Способ воспроизведения лейкозного процесса Советский патент 1993 года по МПК G09B23/28 

; Изобретение относится к ветеринарной онюлогии (лейкозологии) и онковирусоло- гии и может быть использовано для изучение патогенеза и поиска средств профилактики и лечения лейкоза крупного рогатого с кота.

Цель изобретения - ускорение процесса и повышение эффективности воспроизведения.

; П р и м е р 1. Одному из четырех двух- мефчных ягнят, свободных от вируса лейкоза Крупного рогатого скота (ВЛКРС), удаляют селезенку. Через месяц после спл)енэктомии ягнятам внутривенно вводят 3 хЧО8 лимфоцитов, содержащих ВЛКРС, полученных от больной лейкозом коровы (2- 2, после взятия крови). Инфицирован- нос|ь выделяют по появленикТв сыворотке кроЈи специфических противовирусных антител в реакции РИД с гликопротеидным антигеном. Реакцию ставят ежемесячно. Для| выявления лейкомогенного действия в динамике перед взятием в опыт, а ежемесячно проводят подсчет числа лейкоцитов и лимфоцитов, мазки фиксируют окрашивают по Романовскому-Гимза. месяц после заражения у всех ягнят

выявляют антитела к ВЛКРС в реакции РИД, которые сохраняются в течение всего периода наблюдения (40 месяцев). Выраженное повышение числа лейкоцитов более, чем в 3 раза до 35 тыс. в 1 мкл устанавливается у спленэктомированного ягненка, через 12 месяцев после заражения. Через 24 месяца их число превышает 200 тыс. в 1 мкл, а число лимфоцитов вырастает до 95%, Гибель ягненка с признаками генерализованной фор- ,мы лейкоза наступает через 25 месяцев. У трех неспленэктомированных ягнят в течение всего периода наблюдения число лейкоцитов и лимфоцитов остается в пределах физиологической нормы - первый показатель не превышает 12 тыс. в 1 мкл; второй - 55%.

Пример 2. Трехмесячному ягненку,- свободному от ВЛКРС, внутривенно вводят 3 х 10 лим.фоцитов, содержащих ВЛКРС, полученных от больной лимфолейкозом коровы. Инфицированность и лейкомогенное действие ВЛКРС определяют, как в примере 1. Через месяц после заражения у ягненка выявляют антитела к j3 Л КРС в реакции РИД, которые сохраняются в течение всего срока наблюдения (38 месяцев). В течение 27 месяцев после заражения гематологические показателе остаются в пределах физиологической нормы. Через 27 месяцев после заражения ягненку удаляют селезенку, через 5 месяцев после спленэктомии у него от-. мечают увеличение числа лейкоцитов с б- 12 тыс. до 23 тыс. в 1 мкл, а еще через месяц их число возрастает до 45 тыс. 1 мкл. Число лимфоцитов- 92%, что свидетельствует о развитии гематологической формы лейкоза.

П р и м е р 3. Трехмесячному ягненку, свободному от ВЛКРС, внутривенно вводят 3x10 лимфоцитов, содержащих ВЛКРС, полученных от больной лимфолейкозом коровы. Инфицированность и лейкомогенное действие ВЛКРС определяют, как в примере 1. Через месяц после заражения выявляют антитела к ВЛКРС в РИД, которые сохраняются в течение всего периода наблюдения (44 месяца). В течение 37 месяцев после заражения гематологические показатели остаются в пределах физиологической нормы (число лейкоцитов-5-12 тыс. в 1 мкл, число лимфоцитов - 50%). Через 37 месяцев после заражения ягнёнку удаляют селезенку. Через 7 месяце после спленэктомии число лейкоцитов возрастает до 31 тыс. в 1 мкл, а число лимфоцитов увеличивается до 87%, что указывает на развитие гематологической формы лейкоза.

Пример 4. Одному из четырех двухмесячных кроликов, свободных от ВЛКРС, удаляют селезенку. Через месяц после спленэктомии всем кроликам внутривенно вводят 2 х Ю8 лимфоцитов, содержащих ВЛКРС, полученных от коровы, больной лимфолейкозом, ВЛКРС определяют, как в примере 1. Через 2 месяца после заражения у всех кроликов выявляют антитела к ВЛКРС, которые сохраняются в течение всего периода наблюдения (30 месяцев), Спустя еще 5 месяцев количество лейкоцитов у спленэктомированНых кроликов возрастает более, чем в 2 раза до 25,5 тыс. в 1 мкл. Число лимфоцитов возрастает до 90%. Гибель одного кролика с признаками генера- лизованной формы лейкоза наступает через

19 месяцев. У трех неспленэктомированных кроликов в течение всего срока наблюдения число лейкоцитов и лимфоцитов остается в пределах физиологической нормы.

Пример 5. Одному из б двухмесячных кроликов, свободных от ВЛКРС, удаляют селезенку, через месяц после спленэктомии всем кроликам внутривенно вводят 2 х 108 лимфоцитов, содержащих ВЛКРС, полученных от больной лимфолейкозом коровы. Инфицированность и лейкомогенное действие ВЛКРС определяют, как в примере 1. Через 2 месяца после заражения у всех кроликов выявляют антитела к ВЛКРС, которые сохраняются в пределах физиологической нормы в течение всего срока наблюдения. Через 7 месяцев после заражения число лейкоцитов у спленэктомированного кролика возрастает до 24,8 тыс. в 1 мкл, а еще

через 11 месяцев (т.е. через 18 месяцев после заражения) - до 39 тыс. в 1 мкл, число ; лимфоцитов возрастает до 89%. Гибель кролика с признаками генерализо.ванной формы лейкоза наступает через 19 месяцев.

Через 11 месяцев после заражения одному кролику удаляют селез.енку. Через 7 месяцев после спленэктомии число лейкоцитов возрастает до 25,6 тыс. в 1 мкл, а через 18 месяцев после спленэктомии - до

4Т,4тыс. в 1 мкл, а число лимфоцитов составляет 90%. Гибель кролика с признаками ге- нерализованной формы лейкоза наступает через 19 месяцев,

Таким образом, способ позволяет воспроизводить лейкоз крупного рогатого скота на овцах и кроликах в гематологической форме за 5-.18 месяцев, а за 19-24 месяца получать генерализованную форму, приводящую к гибели животного.

Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я

Способ воспроизведения лейкозного процесса, включающий внутривенное введение животному вируссодержащего материала, отличающийся тем, что, с целью

ускорения процесса и пбвышения эффективности воспроизводства, животное перед введением ему вируссодержащего материала спленэктомируют.

Использование: в ветеринарной онкологии. Сущность изобретения: подопытному животному удаляют селезенку. Внутривенно вводят вирусосодержащий материал. Воспроизводят лейкоз в гематологической форме за 5-18 месяцев, а за 19-24 месяца получают генерализованную форму лейкоза, приводящую к гибели животного.