СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РАЗВИТИЯ ЛЕЙКОЗНОГО ПРОЦЕССА У ЗАРАЖЕННОГО ВИРУСОМ ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА Российский патент 2006 года по МПК G01N33/49 G01N33/487 G01N33/48 

Изобретение относится к ветеринарной лейкозологии, касается лабораторной диагностики гематологическим способом и может быть использовано для прогнозирования течения лейкоза крупного рогатого скота в инкубационной стадии.

Лейкоз крупного рогатого скота - хроническая инфекционная болезнь опухолевой природы, вызываемая ретровирусом, который локализуется в организме зараженных животных в лимфоцитах и представляет опасность не только для крупного рогатого скота, но и потенциальную опасность для человека из-за структурных и функциональных характеристик, типичных для Т-лимфотропных вирусов человека, и возможной рекомбинации между вирусом лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) и вирусами Т-клеточного лейкоза человека, а также накоплением в организме зараженных ВЛКРС животных метаболитов с онкогенными свойствами. Уровень инфицированности крупного рогатого скота вирусом лейкоза имеет тенденцию к повышению.

Различают три стадии в развитии лейкозного процесса: инкубационную, гематологическую и опухолевую.

Инкубационная стадия - период с момента внедрения ВЛКРС в организм животного до появления гематологических изменений (лейкоцитоза, лимфоцитоза), характерных для заболевших животных, определяется по появлению первых лейкемических клеток, обнаруживаемых существующими методами исследований.

Переход инкубационной стадии в гематологическую происходит в течение от нескольких недель до многих лет в зависимости от вирулентности ВЛКРС и иммунологического состояния организма животного.

Известен способ прогнозирования развития лейкозного процесса у зараженного вирусом лейкоза крупного рогатого скота, включающий определение уровня лейкоцитов и лимфоцитов в 1 мкл крови в момент выявления инфицированности и соотнесение его с верхней и нижней границами физиологической нормы (1).

Цель изобретения - точный и простой в осуществлении способ прогнозирования развития лейкозного процесса у зараженного вирусом лейкоза крупного рогатого скота в инкубационной стадии.

Поставленная цель достигается способом прогнозирования развития лейкозного процесса у зараженного вирусом лейкоза крупного рогатого скота в инкубационной стадии, включающим дифференцированный подсчет лейкоцитов с учетом относительного числа сегментоядерных нейтрофилов

Техническим результатом изобретения является упрощение и уточнение прогнозирования развития лейкозного процесса.

Зависимость между колебаниями относительного числа сегментоядерных нейтрофилов и течением лейкоза в инкубационной стадии установлена в экспериментальных исследованиях на 134 серонегативных (РИД^-) и 188 (РИД⁺) серопозитивных животных по изучению морфологической картины крови (таблицы 1, 2). Прогностическое значение заявленного критерия подтверждено клиническими исследованиями, серологическим и гематологическим мониторингом (таблица 3).

Таблица 1
Процентное содержание лимфоцитов и сегментоядерных нейтрофилов в крови серонегативных (РИД^-) и серопозитивных коров (РИД⁺) в инкубационной стадииКлетки кровиПроцентное содержание влейкограмме клеток крови (М±т)ДостоверностьРИД^-РИД⁺Лимфоциты63,0±10,9968,0±0,88Р≥0,999Сегментоядерные нейтрофилы23,7±0,7220,5±0,71P≥0,99Таблица 2
Изменение процентного содержания лимфоцитов в зависимости от содержания сегментоядерных нейтрофилов в лейкограмме коров в инкубационной стадииСодержание сегментоядерных нейтрофиловКоличество лейкоцитов в 1 мкл крови (М±m)Количество лимфоцитов (%) (M±m)Достоверность в % лимфоцитов≥206,5±0,5473,0±2,37Р≥0,999≤306,5±0,4553,0±2,69Таблица 3
Процентное содержание лимфоцитов в зависимости от процентного содержания сегментоядерных нейтрофилов у подозрительных на лейкоз и больных лейкозом коровКлетки кровиПодозрительные на лейкоз животныеБольные лейкозом животныеДостоверностьЛейкоциты, тыс. в 1 мкл (М±m)11,8±0,613,6±0,31P≥0,99Лимфоциты (М±m)77,0±1,2390,0±1,71P≥0,999Сегментоядерные нейтрофилы (М±m)17,0±1,276,9±0,63Р≥0,999

Установлено достоверное снижение процентного содержания сегментоядерных нейтрофилов при одновременном увеличении абсолютного числа лимфоцитов у коров РИД⁺ по сравнению с коровами РИД^- (таблица 1).

Изменение процентного содержания лимфоцитов и сегментоядерных нейтрофилов в лейкограмме РИД⁺ - коров в инкубационной стадии характеризовалось обратной зависимостью (таблица 2). Так у коров в инкубационной стадии отмечалось снижение процентного содержания сегментоядерных нейтрофилов до менее 20% при достоверном повышении содержания лимфоцитов (73,0±2,37%), тогда как при повышении процентного содержания сегментоядерных нейтрофилов до более 30%, наблюдалось достоверное снижение процентного содержания лимфоцитов (53,0±2,69%).

Для подозрительных на лейкоз и больных лейкозом коров в гематологической стадии характерно достоверно повышенное число лимфоцитов при низком процентном содержании сегментоядерных нейтрофилов (таблица 3).

