Средство, обладающее антибактериальной активностью Советский патент 1992 года по МПК A61K35/74 A61K39/395 

Изобретение относится к медицине, в частности к медицинской микробиологии и микробиологической технологии, и касается составов лечебных препаратов, содержащих эубиотики.

Высокий уровень носительства патогенных и условно-патогенных микроорганизмов на слизистых полостей, и в частности ороназофарингеальной и вагинальной, представляет потенциальную опасность развития воспалительных процессов, что приобретает особую значимость в условиях растущего распространения лекарственно-устойчивых штаммов. Проблема санации т. называемого здорового носительства госпитальных штаммов, а также лечения обусловленных ими уже развившихся неспецифических воспалительных

процессов приобретает особую активность для контингентов ослабленных групп - детей раннего возраста, беременных женщин, реконвалесцентов после длительных заболеваний и др В числе таких групп особо ранимыми являются лица с нарушенным иммунологическим статусом,который нередко сочетается с дисбактериозом.

Лечение таких пациентов антибиотиками и другими химиотерапевтическими препаратами не достигает должного эффекта и еще более усугубляет дисбактериоз при одновременном снижении общей иммунологической резистентности. Это требует новых подходов к тактике терапии путем использования мягко действующих препаратов биологической природы, свободных

3

«

vj

от побочного действия химических противо- микробных средств

Известны составы для лечения неспецифических гнойно-воспалительных процессов ороназофарингеальной области, содержащие противостафилококковый анатоксин и бактериофаг в различных сочетаниях с дезинфицирующими средствами и др. Однако эти составы характеризует узкая направленность санирующего действия против стафилококковой этиологии носи- тельства и отсутствие активности против других этиологических факторов, в том числе грамотрицательных микробов, которые приобретают все более важную роль в развитии неспецифических воспалений указанных открытых полостей.

Для целей повышения иммунологической резистентности у ослабленных больных находит применение коммерческий гамма-глобулин. Однако, в его составе содержится главным образом / -иммуноглобулин, тогда как антибактериальные антитела относятся к фракции М Этим можно объяснить недостаточную эффективностьобычныхпрепаратовгамма-глобулина при острых инфекциях у детей раннего возраста, кровь которых отличается низким содержанием иммуноглобулинов классов М и А. Очевидно, что для преодоления этого недостатка необходимы иммуноглобулиновые препараты обогащенного состава, содержащие как G, так М и А-антитела. Наиболее обоснованным и перспективным для указанных целей следует считать подбор сочетаний таких обогащенных иммуноглобулиновых комплексов с микробными эубиотиками, обладающими достаточно широким спектром и высоким уровнем антагонистической активности против возбудителей современных инфекций оппортунистического ряда.

Наиболее близким к заявляемому является состав, содержащий живую культуру молочнокислых бактерий и бифидобактерий согласно патенту США 1986 г. Из описания данного аналога, принятого за прототип, следует, что применяемый состав содержит посуществу три микробных компонента, поскольку в его технологии, кроме молочнокислых и бифидобактерий, используется культура термофильного стрептококка.

Однако наличие трехкомпонентного межвидового микробного комплекса в составе препарата указывает на недостаточную активность молочнокислых бактерий в чистом виде, входящих в препарат. Вместе с тем, усложнение состава является нежелательным качеством препарата из живых культур микроорганизмов в силу сложности

технологии, а главное качественного контроля за стабильностью каждого из компонентов. Кроме того, включение в состав прототипа указанного третьего микробного

компонента требует использования в качестве ростового субстрата молока, что снижает биологическую активность препарата для значительного контингента больных из числа наиболее ослабленных групп, страдающих лактазной недостаточностью. Преодоление данного недостатка требует дополнительных разработок, которые порой служат предметом специальных изобретений. К числу существенных

недостатков прототипа следует также отнести и ограниченность механизма его действия, который определяется, в первую очередь, местным коррекционным влиянием на микрофлору патологического очага и

не направлен на быстрое купирование воспаления и санацию от возбудителя при помощи противомикробных антител через иммунную систему.

