2-Окси-4(5)-этоксикарбонил-5(4)-гидразидокарбонилметилимидазол, обладающий противовирусным действием в отношении вируса гриппа А @ VIстоRIа при профилактическом введении Советский патент 1993 года по МПК C07D233/70 A61K31/415 

Ё

Использование: в качестве препарата, обладающего противовирусным действием в отношении вируса гриппа А2 Victoria при профилактическом -введении. Сущность изобретения: 2-окси-4(5)-этоксикарбонил- 5(4)-гид рази докарбонил метил имида зол. Т.пл. 245°С. ИК (вазелиновое масло): 3250, 3170, 1700, 1650, 1600, 1520. 1360, 1350, 680 ПМР(ДМСО),6(ЗН,1. СНэ);с54,87.12Н,5, CH2-CO-NH-NH2); (55,51 (2Н, dd СН2-СНз); д 10,45 (2Н, S. 5NH-NH2), 6 11, 71 (1Н, S, имидазольного кольца); д 12,01 (1Н, S имида- зольного кольца). Реагент : соответствующий имидазол: Реагент 2: гидразин-гидрат. Среда-спирт, тем-pa комнатная. Выход 92 %. 2 табл.

Иэобретение относится к химии биологически активных веществ, а именно к 2-окси- 4(5)-этоксикарбонил- 5(4}-гидраэидокарбонил- метилимидаэолу, обладающему противовирусной активностью в отношении вируса гриппа AZ Victoria при профилактическом введении. Препарат может найти применение в медицине, фармакологии, а также в качестве модельного ингибитора вирусных инфекций в научно-исследовательской работе.

Формула предлагаемого соединения I:

Н-М-,СООСгН5 N СООС2Н5

0 N CHZ-C-NH-NH но Гснгс-мн-мн2 1 о I

н

i н

Целью изобретения является создание нового активного и малотоксичного вещества ряда имидаэола, обладающего антивирусной активностью,

Поставленная цель достигается за счет взаимодействия 2-окси-4(5) -этоксикарбо- нил-5(4)-этоксикарбонилметилимидаэола с гидразингидратом. Реакция получения проста, не требует сложной аппаратуры, проходит при комнатной температуре, Синтез целевого продукта идет по схеме:

00

ю

со ю о

H-N CH OOCjH,.н „Си M-N-rCOOC,

О VC°°C2H5N H H ° -ЈS- 0JTICH7CONH-NH2

,

Компоненты брали в отношении 1:1, реакционной средой служил спирт. Трехчасовое выдерживание при комнатной температуре приводит к количественному выходу

целевого продукта, ход реакции контроли- ровался методом ТСХ в системе аце- тонтексан 2:1.

Пример 1. К раствору 0,6 г (0,0025 моль) IV в спирте (50 м/,) добавили 0,125 г (0,0025 моль) гидразин-гидрата в 20 мл эта- ноле. Реакционная смесь находилась при комнатной температуре 3 часа, Выпавший осадок отфильтровывали, перекристаллизо- вывали из спирта, выход 0,53 г (92%), , ИК (вазелиновое масло): 3250,3170, 1700, 1650, 1600,1520,1360,1350, 680.

ПМРСДМСО): д 2,6 (ЗН, t, СНз); б4,87 (2Н, S, CH2-CO-NH-NH2): 6 5,51 (2Н, dd, СН2-СНз); 6 10,45 (2Н, S, NH-NH2); д 11,71 (1Н, S, имидазольного кольца); д 12,01 (1Н, S, имидазольного кольца).

Пример 2. Острую токсичность нового соединения определяли по методике Бер- нса на неинбредных белых мышах массой 14-20 г. Значение LDso при внутрибрюшин- ном введении для соединения I составило 885,72 мг/кг. Результаты исследований острой токсичности соединения I в сравнении с базовым соединением VII (ремантадином) приведены в табл.1.

Пример 3. Противовирусную активность соединения I относительно вируса гриппа А2 Victoria определяли в сравнении с соединением VII на развивающихся 10- дневных куриных эмбрионах (КЭ), заражен- ных вирусом гриппа в разведении ,

Соединения растворяли в ДМСО и вводили в хорионаллантоисную полость куриных эмбрионов однократно в обьеме 0,1 мл. Концентрация соединения I составила 0,7 мг/мл, а соединения VII - 2,1 мг/мл. Вещества I, VII вводили за 1 час до введения вируса (профилактическое введение). Контролем служили эмбрионы в которые вводили вирус в разведении 10 в ДМСО в обьеме 0,1 мл, что соответствовало таковому при опытном заражении.

Куриные эмбрионы инкубировали в термостате при 34°С 48 ч. Наличие вируса в эмбрионах проверяли по реакции гемагглю- тинации (РГА) с 1 % куриными эритроцитами. Оценку эффективности соединений

проводили по индексу защиты и среднему геометрическому титру вируса (СГТ) по РГА в аллантоисной жидкости контрольных и опытных эмбрионов. Индекс защиты (Из) вычисляли по формуле:

Из 100, где Кз - коэффициент защиты

Кз

процент эмбрионов с вирусом в контроле процент эмбрионов с вирусом в опыте

Соединение оценивали как активное, если индекс защиты превышал 50%.

Результаты исследования биологического действия нового соединения I в сравнении с соединением VII приведены в табл.2.

Из данных табл.1 следует, что LD при в/б введении у соединения I оказалось в 5,9 раз меньше, чем у соединения VII соответственно.

Из данных табл.2, следует, что новое соединение не только обладает высокой противовирусной активностью относительно вируса гриппа А2 Victoria при профилактическом введении (Из - 100), но и проявляет указанную активность в концентрации в 3 раза меньшей, чем соединение VII, т.е. активнее его в 4,2 раза, соответственно.

Таким образом, 2-окси-4(5}-этоксикар- бонил-5(4)-гидразидокарбонилметилимида- зол обладает в отношении вируса гриппа А2 Victoria противовирусной активностью в сочетании со значительно меньшей, чем у известных соединений токсичностью.

Формула изобретения 2-Окси-4(5}-этоксикарбонил-5(4)-гидра- зидокарбонилметилимидазол формулы

,CH2CONH-NH2

но Дсоосгн5 н

обладающий противовирусным действием в отношении вируса гриппа Аз Victoria при профилактическом введении.

Сравнительное изучение острой токсичности при внутрибрюшинном введении

Влияние соединений I и VII на вирус гриппа А2 Victoria в развивающихся куриных эмбрионах при профилактическом введении

Примечание: разведение вируса 10 , количество КЭ 12.

Таблица 1

Таблица 2