Способ дифференциальной диагностики туберкулеза и неспецифических заболеваний легких Советский патент 1990 года по МПК G01N33/68 

Изобретение относится к медицине, в частности фтизиатрии и пульмонологии, и может быть использовано при дифференциальной диагностике туберкулеза и неспецифических заболеваний легких (НЗЛ)

Цель изобретения - повышение точности и дифференциальной диагностики туберкулеза и НЗЛ.

Способ осуществляют следующим образом,

У больного утром натощак из покте- вой вены берут 2 мл крови и выливают в пробирку, где кровь отстаивают для получения сыворотки. Затем к 0,2 мл разбавленной в 100 раз СМРО- ротки крови добавляют 0,2 мл трипсина (12,5 мкг) в количестве, пролшчлющем антипротеолитичеекую активность сыворотки крови. Реакционную смесь выдерживают 15 мин при 20°С для образования комплекса фермент - инги- битор. Объем пробы доводят до 1 мл мединаловым буфером. Затем к смеси добавляют 1 мл 2%-ного раствора казеина и инкубируют 20 мин при 35 С Реакцию останавливают добавлением 3 мл 5%-ного раствора трихлоруксус- ной кислоты (ТХУ), Параллельно проводят контрольную пробу, которая отличается от опытной тем, что ТХУ вносят перед добавлением казеина. В про- зрачной надосадочной жидкости, полученной после центрифугирования проб при 3000 об/мин в течение 30 мин, . определяют оптическую плотность опыт ной пробы против контрольной при 280 нм. Количество оставшегося фермента рассчитывают по калибровочной кривой, составленной по кристалли- ческрму трипсину. Количество связан- ного сывороточными ингибиторами трип сина определяют по разнице между количеством добавленного фермента и фермента, оставшегося после инкубации с сывороткой. Антипротеолитичеекую активность выражают в миллиграм- мах инактивированного фермента в 1 мл сыворотки. После этого больному подкожно у нижнего угла лопатки вводят 1-2,5 мл раствора, содержащег 20-50 ед туберкулина РРД.

Через 48-72 ч повторно утром натощак из локтевой BeTJ берут 2 мл крови и определяют общую антипротеолитичеекую активность сыворотки крови, Рассчитывают разность величин общей антипротеолитической активности сыворотки крови до и после введения туберкулина и при значении ее 0,20 г/л и ниже диагностируют пневмонию, а при значении от 0,21 г/л и более - туберкулез легких..

Пример 1. Больной R., 38 лет поступил в клинику с подозрением на наличие туберкулеза легких, БК(-),

При поступлении: жалобы на кашель с выделением около 50 мл мокроты в сутки. Общий анализ крови: ЛЕЙКОЦИТЫ 5,7 10 9/л, эозинофильные грануло- циты 1, палочкоядерные нейтрофильные гранулоциты 3, сегментоядерные нейтрофильные гранулоциты 53, моноциты 13, лимфоциты 31, СОЭ 18 мм/ч. Общий анализ мочи без особенностей. Анализ мокроты БК-. Реакция Манту

с 2 туберкулиновыми единицами (ТЕ)) РРД-папула диаметром 6 мм. Рентге- нологически в верхней доле правого легкого определяется гомогенная тень без четких контуров 3x5 см. Общая антипротеолитическая активность сыворотки крови цо введения туберкулина равнялась 2,25 г/л, а после подкожного введения 20 ТЕ РРД 2,68 г/л. Разница составляет 0,43 г/л

Диагноз туберкулеза легких в дальнейшем был подтвержден эффективностью проводимого противотуберкулезного лечения.

П р и м е р 2. Больной А., 40 лет, поступил в клинику с подозрением на наличие туберкулеза легких, БК(-), i При поступлении: жалобы на кашель с выделением до 40 мл мокроты в сутки Общий анализ крови: лейкоциты 5,8 10 /л, эозинофильные гранулоциты 2, сегментоядерные нейтрофильные гранулоциты 51, палочкоядерные нейтрофильные гранулоциты 4, лимфоциты 28, моноциты 11, СОЭ 18 мм/ч. Общий анализ мочи бея особенностей. Анализ мокроты БК-о Реакция Манту с 2 ТЕ-па- пула диаметром 10 мм. Рентгенологически в верхней доле левого легкого определяется гомогенное затемнение без четких контуров 4x6 см. Общая антипротеолитическая активность сыворотки крови до введения туберкулина равнялась 1,12 г/л, после подкожного введения 20 ТЕ РРД 1,15 г/л. Разница составила 0,03 г/л.

Диагноз пневмонии в дальнейшем был подтвержден эффективностью проведения неспецифического антибактериального лечения.

П р и м е р 3. Больной А., 40 лет, Поступил с подозрением на наличие туберкулеза легких, БК (-).

Разница величин общей антипротеолитической активности сыворотки крови до и после подкожного введения 20 ТЕ РРД 0,20 г/л.

Диагноз пневмонии в последующем был подтвержден эффективностью проведения неспецифического антибактериального лечения.

П р и м е р 4. Больной П., 29 лет. Поступил с подозрением на наличие туберкулеза легких, БК (-),

Разница величин общей антипротеолитической активности сыворотки крови до и после подкожного вчеде- ния 20 ТЕ РРД 0,21 г/л.

515

Диагноз туберкулеза легких в дальнейшем был подтвержден эффективностью Проведения противотуберкулезного лечения.

П р и м е р 5. Больной В., 55 лет, поступил с подозрением на туберкулез легких, БК (-).

