фибрином. Данные гистологического исследования свидетельствуют о наличии диффузного диоденита. Лабораторно-биохимические исследования крови и мочи не выявили отклонений от нормы.

В результате проведенного комплексного лечения с включением эндоскопической фототерапии с помощью широкополосного фильтра КС-10 состояние улучшилось, болевой синдром полностью ликвидировался, При фиброгастродуоденоскопии, проведенной на 20 день от начала лечения выявлена полная зпитализация дефекта. Качественное изучение тучных клеток в срезах из биоптата две- надцатиперстной кишки, окрашенных

основным коричневым по М.Г. Шубичу свидетельствует о нахождении тучных клеток продолговатой формы и секретируемых ими веществ в базальной мембране отдельных крипт.

При контрольном вызове через 1,5 года больной жалоб не предъявляет.

Было обследовано 20 человек с язвен- ной болезнью двенадцатиперстной кишки.,

8человек с язвенной болезнью желудка (взрослых) и 16 больных детей в возрасте от

9до 14 лет, имеющих язвенную болезнь двенадцатиперстной кишки. Взрослые

больные получали сеансы фототерапии некогерентным красным светом, дети получали медикаментозное лечение по общепринятой методике. У 2 из 20 больных с язвенной болезнью двенадцатиперстной

кишки на 17 день лечения в биоптате на фоне содержания тучныэГКлеток в собственной пластинке слизистой не обнаружено наличие тучных клеток продолговатой формы вытянутых по базальной мембране в основании крипт двенадцатиперстной кишки. Через 6 месяцев у I больного возник рецидив, у 2-го больного - хирургическое осложнение. Из 8 больных с язвенной болезнью желудка у 1 больного в биоптатах, полученных на 17 и 21

день тучные клетки в слизистой желудка были единичные. Улучшения нет. У 2-го больного с аналогичными показателями через месяц после лечения был диагностирован гастрит пе- ресгройки, что свидетельствовало об

ухудшении структуры слизистой с явлениями атрофии. Из 16 человек детей у двоих при контрольных эндоскопических исследованиях по выписке из стационара в биотатах, полученных из луковицы двенэдцатиперстной кишки, не обнаружено тучных клеток продолговатой формы в криптальном слое двенадцатиперстной кишки. Через три месяца при амбулаторном исследовании эндоскопически обнаружены эрозивные

дуодениты.

У всех остальных больных в базальной мембраны отдельных крипт двенадцатиперстной кишки легко выявляются тучные клетки продолговатой формы и секретируемые ими

вещества, способствующие стабилизации базальной мембраны.

Способ прост в исполнении, не требует сложных математических подсчетов, дорогих реактивов. Точность способа 82%.

Формула изобретения

Способ определения активности репа- ративного процесса при язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки путем микроскопического исследования тучных клеток в слизистой оболочке гастродуоденальной зо

ны, отличающийся тем, что, с целью ные клетки вытянутые по базальной мемб- повышения точности и упрощения способа, ране и при их наличии определяют процесс в слизистой определяют стромальные туч- как активный.