Способ оценки иммунного статуса каракульских овец Советский патент 1993 года по МПК A01K67/02 

Изобретение относится к области ветеринарии и может быть использовано для определения слабых и нежизнеспособных животных по неспецифической резистент- ности поголовья крупного и мелкого рогатого скота.

Целью изобретения является повышение точности и достоверности оценки иммунного статуса животных.

Цель достигается тем, что в качестве биохимического показателя используют активность миелопероксидазы мышей, определяемую до и после иммунизации эритроцитами исследуемых животных, и по уменьшению через 1 сут активности фермента на 0,50-0,72 единиц среднего цитохимического коэффициента судят о низком уровне, а по уменьшению на 0,8-1,08 - о высоком иммунном статусе животного. .

Широко известно цитохимическое выявление активности миелопероксидазы в нейтрофилах периферической крови человека и млекопитающих.

Изобретение обладает новизной и существенными отличиями по сравнению с известной цитохимической реакцией определения миелопероксидазы в нейтрофилах периферической крови человека и млекопитающих, согласно которой проводят дифференци- ровку клеток миелоидного ряда в костном Mp3re -,tp flbix кейтрофилов и эозинофилов в крови, в-сбязи с чём используют при диаг- ностике лейкозов, в то время как предлагаемый спобоб позволяет судить о состоянии иммунной системы тестируемых животных.

Реакция проводится на мазках периферической крови, приготовленных на пред: метных стеклах и фиксированных в течение 15.с в смеси спирт-формалин (9:1). Мазки

00

со

00

00

00

промывают и инкубируют в течение 15-20 мин в среде следующего состава; 200 мг бензидина, 6 мл 96%-ного этилового спирта, 4 мл дистиллированной воды, 1-2 капли 3%-ной перекиси водорода.

Реактив годен к употреблению в течение 10-12 сут.

После промывки проточной водой мазки окрашивают азур-эозином по Романов- скому-Гимза 10 мин и микроскопируют с масляной иммерсией. Активность фермента вычисляют полуколичественным методом по Kaplow и выражают средним цитохимиче- ским коэффициентом (СЦК),

Предлагаемый способ заключается в следующем.

Мышам вводят внутрибрюшинно суспензию эритроцитов (2% клеток по гематокриту в 0,9%-ном растворе NaCl) тестируемых животных. Через день из капли крови мышей готовят мазки и проводят цитохимическое выявление активности миелопероксидазы. До введения антигена и начала выработки антител СЦК активности миеолопероксида- зы у мышей составлял 2,1 ± 0,9 единиц. После иммунизации через 1 сут наблюдается снижение активности фермента. При этом, чем выше иммунный статус животного, тем ниже падает активность миелопероксидазы нейтрофилов мышей, иммунизированных эритроцитами тестируемых животных, чем меньше падает активность, тем ниже иммунный статус организма животного. Более детально это видно на следующем примере.

П р и м е р. От 25 животных (в данном случае каракульские овцы) была взята кровь. Эритроциты отделили от плзмы и раз- вели 0,9%-ным NaCl до 2 %-ной концентрации по гематокриту. По 0,5 мл таких суспензий были введены внутрибрюшинно 25 мышам. На мазках крови мышей через 1 сут цитохи- мически выявлена активность миелоперок

5 ;

0

5

0

5

0

0

сидазы. Полученные данные приведены в таблице.

Как видно из этих данных, из 25 тексти- руемых животных, находящихся под наблюдением в течение 1,5 лет, пали 9 животных от пневмонии и хронического тимпанита, являющегося признаком альби ноидизма. Павшие животные в 1-4-дневном возрасте согласно предлагаемому способу оценки обладали низким иммунным статусом, т.е. активность миелопероксидазы нейтрофилов мышей, иммунизированных эритроцитами этих 9 животных, уменьшилась только на 0,5-0,72 единицы СЦК. Активность миелопероксидазы нейтрофилов мышей, иммунизированных эритроцитами остальных 16 животных, уменьшилась на 0,8-1,08 единиц СЦК. Все они остались живы, что говорит о достаточно высоком их иммунном статусе.

Таким образом, изобретение по сравнению с прототипом отличается высокой точностью определения, относительно просто, а самое главное позволяет прогнозировать течение и исход многих заболеваний, бактериальных инфекций, протекающих на фоне низкого иммунного статуса.

Формула изобретения Способ оценки иммунного статуса каракульских овец, включающий определение биохимического показателя, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и достоверности способа, в качестве биохимического показателя используют активность миелопероксидазы нейтрофилов мышей, определяемую до и после иммунизации эритроцитами исследуемых животных, и по уменьшению через сутки активности фермента на 0,50-0,72 единиц среднего цитохи- мического коэффициента судят о низком уровне, а по уменьшению на 0,8-1,08 - о высоком иммунном статусе животного.

Продолжение таблицы

Изобретение позволяет определить состояние иммунной системы новорожденных животных и тем самым проводить раннюю выбраковку нежизнеспособных больных животных. Цель изобретения - повышение точности и достоверности способа. Сравнивают активность миелопероксидазы нейтрофилов мышей до и после введения внутрибрюшинно эритроцитов тестируемых животных. Через 1 сут после иммунизации из капли крови мьи шей готовят мазки. Если иммунный статус животного низкий, то средний цитохимиче- ский коэффициент активности миелопероксидазы уменьшается на 0,5-0,72 единицы. При высоком иммунном статусе животного активность фермента иммунизированной мыши уменьшается на 0,8-1,08 единиц, СПК. 1 табл.

Примечание. К- разница СЦКактивностей миелоперкосидазы мышей до и через 1 сут после иммунизации.