Способ дифференциальной диагностики стабильной и нестабильной стенокардии Советский патент 1992 года по МПК G01N33/68 

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и касается дифференциальной диагностики двух клинических вариантов ишемической болезни сердца - стабильной и нестабильной стенокардии.

Известен способ диагностики стабильной и нестабильной стенокардии путем кл и нико-электро кардиографического обследования больных. Считается, что основной критерий диагностики - клинический, при котором учитывается характер болевого синдрома, его развитие во времени и т.п.

Однако данный способ не обладает достаточной точностью, т.к. в его основе лежит субъективная оценка проявлений заболевания, а в ряде случаев, при атипичной клинической картине, его возможности еще более ограничены. Данные электрокардиографического исследования малоинформативны, отсутствуют специфические изменения на ЭКГ, а мониторирование больных, которое позволяет уточнить диагноз, требует длительного наблюдения и практически недоступно для широкого использования.

Известен способ диагностики стабильной и нестабильной стенокардии путем определения коэффициента интенсивности хемолюминесценции лейкоцитарной массы (авт. св. № 1138127, кл. А 61 В 10/00, 1985), выбранный в качестве прототипа. Этот способ не достаточно специфичен и точен. Поскольку в данном способе применяется биофизический метод, требующий специальной аппаратуры и дефицитного реактива, возможности его широкого использования в лечебно-профилактических учреждениях проблематичны.

Цель изобретения - повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом.

Тромбоциты выделяют из 10 мл крови методом дифференциального центрифугирования, используя при этом посуду с несмачивающейся поверхностью.

V|

2

43

О СО

Взятую натощак из локтевой вены широкой иглой кровь смешивают с 3,2%-ным раствором цитрата натрия в соотношении 9: : 1, затем центрифугируют 10 мин при 120 д. Богатую тромбоцитами плазму отсасывают полиэтиленовым шприцом от осажденных эритроцитов, переносят в другую пробирку и центрифугируют при 1200 д 20 мин.

Для удаления оставшихся эритроцитов полученный осадок суспендируют в 0,84%- ном растворе хлористого аммония в объеме, равном объемом исходной плазмы, выдерживают 10-15 мин в холодильнике и повторно центрифугируют при тех.же условиях. Осадок тромбоцитов ресуспендируют в 2 мл раствора трис (рН - 7,0) и обрабатывают ультразвуковым дезинтегратором при 20 кГц в течение 30 с. Все процедуры проводят при 4°С.

Содержание белка определяют в 0,02 мл полученного гомогената, а активность фосфорилазы А в 0,2 мл (50-100 мкг белка) с использованием инкубационной среды, содержащей в 1 мл конечной концентрации: 2-глицерофосфата натрия 20, цистеин-НС 13, глюкозо-1-фосфат 10, а - 10, ЭДТА - 5,1%-ный раствор гликогена, общий объем 1 мл. Инкубацию проводят при 37°С в течение 20 мин. В отличие от опытных проб в контрольные добавляют глюкозо-1-фосфат после осаждения белков 10%-ным раствором трихлоруксусной кислоты (1 мл). В 0,3 мл безбелкового фильтрата определяют содержание неорганического фосфора тритоно- вым методом на спектрофотометре при 660 нм (5). Активность фермента выражают в мкМР на 1 мг белка за 1 ч инкубации.

Обследовано 70 больных в возрасте от 40 до 60 лет, из них 50 с нестабильной стенокардией, 20 - со стабильным течением стенокардии.

Контрольную группу составили 20 практически здоровых лиц тех же возрастных групп.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Больной В,, 58 лет/предъ- являл жалобы на боли за грудиной сжимающего характера при физической нагрузке. Боли проходят в покое. Длительность заболевания 5 лет. Электрокардиограмма без особенностей.

Активность фосфорилазы А в тромбоцитах 0,44 мкМР/ч/мг белка. Клинический диагноз: ишемическая болезнь сердца. Стенокардия напряжения, стабильное течение.

Пример 2. Больная Б., 61 год. При поступлении в клинику больная жаловалась на боли за грудиной, возникающие при небольшой физической нагрузке (через 100150м ходьбы), Страдает стенокардией 6 лет. Боли за грудиной возникали редко, при значительной физической нагруз :е. Постоянной терапии у больной не было. Состояние

ухудшилось за последние 5-6 недель, Приступы болей участились, стали возникать при незначительной физической нагрузке, боли купировались приемом нитроглицерина. На электрокардиограмме патологиче0 ских изменений не выявлено,

Активность фосфорилазы А в тромбоцитах - 0,45 мкМР/ч/мг белка. Клинический диагноз: ишемическая болезнь сердца. Нестабильная стенокардия.

5 Больной проведена терапия нитратами, аспирином. Через 2 недели самочувствие улучшилось, боли стали редкими, 1-2 раза в сутки, проходили самостоятельно. Стабилизации состояния соответствовало уменьше0 ние активности фосфорилазы А в тромбоцитах до 0,31.

Пример 3. Больной К., 46 лет. Ише- мической болезнью страдает 3 года. Дважды перенес инфаркт миокарда. В до- и

5 постинфарктном периоде сохранялась стенокардия напряжения. На электрокардиограмме выявлены рубцовые изменения передней стенке левого желудочка. Исследование активности фосфорилазы А в тром0 боцитах в период стабильного течения стенокардии выявил ее повышение до 0,44. Через 2 года самочувствие ухудшилось, участились боли, стали более интенсивными, появились боли за грудиной в покое. Актив5 ность фосфорилазы А в тромбоцитах в этот период выросла до 0,67 мк мр/ч/мг белка. Больной был госпитализирован с диагнозом: нестабильная стенокардия. На терапии (финоптин, нитраты) самочувствие улучши0 лось, стабилизировалось. На 14-е сутки пребывания в клинике активность фосфорилазы снизилась до 0,33 мкМР/ч/мг белка, что совпадало со стабилизацией течения стенокардии.

5 Способ дает возможность дифференцировать стадии развития заболевания, судить о степени дестабилизации, а также осуществлять надежный контроль за эффективностью терапии с точностью 99%.

0 Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики стабильной и нестабильной стенокардии путем исследования форменных элементов крови, отличающийся тем, что, с целью

5 повышения точности способа, в тромбоцитах определяют активность фосфорилазы А2 и при значении этого показателя 0,31 - 0.44 мкМР/ч/мг диагностируют стабильную стенокардию, а при значении 0,45 мкМР/ч/мг и более - нестабильную.

Использование: медицина, в частности кардиология для диагностики двух клинических вариантов ишемической болезни сердца - стабильной и нестабильной стенокардии. Цель: повышение точности способа. Сущность изобретения: определяют активность фосфорилазы А2 тромбоцитов и при значении 0,31-0,44 мкМР/час/м активности фосфорилазы А2 диагностируют стабильную, а при значении 0,45 мк МР/час/мг и более - нестабильную стенокардию. Предлагаемый способ не требует специального оборудования, больших затрат времени и может быть широко использован в медицинской практике с точностью постановки диагноза 99%.