СРЕДСТВО, СОДЕРЖАЩЕЕ ИММУНОГЛОБУЛИНЫ И ОБЛАДАЮЩЕЕ АНТИБАКТЕРИАЛЬНОЙ И АНТИВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ Российский патент 2012 года по МПК A61K39/395 A61K47/10 A61K47/18 

Описание патента на изобретение RU2453336C1

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано для иммунотерапии и иммунопрофилактики бактериальных и вирусных заболеваний.

Высокий уровень носительства патогенных и условно-патогенных микроорганизмов на слизистых полостях, в частности ороназофарингеальной, представляет потенциальную опасность развития инфекционно-воспалительных процессов, что приобретает особую значимость в условиях растущего распространения лекарственно-устойчивых штаммов. Проблема санации так называемого «здорового носительства» госпитальных штаммов, а также лечения обусловленных ими уже развившихся неспецифических воспалительных процессов, приобретает особую актуальность для контингентов ослабленных групп - детей раннего возраста, беременных женщин, реконвалесцентов после длительных заболеваний и др.

Известны фармацевтические составы для купирования воспалительных процессов назальной полости (области): средства, стимулирующие α- и α+β-адренорецепторы (адреномиметики), противоконгестивные средства (нафтизин, эфедрин, галазолин, пиносол, ринофлуимуцил и пр.), антибиотики и другие антибактериальные средства (изофра, полидекса с фенилэфрином (содержит также адреномиметик) и др.). Эти средства обладают рядом недостатков (привыкание, аллергические реакции, сухость и раздражение слизистых оболочек) и, не являясь биологической защитой, не могут способствовать активации защитных механизмов респираторного тракта и повышению иммунологической резистентности больных.

Известны составы для купирования неспецифических гнойно-воспалительных процессов ороназофарингеальной области, содержащие противостафилококковый анатоксин и бактериофаг в различных сочетаниях с дезинфицирующими средствами и др. Однако эти составы характеризует узкая направленность санирующего действия против стафилококковой этиологии носительства и отсутствие активности против других этиологических факторов, в том числе грамотрицательных микробов, которые приобретают все более важную роль в развитии неспецифических воспалений открытых полостей.

Одним из аналогов заявляемого средства можно считать препарат «Чигаин» (Грипп и другие респираторные вирусные инфекции: эпидемиология, профилактика, диагностика и терапия. СПб., 2003). Препарат представляет собой сыворотку молозивную человека очищенную жидкую, предназначен для профилактики и лечения ОРВИ, омфалитов, молочницы и гнойничковых заболеваний новорожденных и может применяться, в том числе, и назально. Действующим началом чигаина служит иммуноглобулин IgA-класса.

В отличие от чигаина заявляемое средство содержит иммуноглобулины 3-х основных классов (не только IgA, но и IgG и IgM), что значительно расширяет спектр его антибактериальной и антивирусной активности и повышает его клиническую эффективность при назальном применении.

Известны примеры интраназального использования коммерческого гамма-глобулина (Краснов В.В., Пудова К.В., Буйлова Г.Н. Интраназальное применение иммуноглобулина человеческого нормального при острых респираторных вирусных инфекциях у детей. Нижегород. мед. жури. 1998, №1, с.96-98). Однако в его составе содержится главным образом G-иммуноглобулин, тогда как антибактериальные антитела относятся к фракции М. Этим можно объяснить недостаточную эффективность обычных препаратов гамма-глобулина при острых инфекциях у детей раннего возраста, кровь которых отличается низким содержанием иммуноглобулинов классов М и А. Очевидно, что для преодоления этого недостатка необходимы иммуноглобулиновые препараты обогащенного состава, содержащие как G-, так и М- и А-антитела.

Препараты, содержащие несколько классов иммуноглобулинов, а именно IgA, IgM и IgG, представляют собой концентраты антител, опсонизирующая, нейтрализующая и комлементсвязывающая активность которых является основным фактором их клинической эффективности.

В настоящее время в мире выпускаются и применяются в клинике иммуноглобулиновые препараты, обогащенные IgM и IgA, для профилактики и лечения тяжелых бактериальных инфекций, сепсиса, иммунодефицитных заболеваний. Такие препараты могут вводиться как внутривенно, так и энтерально (per os и ректально).