В отличие от прототипа, заявляемое

средство, наряду с полезно действующими живыми микробами, содержит в своем составе мощный иммуноглобулиновый компонент, что определяет вторую, не менее важную сторону антибактериальной активности. Последняя обеспечивает не только местное подавление патогенного начала в очаге воспаления, но и стимулирует быструю противомикробную защиту через системный иммунитет. Таким образом,

приведенное сопоставление четко определяет принципиальные преимущества по биологической активности заявляемого средства перед известным.

Приведенные соображения иллю стрируются как результатами лабораторных наблюдений за стабильностью показателей биологической активности средства в процессе хранения (таблицы 1, 2, 3 Акта в комплекте первичных документов заявки),

так и данными экспериментов на модели острой диареи у обезьян.

В группе из 15 обезьян, страдающих острой диареей (жидкий стул с кровью), применение через рот или ректально комплекса иммуноглобулинов КИП в составе средства обеспечивало купирование диареи уже к 3- 4 дню лечения. При исследовании сыворотки крови леченых обезьян в РПГА

обнаружено повышение титров антител против шигелл, эшерихий и сальмонелл на 2-3 двукратных разведения по сравнению с исходным, что указывало на поступление средства в кровь после энтерального введения

Кроме больных обезьян, свечи с КИП были испытаны на трех здоровых обезьянах массой тела 8-10 кг с целью контроля за состоянием сывороточных антител. Кровь для серологических исследований брали до введения свечей, а также на 3-й и 7-й день после их применения. В РПГА определяли титры антител против эшерихий, шигелл и сальмонелл. У всех обезьян на 3 сутки отмечено нарастание титров антител к E.coli (О - диагностикум комплексный) на 2-3 двукратных разведения по сравнению с исходными и сохранение повышенных титров до 7 суток, что свидетельствовало о поступлении средства в кровь после ректального введения.

Цель изобретения - повышение биологической активности средств, содержащих микробные эубиотики.

Поставленная цель достигается тем, что средство содержит живую культуру ацидофильных лактобактерий в сочетании с комплексом сывороточных иммуноглобулинов в одинаковых весовых частях при концентрации жизнеспособных микробных клеток 107-108 на массу 0,1 г и процентном соотношении компонентов в комплексе иммуноглобулинов G:M:A,равном (55-60):(20-25): :(15-20).

В зависимости от способа введения заявляемое средство представляет собой две различных лекарственных формы, а именно:

1)таблетки для орального применения, содержащие:

сухую биомассу ацидофильных лактобактерий25% -0,1 г

сухую биомассу комплекса иммуноглобулинов25% -0.1 г сахарный гранулят50% - 0,2 г стеарат кальция 1.0% - 0,004 г тальк 1,0% -0,004 г

2)медицинские свечи для интраваги- нального введения содержат:

сухую биомассу ацидофильных лактобактерий10,0%-0,2 г.

сухую биомассу комплекса иммуноглобулина,10,0%-0,2 г кондитерский жир 80,0% - 1,5% г парафин7,0% -0.15 г Способ получения предлагаемого двухкомпонентного средства заключается в следующем.

Йммуноглобулиновый компонент КИП получают из III фракции Кона (осадок В) путем солевой экстракции, с последующей обработкой экстракта осадка В хлороформом и декстрансульфатом с целью удаления липопротеидов; далее осуществляют осаждение иммуноглобулинов водорастворимым полимером полиэтиленгликолем (ПЭГ)

в концентрации 12%. Готовый препарат содержит 2% глюкозы. Для предотвращения фрагментации Ig p препарат лиофилизиру- ют. В сухом препарате содержится комп- 5 леке иммуноглобулинов р , М, А в соотношении55-60%, 20-25% и 15-20% соответственно. По сравнению с коммерческим иммуноглобулином КИП содержит повышенные титры антител против ряда эн0 теробактерий (шигелл, сальмонелл, эшерихий), а также против псевдомонад, менингококков и ротавирусов.

Для получения микробного компонента биомассу ацидофильных лактобактерий

5 выращивают в казеиново-дрожжевой среде и сушат лиофильным способом. Сухую микробную биомассу соединяют с сухой биомассой КИП в соотношении 1: 1 и используют для приготовления оральной

0 или ректальной формы заявляемого средства.

