Способ диагностики злокачественных лимфом Советский патент 1993 года по МПК G01N33/483 

Изобретение относится к области медицины., а именно к лабораторным методам исследования и может быть использовано для диагностики злокачественных лимфов.

Целью предлагаемого изобретения является обеспечение ранней диагностики заболевания. Поставленная цель достигается тем, что в предлагаемом способе диагностики злокачественных л1лмфом, включающем исследование биологического субстрата, проводят ЯМР-спектроскопию сыворотки крови при напряжении 0,1 в определяют отношение амплитуды сыворотки крови к амплитуде этанола и при значении этого коэффициента. 0,93-0,85 диагностируют злокачественные лимфомы.

Сопоставительный анализ с прототипом показывает, что заявленный способ диагностики злокачественных лимфом отличается тем, что проводят ЯМР-спектроскопию сыворотки крови и при напряжении 0,1 в определяют отношение амплитуды сыворотки к амплитуде этэнола и при значении этого коэффициента 0,85-0,93 диагностируют злокачественные лимфомы.

В предлагаемом способе амплитуду ЯМР-сигнала измеряют при комнатной тем- , пературе (+18°С), что ускоряет проведение замера сигнала. Амплитуду ЯМР сигнала измеряют при значений напряжения 0,1 в, т.к. используемый прибор перед началом работы калибруют по эталонной среде (масло), при напряжении 0,1 в и при температуре +18°С......

При исследовании авторов предлагаемого изобретения сыворотки крови больных злокачественными лимфомами показаниями кумулировались в диапазоне от 0,85 до 0..93 единиц.

Среднестатистическая оценка амплитуд Я.МР-сигнала в относительных единицах сывороток крови здоровых лиц и больных злокачественными лимфомами представлена в таблице.

Известно использование ЯМР-спектро- скопии в медицине. В 1913 г. В.К.Аркадьев

ел

с

00

о ел

СА) 00

о

впервые наблюдал явление парамагнитного резонанса, физическая природа которого описана Pound, Bloembergen (1945), Bloch, Parcel (1946). (Bloembergen N., Purcell E., Paend R. - Phys Rev. 1948, v, 73. з. 679).

Применение-метода ЯМР в медицине обусловлено его безвредностью, быстротой получения результатов исследования, возможностью исследования надмолекулярной структуры тканей. М.ето д позволяет изучить физико-химические свойства биологических тканей и их изменения При заболеваниях.

Использовать эффект ЯМР для изучения строения биологических объектов предложил в 1960 г. советский ученый В.А.Иванов, но в связи с некомпетентностью оценки его изобретения приоритет принадлежит американцу P.Lauferbur (1973 г.). В СССР изобретение Иванова было зарегистрировано в 1984 г.) авторское свидетельство N 894567. Способ определения внутреннего строения материальных объектов. Публикация 9.3.84. (Lauferbur P.С. Image fotmation by induced local interactions, emaxples employing NMR. - Nature, 1973, N 242.. p. 190-191). :

ЯМР используют для определения структуры сложных белков, исследования мембраноактивных комплексов/определения содержания АТФ, АДФ, неорганических фосфатов в тканях и крови (Шульман Р.Г. Исследование живых организмов методом ЯМР, В мире науки (США).. 1983 г., № 3, с.50-58) Андроникашвили Э.Л., исследуя содержание воды в опухолях методом мйк- рокалориметрии, пришел к выводу, что они содержат больше связанной воды. (Андроникашвили Э.Л., Мревлишвили Г.М.).

Исследование состояния воды в опухолевых тканях колориметрическим методом. Доклад АН СССР 1968 г. вып. 2, стр. 463- .465).

Damadian в 1971 г. показал, что время релаксации протонов воды в опухолевых тканях больше, чем в нормальных. (Canadian R. Tumor derectiom by NMR Science, 1971, vol. 171, p. 1151-1153(. Beall. Hazlurood в 1983 г. изучали время релаксации протонов в сыворотке крови онкологических больных. Определяя изменения в сыворотке при онкологической патологии, авторы пришли к выводу, что она содержит меньше связанной воды. (Beall P.T. et al the systemie effect of elevdted tissue and serum relaxation fimes for wafer in animals and human with cancer - Diehl - Berlin, 1981, p, 39-5).

Итак, проведенный поиск известных в науке решений: могущих содержать выявленные признаки (отличительные от прототипа) позволил сделать вывод, что предлагаемое изобретение соответствует критерию существенные отличия,

Исследование проводилось у 40 боль- ных:

лимфогранулематоз - 20 больных ретикулосаркома-11 больных лимфосаркома -4 больных солидные опухоли - 5 больных 0 здоровые лица - 43 человека

Предлагаемый способ диагностики злокачественных лимфом прост, легко воспроизводим, для его проведения требуется 5 минут, способ дает высокую степень досто- 5 верности диагностики - 95%,

Положительный эффект предлагаемого изобретения заключается в том, что:

1. Способ позволяет обеспечить раннюю диагностику лимфом (1 и 2 стадии). 0 2. Для проведения способа необходимо 5 минут, т.е. способ отвечает требованиям Экспресс - диагностики.

3. Способ может быть использовано для предварительного отбора больных с подо- 5 зрением на злокачественную лимфому при профилактических осмотрах.

4. Точность постановки диагноза не зависит от квалификации патоморфолога, а также от количества и качества биоптата.