В России таким препаратом является комплексный иммуноглобулиновый препарат (КИП) для энтерального введения, который содержит иммуноглобулины трех основных классов - IgA (15-25%), IgM (15-25%), IgG (50-75%) (RU 2084229). Препарат обладает повышенными титрами антител против ряда энтеробактерий и вирусов. КИП при введении per os может обеспечивать в крови необходимый защитный уровень специфических антител.

В то же время известно, что входными воротами большинства инфекций являются слизистые оболочки (желудочно-кишечного тракта, верхних дыхательных путей и т.д.), местный иммунитет которых представляет первую линию противоинфекционной защиты. Установлено, что иммунная система слизистых оболочек (ИССО) является особым и самостоятельным компонентом иммунной системы организма человека. В противоинфекционной защите ИССО использует как неспецифические (цитокины, естественные киллеры и др.), так и специфические (цитоксические лимфоциты, антитела) механизмы. В ИССО можно выделить индукторные зоны, где антигены распознаются, фагоцитируются и презентируются Т- и В-клеткам, и эффекторные зоны, где иммунокомпетентные клетки выполняют свои функции. В-лимфоциты отвечают за выработку иммуноглобулина А, главного иммуноглобулинового изотипа ИССО, который появляется в индукторных зонах в ответ на антиген. При помощи Т-хелперов и цитокинов часть В-клеток дифференцируется в клетки памяти, а основная их часть мигрирует в эффекторные зоны, такие как собственная пластинка слизистой оболочки кишечника, верхних дыхательных путей, мочеполовой системы, где они трансформируются в IgA-продуцирующие плазматические клетки. Эти клетки синтезируют димеры и полимеры IgA, содержащие J-цепь. Полимерные молекулы IgA легко проникают в слизистые секреты благодаря трансмембранному транспорту, во время которого к ним прикрепляется секреторный компонент, превращающий IgA в секреторный - sIgA. Кроме того, в слизистых секретах можно обнаружить IgM, попавший в них также с помощью трансмембранного транспорта, и IgG, который, в основном, попадает в секреты путем транссудации из кровяного русла. Считается, и этому есть много экспериментальных подтверждений, в частности, исследование Zuercher A.W. et al. (Zuercher A.W., Jiang H.Q., Thurnheer M.C., Cuff C.F., Cebra J.J. Distinct mechanisms for cross-protection of the upper versus lower respiratory tract through intestinal priming. J. Immunol. 2002, vol.169, №7, p.3920-3925), что антиген-специфичные Т-хелперы, такие как СВ8+-цитотоксические клетки, могут циркулировать между индукторными и эффекторными зонами различных слизистых оболочек, обеспечивая феномен «общей иммунной системы слизистых».

В связи с вышеизложенным представляется очевидным использовать иммуноглобулиновые препараты непосредственно на слизистых оболочках, помогая местному иммунитету справиться с инфекцией. В частности, для профилактики и терапии инфекций верхних дыхательных путей наиболее оправданно вводить иммуноглобулины местно, в носовой секрет.

Известные из литературы результаты по интраназальному введению иммуноглобулинов лабораторным животным (мыши, обезьяны) при экспериментальных респираторных инфекциях свидетельствуют о защите животных от инфекции верхних дыхательных путей и ограничении ее распространения в легкие (5, 6, 7, 8).

В связи с этим была поставлена цель разработать новую - интраназальную - лекарственную форму КИП, обеспечивающую поступление иммуноглобулинов непосредственно в носовой секрет, для профилактики и терапии инфекций верхних дыхательных путей, в частности гриппа. Наряду с вируснейтрализирующим действием антител всех изотипов на поверхности слизистой полимерные составляющие препарата (IgA, IgM), которые могут попасть из просвета дыхательных путей внутрь эпителиальных клеток благодаря трансэпителиальному транспорту, будут способствовать нейтрализации вирусов внутри зараженных клеток.

Наиболее близким к заявленному средству аналогом-прототипом является КИП для энтерального введения.

