Способ определения сорбционной активности рецепторного аппарата эритроцитов человека Советский патент 1992 года по МПК G01N33/531 

Изобретение относится к области медицины и может использоваться в клинической иммунологии для комплексной оценки состояния сорбционной активности рецепторного аппарата эритроцитов.

Целью изобретения является повышение точности способа путем оценки сорбционной активности рецепторного аппарата

ЭРИТРОЦИТОВ:

Указанная цель достигается путем постановки реакции клеточной иммуносорб- ции в которой, согласно изобретению, эритроциты пациента обрабатывают в равных соотношениях сывороткой мыши и определяют сорбционную активность по изменению оптической плотности надосадочной жидкости, при этом уменьшение показателя по сравнению с донорским контролем свидетельствует о снижении сорбционной активности, а увеличение - о ее повышении.

.Способ может быть осуществлен следующим образом

Кровь больного берут в количестве 4-5 мл в пробирку, содержащую 0,1 мл. 2,5 тыс.ЕД гепарина, эритроциты отмывают трехкратным центрифугированием 5-7 минут при 1500 об/мин в фосфатно-солевом буфере (рН 7,2-7,4). Отмытые эритроциты разводят фосфатно-солевым буфером до получения 3-5% суспензии и 1,5 мл полученной суспензии инкубируют при комнатной температуре в течение 40-45 минут с 1,5мл разведенной 1:80-1:100 мы шиной сыворотки, По окончании инкубации смесь центрифугируют 10 минут при 1500 об/мин и измеряют оптическую плотность надосадочной жидкости против контрольной пробы на спектрофотометре при длине волны 280 нм. Контрольная проба представляет собой 1,5 мл мышиной сыворотки взятого разведения, к которым добавляют 1,5 мл фосфатно-солевого буфера и обрабатывают также, как опытную пробу. Полученное значение сравнивают со средним донорским контролем и разность отражает сорбционсл

с

XI

V4 00 4 О VI

ную активность рецепторного аппарата эритроцитов.

Способ может быть проиллюстрирован следующими примерами.

П р и м е р 1. Больной В,, 35 л., история болезни 5367, поступил в городскую инфекционную больницу № 30 им. С.П.Боткина г.Ленинграда в состоянии средней тяжести с жалобами на слабость, тяжесть в правом подреберье, тошноту. При поступлении у больного отмечалась желтуха, гепатомега- лия, в анализах крови - гипербилирубине- мия, гиперферментемия. Поставлен диагноз Острый вирусный гепатит, тяжелое течение. Проведено обследование предлагаемым способом. 1,5 мл. 3% суспензии эритроцитов больного инкубировали в течение 40 минут при комнатной температуре с 1,5 мл мышиной сыворотки в разведении 1:100 и после центрифугирования измеряли оптическую плотность надосадоч- ной жидкости против контрольной пробы. Оптическая плотность составила -0,112 ед.о.п., что составляет примерно 62-63% от донорского контроля (0,17-0,18 ед.о.п.). Прогноз в отношении выздоровления сомнительный, весьма вероятна хронизация процесса, т.к. функциональное состояние рецепторного аппарата эритроцитов нарушено за счет снижения сорбционной актив- ности. Больной поставлен на диспансерный учет ка ф. инфекционных болезней 1 ЛМИ им.акад.И.П.Павлова, назначена базовая терапия.

П р и м е р 2. Больная С., 46 л., история болезни 5/1924 поступила в Ленинградский НИИ кардиологии в удовлетворительном состоянии с жалобами на одышку, отеки, слабость.Наосновании клинико-анамнестических и лабораторных данных был поставлен диагноз: ревматизм,

активная фаза, миокардический кардиосклероз, недостаточность кровообращения 2а. Было проведено исследование предлагаемым способом. 4% суспензию эритроцитов больной инкубировали в течение 45 минут при комнатной температуре мышиной сывороткой в разведении 1:80 и определяли оптическую плотность надосадочной жидкости при длине волны 280 нм, Оптическая плотность составляла -0,10.4 ед.о.п., что составляет примерно 58% от уровня донорского контроля, что позволяет говорить о выраженном снижении функции рецепторов эритроцитов и неблагоприятном прогнозе в отношении полного выздоровления. Использование предлагаемого способа позволяет получить следующий положительный эффект: повышение точности способа за счет оценки сорбционной активности рецепторного аппарата эритроцитов; возможность прогнозирования течения заболевания и коррекции терапии; высокая информативность способа при технической простоте доступности и низкой стоимости исследования.

Формула изобретения Способ определения сорбционной активности рецепторного аппарата эритроцитов человека путем постановки реакции клеточной иммуносорбции, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, эритроциты пациента обрабатывают в равных соотношениях сывороткой мыши и определяют сорбционную активность по изменению плотности надосадочной жидкости, при этом уменьшение показателя по сравнению с донорским контролем свидетельствует о снижении сорбционной активности, а увеличение - о ее повышении.

Использование: в клинической иммунологии для комплексной оценки состояния сорбционной активности рецепторного аппарата эритроцитов. Цель - повышение точности способа путем оценки сорбционной активности рецепторного аппарата эритроцитов, Сущность изобретения: эритроциты пациента обрабатывают в равных соотношениях сывороткой мышки и определяют сорбционную активность по изменению оптической плотности надосадочной жидкости, уменьшение показателя по сравнению с донорским контролем свидетельствует о снижении сорбционной активности, увеличение - о ее повышении.