0 Предлагаемый способ осуществляется следующим образом: 0,5 мл сыворотки крови помещают в стеклянную пробирку, кото- - рую вводят в датчик ЯМР-спектрометра (оригинальный прибор, сконструированный

5 в НПО Кварц и ПО РИАП), с температурной стабилизацией, температуру поддерживают постоянной в течение времени измерения )+18оС). При напряжении генератора 0,1 в измеряют амплитуду ЯМР-сигнала в относи-.

0

тельных единицах: отношение амплитуды

сыворотки в см к амплитуде этанола (растительное масло). При значении этого коэффициента 0,85-0,93 диагностируют злокачественные лимфомы.

5 Примеры конкретного исполнения даны в виде выписок из историй болезни:

Пример 1. К., практически здоров. Анализ крови Нв - 142 г /л, СОЭ - 5 мм Лейкоциты 7,8 109. Из вены взято 5 мл

0 крови, через 24 часа проведено измерение

амплитуды ЯМР - сигнала сыворотки крови.

Получена величина 1,02 относительных еди ницы, что соответствует .интервалу (0,96 1,08), характерному для здоровых людей.

5 п риме р 2. Больная Ш.58 лет, история болезни №552, поступила в ГОД 19.8.85 г. с жалобами на увеличение шейных лимфатических узлов слева. Объективно: шейные лимфоузлы слева величиной с грецкий орех, плотные, не спаянные с кожей. Дыхание ееликулярное, тона сердца ритмичные. Рентгенография грудной клетки: расширение тени средостения. Анализ крови: Нв - 125 г/л, СОЭ - 22 мм, лейкоциты - 6,2 109, Из локтевой вены взято 5 мл крови, через 24 часа проведено измерение амплитуды ЯМ Р- сигнала сыворотки крови. Получена величина 0,93 относительных единицы, что соответствует интервалу (0,85-0,93), характерному для злокачественных лимфом. Гистологическое заключение № 613: ретикулосаркома. Клинический диагноз: ре- тикулосаркома 1 А стадия.

Пример 3. Больная В. 34 лет, историй болезни №771 поступила в ГОД с жалобами на увеличение надключичных лимфатических узлов справа, слабость, длительную субфебрильную температуру, кашель. Объективно: надключичные и шейные лимфоузлы справа увеличенные,, плотные, не спаянные с кожей. Дыхание везикулярное, тоны сердца ритмичные. Рентгенография грудной клетки: расширение тени средостения, Анализ крови: Нв - 132 г.л, СОЭ - 58 мм, лейкоциты - 6,1 109, Из вены взято 5 мл крови, через 24 часа проведенЬ измерение амплитуды ЯМР т сигнала сыворотки крови. Получена величина 0,85 относительных единиц, что соответствует интервалу (0,85-0,93), характерному для злокачественных лимфом. Гистологическое заключение № 986: лимфогранулематоз, смешанно - клеточный вариант. Клинический диагноз: лимфогранулематоз, III В стадия, смешанно - клеточный вариант;

Пример 4. Больной С. 60 лет, история болезни № 1043, поступил в ГОД с жалобами на одышку, кашель, длительную субфеб- риль ную температуру. Объективно: увеличены подмышечные лимфоузлы справа, одышка смешанного характера, тоны сердца ритмичные. Рентгенография грудной клетки: расширение тени средостения. Анализ крови: Нв -128 г/л, СОЭ - 46 мм, лейкоциты - 7,2 1Q9. Из локтевой вены взято 5 мл крови, через 24 часа проведено измерение амплитуды ЯМР-сигнала сыворотки крови. Получена величина 0,87 относительных единиц, что соответствует интервалу (0,85-0,93), характерному для злокачественных лимфом. Гистологическое

заключение № 1118: лимфосаркома. лимфоблэстный вариант. Клинический анализ:

лимфобластнэя лимфосаркома, II А стадия.

Сравнение признаков прототипа и

предполагаемого способа по положительному эффекту:

1. Предлагаемый способ позволяет заподозрить заболевание при отсутствии выраженной клиники, способ - прототип дает морфблогическую структуру уже диагности- рованной ранее опухоли.

2. Способ-прототип не отвечает требованиям экспресс-диагностики, тогда как для проведения предлагаемого способа необходимо лишь 5 минут.

3. Способ-прототип неприемлем для предварительного отбора больных при профилактических осмотрах.

4. В отличие от прототипа, точность предлагаемого способа не зависит от квали- фикаций патоморфолога, а также от количества и качества биоптата.

5. Для проведения способа-прототипа необходимо хирургическое вмешательство, тогда как предлагаемый способ является не- инвазивным.

Предлагаемы способ может быть ис- пользован в клинике для диагностики злокачественных лимфом.

Формула изобретения

Способ диагностики злокачественных лимфом путем исследования биологического материала, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа за

счет ранее диагностики, проводят ЯМР- спектроскопйю сыворотки крови и эталона при напряжении генератора 0,1 В, при этом в качестве эталона используют растительное масло, рассчитывают отношение первого показателя к второму и при его значении 0,85-0,93 диагностируют злокачественные лимфомы.

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ЛИМФОМ

Использование: в медицине, а именно в онкологии. Сущность изобретения: проводят ЯИР-спектроскопию сыворотки крови и этанола при напряжении генератора 0,1 В, при этом в качестве этанола используют, растительное масло, рассчитывают отношение амплитуды сыв оротки крови к амплитуде этанола и при его значении 0,85-0,93 диагностируют злокачественные лимфомы. Способ позволяет повысить точность диагностики за счет раннего выявления злокачественных лимфов. 1 табл.