Способ осуществляется следующим образом.

Одновременно с выявлением инфицированности у животного определяют количество лейкоцитов в 1 мкл крови и при наличии инкубационной стадии выводят лейкоцитарную формулу, в которой определяют процентное содержание сегментоядерных нейтрофилов. При данном показателе 20% и менее прогнозируют неблагоприятное течение лейкоза.

Сущность способа поясняется примерами.

Пример 1. Корова (инв. №1013, 1999 года рождения) содержалась в условиях хозяйства, неблагополучного по лейкозу крупного рогатого скота (ОПХ «Толмачево», Кстовского района Нижегородской области). Заражение ВЛКРС было выявлено серологическим методом в октябре 2002 года. Одновременно в крови определяли количество лейкоцитов, выводили лейкоцитарную формулу с определением процентного содержания лимфоцитов и сегментоядерных нейтрофилов. Получены следующие показатели: количество лейкоцитов - 7,2 тыс. в 1 мкл крови (при физиологической норме для данного возраста более 11,0 тыс. в 1 мкл крови); процентное содержание лимфоцитов - 60 (при физиологической норме более 70%); процентное содержание сегментоядерных нейтрофилов - 33 (при физиологической норме для данного возраста 35%). Прогноз благоприятный. В течение последующих 1,5 лет при гематологических исследованиях с интервалом в 6 месяцев клинико-гематологических признаков лейкоза не установлено. Количество лейкоцитов составляло 6,9 тыс. в 1 мкл крови, процент лимфоцитов и сегментоядерных нейтрофилов - 65 и 31 соответственно.

Пример 2. Корова (инв. №7045, 1998 года рождения) содержалась в условиях хозяйства, неблагополучного по лейкозу крупного рогатого скота (хозяйство «Центральное» Кстовского района Нижегородской области). Заражение ВЛКРС было выявлено серологическим методом в октябре 2002 года. Одновременно в крови определяли количество лейкоцитов, выводили лейкоцитарную формулу с определением процентного содержания лимфоцитов и сегментоядерных нейтрофилов. Получены следующие показатели: количество лейкоцитов - 8,2 тыс. в 1 мкл крови (при физиологической норме для данного возраста 10,0 тыс. и более в 1 мкл крови); процентное содержание лимфоцитов - 61 (при физиологической норме для данного возраста 65% и более); процентное содержание сегментоядерных нейтрофилов - 19 (при физиологической норме для данного возраста 35%). Прогноз с большой вероятностью неблагоприятный. В течение последующих 1,5 лет при гематологических исследованиях с интервалом в 6 месяцев выявлены клинико-гематологические признаки, характерные для больных лейкозом. Количество лейкоцитов увеличилось до 12,0 тыс. в 1 мкл крови, процент лимфоцитов повысился до 98, а процентное содержание сегментоядерных нейтрофилов уменьшилось до 2.

Пример 3. Корова (инв. №4152, 1995 года рождения) содержалась в условиях хозяйства, неблагополучного по лейкозу крупного рогатого скота (хозяйство «Коминтерн, Кстовского района Нижегородской области). Заражение ВЛКРС было выявлено серологическим методом в октябре 2002 года. Одновременно в крови определяли количество лейкоцитов, процентное содержание лимфоцитов и сегментоядерных нейтрофилов. Получены показатели, характерные для подозрительных на лейкоз животных: количество лейкоцитов - 10,6 тыс. в 1 мкл крови (при физиологической норме для данного возраста 9,0 тыс. и более в 1 мкл крови); процентное содержание лимфоцитов - 58 (при физиологической норме для данного возраста 60% и более); процентное содержание сегментоядерных нейтрофилов - 11 (при физиологической норме для данного возраста 20%). Прогноз неблагоприятный. Через 18 месяцев установлены изменения в крови, характерные для гематологической стадии лейкоза. Количество лейкоцитов составляло 15,2 тыс. в 1 мкл крови, процент лимфоцитов и сегментоядерных нейтрофилов - 91 и 4 соответственно.

Проведенные научно-производственные исследования показали, что заявленный способ при простоте осуществления является достаточно точным и экономически эффективным. Экономическая эффективность обусловлена своевременным проведением противолейкозных мероприятий и эксплуатацией животных, особенно высокопродуктивных, адекватной их физиологическому состоянию.

Источник информации

1. RU 2133035 C1, 10.07.1999 г.

Изобретение относится к ветеринарии. Способ прогнозирования развития лейкозного процесса у зараженного лейкозом крупного рогатого скота включает выявление его инфицированности, определение количества лейкоцитов в 1 мкл крови и соотнесение результатов с физиологической нормой, причем при наличии инкубационной стадии выводят лейкоцитарную формулу с определением процентного содержания сегментоядерных нейтрофилов и при его снижении до 20% и менее прогнозируют неблагоприятное течение лейкоза. Способ обеспечивает упрощение и уточнение прогнозирования развития лейкоза. 3 табл.

Способ прогнозирования развития лейкозного процесса у зараженного лейкозом крупного рогатого скота, включающий выявление его инфицированности, определение количества лейкоцитов в 1 мкл крови и соотнесение результатов с физиологической нормой, отличающийся тем, что при наличии инкубационной стадии выводят лейкоцитарную формулу с определением процентного содержания сегментоядерных нейтрофилов и при его снижении до 20% и менее прогнозируют неблагоприятное течение лейкоза.