Иммуноглобулиновый компонент КИП получают из III фракции Кона (осадок В) путем солевой экстракции с последующей обработкой экстракта осадка В хлороформом и декстрансульфатом с целью удаления липопротеидов; далее осуществляют осаждение иммуноглобулинов водорастворимым полимером полиэтиленгликолем (ПЭГ) в концентрации 12% (RU 2084229). Готовый препарат содержит 2% глюкозы. Для предотвращения фрагментации IgG препарат лиофилизируют. В сухом препарате содержится комплекс иммуноглобулинов G, М, А в соотношении 50-75%, 15-25% и 15-25% соответственно. По сравнению с коммерческим иммуноглобулином КИП содержит повышенные титры антител против ряда энтеробактерий (шигелл, сальмонелл, эшерихий), а также против псевдомонад, менингококков и ротавирусов.

Таким образом, КИП обеспечивает антибактериальную активность за счет поступающих в кровь антител против таких распространенных этиологических факторов патологии, как шигеллы, сальмонеллы, энтеропатогенные кишечные палочки, псевдомонады, менингококк, ротавирусы и др.

Одной из слабых сторон КИП является недостаточное этиотропное действие при патологических процессах, вызванных ассоциациями микроорганизмов, что ограничивает показания к его применению.

Заявляемое средство, содержащее иммуноглобулины и целевые добавки, является новым и в литературе не описано.

Задачей заявляемого изобретения является повышение биологической активности средства, содержащего иммуноглобулины и целевые добавки за счет местного введения.

Задача решена тем, что средство выполнено в виде назальных капель и содержит следующие ингредиенты: антитела, относящиеся к иммуноглобулину G, против вирусов гриппа А+В, против респираторно-синтициального вируса и против комплексного антигена золотистого стафилококка, определенные методом иммуноферментного анализа (ИФА), антитела, относящиеся хотя бы к одному из изотипов (классов) иммуноглобулинов А и/или М, против вирусов гриппа А+В, против респираторно-синтициального вируса и против комплексного антигена золотистого стафилококка, определенные методом ИФА, при этом иммуноглобулины составляют 90-97 мас.% при соотношении классов: IgA - 10-25%, IgM - 10-25%, IgG - 50-80%; и фармацевтически приемлемые добавки в количестве 3-10 мас.%.

Техническим результатом заявляемого изобретения является эффективное этиотропное действие средства, содержащего иммуноглобулины и целевые добавки, при патологических процессах, вызванных ассоциациями микроорганизмов, за счет местного применения КИП в виде назальных капель, используемых в средстве оптимального перечня и количества специфических антител, изотипов иммуноглобулинов, необходимых добавок и выбора удобной для дозирования лекарственной формы препарата в виде назальных капель. Это расширяет ассортимент препаратов, содержащих иммуноглобулины, и показания к их применению.

Пример 1.

Смесь в виде назального раствора, содержащая IgG-антитела против вирусов гриппа А+В и респираторно-синтициального вируса в количестве 55 RE/мл и 100 RE/мл соответственно, и антитела против комплексного антигена S.aureus в следующих титрах: IgG - 1:10240, IgA - 1:2560, IgM - 1:160, определенные методом ИФА, при этом иммуноглобулины класса А составляют 25%, иммуноглобулины класса G составляют 50% и иммуноглобулины класса М составляют 25%. В качестве антител средство содержит иммуноглобулиновый препарат жидкий в количестве 90% от массы средства, а глицин и глицерин - в количестве 10% от массы средства.

Пример 2.

Смесь в виде назального раствора, содержащая IgG-антитела против вирусов гриппа А+В и респираторно-синтициального вируса в количестве 70 RE/мл и 105 RE/мл соответственно, IgA-антитела против респираторно-синтициального вируса с коэффициентом позитивности, равным 1,3 (коэффициент позитивности равен отношению оптической плотности образца к оптической плотности калибратора, причем образец считается положительным по IgA-антителам при коэффициенте позитивности, превышающем 1,1), и IgG-антитела против комплексного антигена S.aureus в титре 1:5120, определенные методом ИФА, при этом иммуноглобулины класса А составляют 20%, иммуноглобулины класса G составляют 60% и иммуноглобулины класса М составляют 20%. В качестве антител средство содержит иммуноглобулиновый препарат жидкий в количестве 95% от массы средства, а глицин и глицерин - в количестве 5% от массы средства.

