Индуктор интерферона Советский патент 1993 года по МПК A61K37/64 

Изобретение относится к экспериментальным областям медицины, ветеринарии и биологии, связанным с веществами, введение которых в клеточные системы и организмы обусловливает выработку факторов неспецифического иммунитета и в частности - интерферона.

Целью изобретения является поиск сре- ды официальных препаратов с широким спектром антибактериального действия индуктора интерферона, обладающего следу- ющимипризнаками: высокая интерфероногенная активность на культуре клеток человеческого происхождения (что важно ввиду видоспецифичности действия интерферона), простой и доступный способ введения препарата, способность индуцировать накопление интерферона в сыворот- ках-людей, относительно низкая стоимость.

Поставленная цель достигается тем, что в качестве индуктора интерферона используют 1,4-ди-М-ок си -2,3-бис-(ацетоксиме- тил)-хинок&алина, или хиноксидин - антимикробное средство широкого спектра действия, у которого авторами настоящей заявки обнаружены интерфероногенные свойства.

Заявляемое решение соответствует критерию новизна, т.к. применение хи- ноксидина направлено на выполнение новой для него функции - индуцировать интерферон -, что не вытекает из известных свойств этого препарата и является неочевидным. Заявляемый индуктор соответствует также критерию существенные отличия, т.к. он химически отличается от прототипа, более активен в культуре клеток человеческого происхождения, вводится дру гим (причем наиболее простым - через рот) путем, способен обусловливать накопление интерферона в сыворотках людей и дешевле; чем прототип. Кроме того, в отлиСО

I

ю

чие от прототипа, он не имеет противопоказаний применения при беременности и недостаточности функции надпочечников в анемнезе.

Ниже приводятся примеры конкретного выполнения изобретения с использованием не токсичных для клеток и разрешенных для приема людям доз хиноксидина,

П р и м е р 1. В пробирку с культуро

клеток фибробластов эмбриона человека (ФЭЧ) с 1 мл питательной среды 199 вносят 1000 мкг хиноксидина, оставляют на контакт в течение 4 час, при 37°С, сливают жидкую фазу, клетки отмывают раствором Хенкса, заливают свежей порцией питательной среды, инкубируют 24 часа при 37°С, собирают культуральную жидкость и по стандартной методике (8) определяют в ней титр интерферона, который равен 1:120.

При мер 2. По методике, описанной в примере 1, проводят испытание с использо- ванием фибробластов эмбрионов кур (ФЭК) й 500 мкгхиноксидина и получают Титр 1:15. . П р и м е р 3. По методике, описанной в примере 1, проводят испытание с использо- ванием мышинных клеток Lg29 и 1000 мкг хиноксидина и получают титр 1:40.

Более полное представление об интер- фероногенной активности заявляемого индуктора на культуре клеток дает таблица. Из нее следует, что хиноксидин обладает индукторными свойствами на всех 3-трех испытанных культурах, причем на наиболее чувствительной из них - ФЭЧ интерферо- н индуцирующая- активность зарегистрирована в довольно широком диапазоне доз от 25 до 1000 . Многочисленные примеры повышения титров 1:16 на клетках ФЭЧ и говорят о том, что хиноксидин в соответствий с существующей классификацией, следует относить к активным индукторам интерферона.; ; :

U

5

0

. 5

0

5

0

При сравнении индукторной активности хиноксидина с прототипом - диоксидином в культуре ФЭЧ установлено: 1) диоксидин был активен в более узком диапазоне доз (50-1000 мкг/мл); чем хиноксидин (25-1000 мкг/мл); 2) осредненные показатели актив ности для испытанных доз хиноксидина и Диоксидинз составили соответственно 1:20t

Ј3.5 и 1:8,3±2,2 (Р 0,05). Эти данные свидетельствуют о более высокой активности заявляемого индуктора над прототипом на клетках человеческого происхождения - наиболее важной для медицинских целей тест- системы.

П Р и м е р 4. Доброволец РЛА (из числа авторов заявки) принимает однократно внутрь 0.5 г хиноксидина. У него до приема, через 8 часов и 24 часа после приема берут кровь, получают сыворотки, в которых затем по стандартной методике (8) определяют титры интерферона, составляющие соответственно 1:5, 1:320, 1:320. Данный пример свидетельствует о том, что при перорал ьном приеме хиноксидина возможна индукция интерферона в бргайизмё человека.

В целом приведенные данные показы- вают.что хиноксидин - высокоактивный ин- , дуктор интерферона, который дешевле прототипа - дйоксидина, .проще его (путем приема внутрь) вводится в организм, более активен на клетках человеческого происхождения, обусловливает накопление интерферона в сыворотках людей и не имеет противопоказаний при беременности и не достаточности функций надпочечников в анамнезе.

Формула и з о б р е. те н и я Применение 1,4-дй-Ы-окси-2,3- бис- {а.цетоксиметил)-хиноксалина в качестве ин- дукторй интерферона.

Использование: экспериментальная медицина и биология: вещества, стимулирую- щие интерферонообразование. Цель: повышение интерфероногенной активности индуктора в культуре клеток человеческого происхождения, упрощение пути его введения в организм и придание способности индуцировать интерферон в сыворотке крови человека, снижение стоимости индуктора. Сущность изобретения: в качестве индуктора интерферона применяют 1,4-ди-М-окси- 2,3-бис-(ацетоксиметил)-хиноксалина (хиноксидин); который обычно используют как антибактериальный препарат, Положительный эффект: увеличение интерферрнин- дуцирующей активности на культуре фибробластов эмбриона человека более чем в 2 раза, возможность перорального приема индуктора, наличие способности индуцировать увеличение титров интерферона в сыворотках людей и снижение стоимости индуктора в 4,1 раза. 1 табл.

Примеры определения интёрфероногенной актиёности хиноксидина в культуре кле:: : .. .V V : -::--- ; ;,; - : : ТОК .. --Л-:... /. / --..

1814902б

Продолжение таблицы