Способ дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза легких Советский патент 1992 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики туберкулеза исаркоидоза.

Целью изобретения является повышение точности способа и сокращение времени диагностики.

Способ осуществляют следующим образом.

ч Бронхоальвеолярный смыв (БАС), полученный методом бронхоальвеолярного лаважа во время проведения бронхоскопии, в объеме 8-10 мл помещают в пластиковую пробирку с 1-2 каплями гепарина и хранят на льду (при 0-4С), затем содержимое пробирки центрифугируют в течение 10 мин при 1500 об/мин при 0°С, снимают надосадочную жидкость. Полученный осадок ресуспендируют в 1 мл культуральной 199, заправляют в камеру Горяева для подсчета

общего количества клеток в 5 больших квадратах, делают мазок на клеточный состав БАС (для подсчета процентного соотношения AM, лимфоцитов и нейтрофильных гранулоцитов): для выявления туберкулиновой аллергии на опытное стекло с лункой стерильной пипеткой наносят 0,05 мл раствора туберкулина РЯД, затем в лунки контрольного и опытного стекол наносят по 0,1 мл клеточной взвеси. После 55-65 мин инкубации при тщательно отмывают стекла в культуральной среде 199, резиновым шпателем аккуратно отделяют от стенок лунок прикрепившиеся клетки, добавляя по 0,1 мл среды, заправляют камеру Торяева, под микроскопом производят подсчет количества прикрепившихся под действием антигена клеток, а также и в контроле, в пяти больших квадратах определяют адгезию по формуле

А

rX1o

X

в хс

где А - абсолютное количество альвеолярных макрофагов (AM), прикрепившихся к стеклу(

В - процентное содержание альвеолярных макрофагов в цитограмме БАС;

С - абсолютное количество клеток, выделенных из БАС;

X - относительное число альвеолярных макрофагов, способных к адгезии.

В результате проведенных исследований установлено, что при стимуляции адгезии AM БАС в пределах 25-35% диагностируют туберкулез, менее 25% - саркоидоз.

При осуществлении предлагаемого способа не было зафиксировано случая стимуляции AM БАС при 55-65-минутной стимуляции с туберкулином свыше 35%.

Пример 1. Больная Д., 62-х лет, поступила в отделение терапии туберкулеза и неспецифических заболеваний легких (ИЗЛ) 03.06,86 г. с диагнозом; диссеминированный процесс в легких неясной этиологии. Из анамнеза бмло известно, что 02. г. при профосмотре обнаружены изменения в легких, по поводу чего больная направлена для обследования и лечения в противотуберкулезный диспансер, где находилась в течение 2,5 мес. Так /сак состояние не улучшалось, больная была направлена в Киевский НИИ фтизиатрии и пульмонологии (КНИИФП).

Данные обследования: Нв - 126 г/л; л. 4,1x10 г/л.; э. - 1%; п. - 1%; с. - 52%; л. 37%; м. - 12 %; СОЭ - 9 мм/ч. Общий анализ мочи - без особенностей. В мокро1е микобэктерии туберкулеза (МВТ) не обнаружены. Проба Манту с 2ТЕ - 3x3 мм. Р-графия; на верхушках обоих легких - полиморфные очаги с неровными контурами и инфильтрацией. Фибробронхоскопия (Ф Б С)-без патологии.

Иммунологические исследования БАС, полученного при ФБС, выполнены согласно предлагаемому способу;

определена адгезия (в процентах) AM БАС при 55-минутной инкубации без взаимодействия с туберкулином,

определена адгезия (в процентах) AM БАС при 55-минутной инкубации с т беркулином в концентрации 35 мкг/мл;

сопоставлены результаты и определена стимуляция адгезии AM БАС {в процентах).

Таким образом, при постановке реакции адгезия AM БАС без взаимодействия с туберкулином равнялась 26%, при взаимо; действии-32,5%. Стимуляция адгезии AM БАС составила 25, что подтверждает диагноз туберкулеза у данной больной. Время выполнения способа дифференциальной диагностики - 1 ч 40 мин.

П р и м е р 2. Больной Т., 32-х лет,

поступил в клинику КНИИФП. .

Иммунологические исследования БАС выполнены согласно предлагаемому способу;

определена адгезия (в процентах) AM

0 БАС при 60-минутной инкубации без взаимодействия с туберкулином;

определена адгезия (в процентах) AM БАС при 60-минутной инкубации с туберкулином РРД в концентрации 40 мкг/мл;

5 сопоставлены результаты и определена стимуляция адгезии AM БАС (в процентах). Таким образом, при постановке реакции адгезия AM БАС без взаимодействия с туберкулином равнялась 28%, при взаимодействии с туберкулином - 30,8%. Стимуляция адгезии AM БАС составила 10iO%, что позволяет исключить наличие туберкулезного процесса и подтвердить диагноз сарко.идоза. Время выполнения способа

5 дифференциальной диагностики - 1 ч 59 мин.

Всего обследовано по 30 больных различными формами туберкулеза и саркоидоза легких.

0 Индекс стимуляции адгезии AM БАС без и при взаимодейстйии с туберкулином РРД у больных туберкулезом легких равен 2535%, что является дифференциально диагностическим критерием в определении

5 туберкулезного процесса.

При величине индекса стимуляции адгезии AM БАС при взаимодействии с туберкулином РРД ниже 25% у больных диагностируют саркоидоз.

0 Таким образом, для дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза необходимо вычислить индекс стимуляции адгезии AM БАС при инкубации с туберкулином РРД в концентрации 35-40 мкг/мл в

5 течение 55-65 мин.

Изобретение позволяет сократить время дифференциальной диагностики до 1,5-2 ч путем исключения 5-6-часового зтапа приготовления реактивов непосредственно перед каждым опытом, упростить методику комплекса проведенных диагностических тестов за счет использованияминимального количестве общедоступных реактивов и способа учета результатов и повысить точ5 ность дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза до 96,7%. Формула изобретения Способ дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза легких, включающий забор материала, исследование его

5 17128786

послеинкубациистуберкулином. отл и ч а-на с последующим вычислением индекса

ю щ и и с я тем, что, с целью повышениястимуляции адгезии макрофагов по отношеточности способа и сокращения времени диаг-нию к пробе без туберкулина и при его величине,

ностики, исследуют макрофаги бронхоальвео-равной 25-35 %,диагностируют туберкулез леглярного смыва, причем одну пробу инкубируют5 ких, а при величине индекса меньше 25%

в течение 55-65 мин с 35-40 мкг/мл туберкули-диагностируют саркоидоз легких.

Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза легких. Цель изобретения - повышение точности способа, сокращение времени диагноспики. У больного берут бронхоальвеолярный смыв, центрифугируют, подсчитывают количество альвеолярных макрофагов и одну пробу клеток инкубируют в течение 55-65 мин с 35-40 мкг/мл туберкулина, вычисляют индекс стимуляции адгезии по отношению к пробе без туберкулина и при его величине,равной 25- 35%, диагностируют туберкулез легких, а при величине индекса меньше 25%.- сар- коидоз легких. По сравнению с прототипом сокращается время диагностики в 3-4 раза, а точность возрастает до 96,7%.