При поступлении жалобы на слабость, сухой кашель. Общий анализ крови: лейкоциты 5,8 10 9/л, эозино- фильные гранулоциты 2, палочкоядерные нейтрофильные гранулоциты 4, сегмен- тоядерные нейтрофильные гранулоциты 52, моноциты 11, лимфоциты 31, СОЭ , 21 мм/ч. Общий анализ мочи без особенностей. Анализ мокроты: микобакте- рии туберкулеза и атипические клетки не обнаружены. Реакция Манту с 2 ТЕ РРД - папула диаметром 8 мм. Рент- генологически в верхней доле правого легкого определяется гомогенная тень без четких контуров 3,5x4,5 см. Общая антипротеолитическая активность сыворотки крови до введения туберку- лина равнялась 2,41 г/л, после подкожного введения туберкулина 20 ТЕ РРД 2,54 г/л. Разница полученных результатов 0,13 г/л. Поставлен диагноз - опухоль первого и второго сег- ментов правого легкого. Произведена резекция верхней доли правого легкого. Диагноз опухоли легкого подтвержден гистологически.

П р и м е р 6. Больной С,, 63 лет, поступил в клинику с подозрением на туберкулез легких, БК (-).

При поступлении: жалобы на кашель с выделением мокроты до 15 мл в сутки, боли в левой половине грудной клетки. Общий анализ крови: дейкоциг ты 6,, эозинофильные гранулоциты 1, сегментоядерные нейтрофильные гранулоциты 53, палочкоядерные нейтрофильные гранулоциты 5, лимфо- циты 29, моноциты 12, СОЭ 22 мм/ч. Общий анализ мочи без особенностей. В мокроте микобактерии туберкулеза и атипические клетки не обнаружены. Реакция Манту с 2 ТЕ РРД - папула диа- метром 11 мм. Рентгенологически в верхней доле левого легкого определяется гомогенное затемнение без четких контуров 4,5x6 см. Общая антипротеолитическая активность сыворот- ки крови до введения туберкулина равнялась 2,27 г/л, после подкожного введения 50 ТЕ РРД 2,38 г/л. Разница полученных результатов 0,11 г/л.

0 5 0

Q fj 0

5

27

Лечение неспецифическнми антибиотиками в течение двух недель не эффективно. Произведена пункция опухоле-. видного образования левого легкого, Диагноз опухоли легкого подтвержден

.гистологически.

Показатели общей антипротеолити- ческой активности сыворотки крови больных туберкулезом и НЗЛ до и после подкожного введения 20-50 ТЕ РРД (Mtra) приведены в таблице.

Показатель антипротеолитической активности сыворотки крови у больных туберкулезом и НЗЛ до введения туберкулина существенным образом не отличается. После подкожного введения туберкулина у больных туберкулезом и НЗЛ отмечается повышение показателей антипротеолитической активности сыворотки крови. Причем при туберкулезе это повышение более существенное, а разница (более 0,21 г/л) становится статистически достоверной (р 0,05).

У всех обследованных больных с пневмонией и опухолями легких разница величин общей антнпротеолитической активности сыворотки крови до и после подкожного введения туберкулина колебалась от 0,01 до 0,20 г/л, а у больных туберкулезом легких эта разница составила 0,21 г/л и более. Лож- ноположительных и ложноотрицательных результатов зарегистрировано не было. Таким образом, предлагаемый способ позволяет у всех больных в 100% случаев проводить дифференциальную диагностику.

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики туберкулеза и неспецифических заболеваний легких путем исследования антипротеолитнческой активности сыворотки крови больного, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, определяют общую антипротеолитическую активность сыворотки крови до и после введения туберкулина, рассчитывают раз-ницу, при ее значении 0,20 г /л и ниже диагностируют неспецифическне заболевания легких, а при значении 0,21 г/л и выше - туберкулез легких.

312,,065 2,55310,065

322,29610,044 2,38610,053

0,25310,004

р :0,05 0,090±0,010

,05

Изобретение относится к медицине, в частности к фтизиатрии и пульмонологии. Цель изобретения - повышение точности способа. Для этого у больного натощак берут 2 мл венозной крови, отделяют сыворотку и определяют в ней общую антипротеолитическую активность (ОАА). Затем вводят больному 20-50 ЕД туберкулина и через 48-72 ч повторно определяют ОАА. Для определения ОАА к 0,2 мл разбавленной в 100 раз сыворотки добавляют 12,5 мкг трипсина в 0,2 мл раствора, инкубируют 15 мин при 20°С и доводят объем пробы до 1 мл буфером. Добавляют 1 мл 2% раствора казеина и инкубируют 20 мин при 35°С. Реакцию останавливают добавлением 3 мл 5% трихлоруксусной кислоты (ТХУ). Контрольная проба отличается от опытной только тем, что ТХУ добавляют раньше казеина. Пробы центрифугируют 30 мин при 3000 об/мин и определяют оптическую плотность супернатанта опытной пробы против контрольной при 280 нм. С помощью калибровочной прямой находят количество трипсина, связываемого сывороточными ингибиторами. Определяют разницу ОАА до и после туберкулиновой пробы и при ее величине 0,21 7/л и более диагностируют туберкулез, а при величине разности 0,20 г/л и менее - неспецифические заболевания легких (НЗЛ). Изобретение позволяет в 100% случаев проводить дифференциальную диагностику туберкулеза и НЗЛ. 1 табл.