Для получения таблеточной формы к смешанной биомассе добавляют структурные и вспомогательные вещества. Получае5 мый состав тщательно перемешивают и таблетируют на ротационном прессе любой марки.

Для получения свечей смешанную биомассу соединяют с расплавленной жировой

0 основой. Полученный состав перемешивают и разливают в охлажденный формовочный аппарат.

Заявляемое средство обладает высокой прямой антибактериальной активно5 стью против широкого круга патогенных и условно-патогенных микробов местно в очаге воспаления или носительства и одновременно содержит антимикробные антитела

0 против кишечной палочки, сальмонелл, шигелл, псевдомонад и менингококка, тогда как обычно применяемый нормальный человеческий гамма-глобулин содержит IgM только в количестве не более 4% от общего

5 белка. Таким образом, средство обеспечивает антибактериальную активность за счет поступающих в кровь антител против таких распространенных этиологических факторов патологии, как шигеллы, сальмонеллы,

0 энтеропатогенные кишечные палочки, псевдомонады, менингококк, ротавирусы и др.

В группе из 30 взрослых здоровых людей-добровольцев были изучены иммуноло- 5 гические сдвиги в сыворотке крови после введения комплекса иммуноглобулинов в состав средства, содержанию 0-антител в РПГА с эритроцитарными диагностикумами - сальмонеллезными (комплексным), из шигелл Флекснера и эшерихиозным (комплексным). Средство вводили через рот (таблетки) или ректально (свечи).

После однократного перорального введения через 2 дня было выявлено нарастание титров антител к энтеробактериям на 2-3 двукратных разведения у всех добровольцев. После ректального введения отмечено нарастание титров антител к энтеробактериям также через 2 дня, преимущественно на 2 двукратных разведения. Группе добровольцев через 3 недели после перорального введения средство было применено ректально. Выявлено повторное нарастание титров антител до уровня, достигнутого при пероральном введении.

В прилагаемом акте лабораторных испытаний заявляемого средства приведены данные об удовлетворительной стабильности микробного и иммуноглобулинового компонентов в его составе при длительном хранении.

Таким образом, предлагаемое средство отличается от ранее известных одновре- менным наличием антибактериальной активности двоякого механизма действия (местный и системный), что предусматривает сочетанное воздействие как непосредственно на микрофлору патологического очага, так и на общую иммунную систему организма.

Результаты предварительных клинических испытаний определяют перспективность применения заявляемого средства с целью лечения воспалительных процессов

открытых полостей и быстрой санации от возбудителей оппортунистических инфекций у лиц с ослабленным иммунологическим статусом и принадлежавших к группам риска по развитию инфекции. Внедрение средства в арсенал отечественных средств бактериальной терапии предполагает и определенный экономический эффект за счет сокращения сроков лечения и расхода менее действенных эубиотиков моносостава, а также нормального иммуноглобулина. Замена инъекционного пути введения последнего на энтеральный у таких больных облегчает лечебную процедуру, что особенно существенно для детей, которые составляют наиболее обширный контингент нуждающихся в коррекционной бактерио- и иммунотерапии.

Формула изобрет.ения

Средство, обладающее антибактериальной активностью, содержащее микробные эубиотики, отличающееся тем, что, с целью повышения биологической активности, в качестве микробного эубиотика средство содержит живую культуру ацидофильных лактобактерий и дополнительно комплекс сывороточных иммуноглобулинов G, М, А при следующем соотношении компонентов. мас.%:

живая культура ацидофильных лактобактерий в концентрации 107-10/ 1г 50

комплекс сывороточных иммуноглобулинов G:M:A(55-60):(20-25):(15-20) 50

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано для повышения общего иммунологического статуса и борьбы со стафилококковой инфекцией. Цель - повышение биологической активности средства. Сущность изобретения: средство содержит живую культуру ацидофильных лактобактерий в сочетании с комплексом сывороточных иммуноглобулинов, взятых в одинаковых весовых частях, при концентрации жизнеспособных микробных клеток 10 -10 на массу 0,1 г и процентном соотношении компонентов в комплексе иммуноглобулина G:M:A, равном (55-60):(20-25):(15-20). Положительный эффект: средство обладает высокой биологической активностью за счет двоякого механизма противомикробного действия. сл с