Пример 3.

Смесь в виде назального раствора, содержащая IgG-антитела против вирусов гриппа А+В и респираторно-синтициального вируса в количестве 75 RE/мл и 120 RE/мл соответственно, IgA-антитела против вирусов гриппа А+В с коэффициентом позитивности, равным 1,25, антитела против комплексного антигена S.aureus в следующих титрах: IgG - 1:10240, IgA - 1:1280, IgM - 1:160, определенные методом ИФА, при этом иммуноглобулины класса А составляют 15%, иммуноглобулины класса G составляют 70% и иммуноглобулины класса М составляют 15%. В качестве антител средство содержит иммуноглобулиновый препарат жидкий в количестве 92% от массы средства, а глицин и глицерин - в количестве 8% от массы средства.

Источники информации.

1. Грипп и другие респираторные вирусные инфекции: эпидемиология, профилактика, диагностика и терапия. Под ред. Киселева О.И. и др. СПб., 2003, 244 с.

2. Краснов В.В., Пудова К.В., Буйлова Г.Н. Интраназальное применение иммуноглобулина человеческого нормального при острых респираторных вирусных инфекциях у детей. Нижегород. мед. журн. 1998, №1, с.96-98).

3. RU (11) 2084229 (13) C1

4. Zuercher A.W., Jiang H.Q., Thurnheer M.C., Cuff C.F., Cebra J.J. Distinct mechanisms for cross-protection of the upper versus lower respiratory tract through intestinal priming. J. Immunol. 2002, vol.169, №7, p.3920-3925.

5. Graham B.S., Tang Y.W., Gruber W.C. Topical immunoprophylaxis of respiratory syncytial virus (RSV)-challenged mice with RSV-specific immune globulin. J. Infect. Dis. 1995, vol. 171, №6, p.1468-1474.

6. Mazanec М.В., Lamm M.E., Lyn D., Portner A., Nedrud J.G. Comparison of IgA versus IgG monoclonal antibodies for passive immunization of the murine respiratory tract. Virus Res. 1992, vol.23, №1-2, p.1-12.

7. Weltzin R., Hsu S.A., Mittler E.S., Georgakopoulos K., Monath T.P. Intranasal monoclonal immunoglobulin A against respiratory syncytial virus protects against upper and lower respiratory tract infections in mice. Antimicrob. Agents Chemother. 1994, vol.38, №12, p.2785-2791.

8. Weltzin R., Traina-Dorge V., Soike K., Zhang J.Y., Mack P., Soman G. et al. Intranasal monoclonal IgA antibody to respiratory syncytial virus protects rhesus monkey against upper and lower respiratory tract infection. J. Infect. Dis. 1996, vol.174, №2, p.256-261.

Похожие патенты RU2453336C1

название год авторы номер документа
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ КОКЛЮША У ДЕТЕЙ В ВОЗРАСТЕ ДО ТРЕХ ЛЕТ 2014
  • Алёшкин Владимир Андрианович
  • Грачева Нина Михайловна
  • Петрова Марина Семеновна
  • Попова Ольга Петровна
  • Новикова Лидия Ивановна
  • Волков Александр Валерьянович
  • Матвеевская Наталья Сергеевна
  • Малышев Николай Александрович
RU2542377C1
Способ получения иммуноглобулинового препарата для наружного применения 2015
  • Мелихова Александра Вадимовна
  • Климова Эльвира Владимировна
  • Давыдкин Валерий Юрьевич
  • Алешкин Владимир Андрианович
  • Давыдкин Игорь Юрьевич
RU2616266C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОГЛОБУЛИНОВОГО ПРЕПАРАТА 1993
  • Алешкин В.А.
  • Борисова И.В.
  • Новикова Л.И.
RU2073525C1
ИММУНОГЛОБУЛИНОВАЯ ОСНОВА ДЛЯ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ, СУППОЗИТОРИИ И МАЗЬ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ТЕРАПИИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ И ВИРУСНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ 2007
  • Алешкин Владимир Андрианович
  • Афанасьев Станислав Степанович
  • Новикова Лидия Ивановна
  • Борисова Ирина Валериановна
  • Волков Александр Валерьянович
  • Зуева Марина Михайловна
  • Кострова Ольга Михайловна
RU2361612C1
Поликомпонентная вакцина для иммунопрофилактики и иммунотерапии заболеваний, вызываемых условно патогенными микроорганизмами 2022
  • Курбатова Екатерина Алексеевна
  • Грубер Ирина Мироновна
  • Ахматова Нелли Кимовна
  • Воробьёв Денис Сергеевич
  • Семенова Ирина Борисовна
  • Ястребова Наталья Евгеньевна
  • Афанасьева Ольга Максимовна
  • Асташкина Елена Андреевна
  • Дмитриева Мария Николаевна
  • Жигунова Ольга Валерьевна
  • Михайлова Наталья Александровна
  • Свитич Оксана Анатольевна
  • Зверев Виталий Васильевич
RU2786222C1
ЛЕКАРСТВЕННЫЙ ПРЕПАРАТ КОМПЛЕКСНОГО ДЕЙСТВИЯ И СПОСОБ ЕГО ПРОИЗВОДСТВА 2012
  • Анисимов Александр Владимирович
  • Решетник Вячеслав Викторович
RU2519553C1
НОСИТЕЛЬ ЛЕКАРСТВА-АНТИГЕНА, ДАЮЩИЙ ВОЗМОЖНОСТЬ ТРАНСМУКОЗАЛЬНОГО И ТРАНСДЕРМАЛЬНОГО ВВЕДЕНИЯ, СПОСОБ ИНДУЦИРОВАНИЯ МУКОЗАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА, МУКОЗАЛЬНАЯ ВАКЦИНА И СИСТЕМА ДОСТАВКИ ЛЕКАРСТВА, ИСПОЛЬЗУЮЩИЕ ЕГО 2005
  • Кидо Хироши
  • Мидзуно Дай
RU2396090C2
ПРИМЕНЕНИЕ АДСОРБИРОВАННОГО ГОМОГЕНАТА ТРУТНЕВОГО РАСПЛОДА И ВИТАМИНОВ ГРУППЫ D И/ИЛИ ИХ АКТИВНЫХ МЕТАБОЛИТОВ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ОСТРЫХ РЕСПИРАТОРНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ И ГРИППА 2013
  • Струков Виллорий Иванович
  • Прохоров Михаил Дмитриевич
  • Джонс-Струкова Ольга
  • Трифонов Вячеслав Николаевич
  • Елистратова Юлия Анатольевна
  • Елистратов Константин Геннадьевич
  • Курусь Наталья Вячеславовна
  • Еремина Наталья Вячеславовна
  • Максимова Марина Николаевна
  • Галеева Рамзия Тимуршовна
  • Радченко Лариса Григорьевна
  • Федоров Александр Викторович
  • Крутяков Евгений Николаевич
  • Андреева Елена Станиславовна
  • Елистратова Татьяна Викторовна
  • Хомякова Ирина Владимировна
  • Толбина Галина Анатольевна
  • Исмаилова Оксана Александровна
  • Купцова Татьяна Анатольевна
  • Смирнова Наталья Михайловна
  • Щербакова Юлия Геннадьевна
  • Моисеева Инесса Яковлева
  • Елистратов Георгий Максимович
RU2564111C9
СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИТЕЛ - ИММУНОГЛОБУЛИНОВ КЛАССА G В СЫВОРОТКЕ КРОВИ К ВОЗБУДИТЕЛЯМ ТЯЖЕЛЫХ ОСТРЫХ РЕСПИРАТОРНЫХ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ, ВКЛЮЧАЯ SARS-COV-2, С ОДНОВРЕМЕННЫМ ПРОГНОЗОМ ТЯЖЕСТИ ПРОТЕКАНИЯ КОРОНАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ COVID-19, НА ГИДРОГЕЛЕВОМ БИОЧИПЕ 2020
  • Валуев-Эллистон Владимир Треворович
  • Грядунов Дмитрий Александрович
  • Иванов Александр Владимирович
  • Лейнсоо Арво Тоомасович
  • Савватеева Елена Николаевна
  • Филиппова Марина Александровна
RU2746815C1
СПОСОБ ДОСТАВКИ БИОАКТИВНОГО АГЕНТА ЖИВОТНОМУ ДЛЯ ИНИЦИАЦИИ ИММУННОГО ОТВЕТА (ВАРИАНТЫ) 1989
  • Томас Р.Тайс
  • Ричард М.Джилли
  • Джон Х.Элдридж
  • Джей К.Стасс
RU2127118C1

Реферат патента 2012 года СРЕДСТВО, СОДЕРЖАЩЕЕ ИММУНОГЛОБУЛИНЫ И ОБЛАДАЮЩЕЕ АНТИБАКТЕРИАЛЬНОЙ И АНТИВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ

Изобретение относится к медицине и касается средства, содержащего иммуноглобулины, предназначенного для профилактики и терапии респираторных инфекций вирусной и бактериальной этиологии. Изобретение обеспечивает эффективное местное комплексное этиотропное действие средства при патологических процессах, вызванных ассоциациями микроорганизмов и вирусов, за счет сочетания специфических антител, принадлежащих к различным изотипам (классам) иммуноглобулинов. 2 з.п. ф-лы, 3 пр.

Формула изобретения RU 2 453 336 C1

1. Средство, содержащее иммуноглобулины, предназначенное для профилактики и терапии респираторных инфекций вирусной и бактериальной этиологии, отличающееся тем, что оно выполнено в виде назальных капель и содержит следующие ингредиенты: антитела, относящиеся к иммуноглобулину G против вирусов гриппа А+В, против респираторно-синтициального вируса и против комплексного антигена золотистого стафилококка, определенные методом ИФА; и антитела, относящиеся хотя бы к одному из изотипов (классов) иммуноглобулинов А и/или М, против вирусов гриппа А+В, против респираторно-синтициального вируса или против комплексного антигена золотистого стафилококка, определенные методом ИФА; при этом иммуноглобулины составляют 90-97 мас.% при соотношении классов: IgA - 10-25%, IgM - 10-25%, IgG - 50-80%; и фармацевтически приемлемые добавки в количестве 3-10 мас.%.

2. Средство по п.1, отличающееся тем, что в качестве антител оно содержит иммуноглобулиновый препарат жидкий для назального применения в количестве 90-97 мас.%.

3. Средство по п.2, отличающееся тем, что в составе иммуноглобулинового препарата жидкого содержатся глицин и глицерин в количестве 3-10 мас.%.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2012 года RU2453336C1

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОГЛОБУЛИНОВОГО ПРЕПАРАТА ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ТЕРАПИИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ И ВИРУСНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ 1994
  • Алешкин В.А.
  • Борисова И.В.
  • Быко-Янко Г.В.
RU2084229C1
ПРОТИВОВИРУСНОЕ, ПРОТИВОМИКРОБНОЕ И ПРОТИВОКАНДИДОЗНОЕ СРЕДСТВО 1999
  • Лобачев Н.В.
  • Алешкин В.А.
  • Афанасьев С.С.
  • Рубальский О.В.
  • Денисов Л.А.
  • Алешкин А.В.
  • Афанасьев Д.С.
  • Афанасьев М.С.
  • Рубальская Е.Е.
RU2144832C1
RU 2008131896 A, 10.02.2010
Способ приготовления мыла 1923
  • Петров Г.С.
  • Таланцев З.М.
SU2004A1
Nelianne J
Verkaik et al
"Anti-staphylococcal humoral immune response in persistent nasal carriers and noncarriers of Staphylococcus aureus." J Infect Dis
Колосоуборка 1923
  • Беляков И.Д.
SU2009A1
Welliver RC
"Respiratory syncytial virus

RU 2 453 336 C1

Авторы

Алёшкин Владимир Андрианович

Афанасьев Станислав Степанович

Новикова Лидия Ивановна

Борисова Ирина Валериановна

Волков Александр Валерьянович

Зуева Марина Михайловна

Кострова Ольга Михайловна

Лютов Андрей Германович

Даты

2012-06-20Публикация

2010-12-29Подача