Способ диагностики лихорадки Ку у животных Советский патент 1993 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, в частности к способу серологической диагностики лихорадки Ку, и может быть рекомендовано для выявления больных и переболевших животных.

Цель изобретения - разработка эффективного способа диагностики лихорадки Ку у животных с комплексным антигеном из коксиелл Бернета 1 и II фазы по РДСК и упрощение и удешевление технологии постановки серологических реакций.

Поставленную цель достигают составлением комплексного антигена из корпуску- лярных коксиелл Бернета II фазы (производство института эпидемиологии и микробиологии им. Гамалеи или Ташкентского института вакцин и сывороток) и растворимого антигена 1-ой фазы из штамма Грита по гв.с. № 1236631 путем физического смешивания в рабочих дозах (об/об) 1:1- 1:2. С этой целью путем предварительного титрования антигенов в гемосистеме РДСК устанавливают рабочие титры отдельно 1-й и 11-й фаз, определяют их рабочие дозы для опытных исследуемых проб сывороток крови и составляют смесь не физрастворе в соотношении фаз 1:1 - 12.

Примеры по составлению комплексного антигена

П р и м е р 1. Проводились опыты по титрации известных антигенов коксиелл Бернета I и Н фаз в РДСК с целью определения рабочих доз. Титрация проводилась по общепринятой для РДСК методике.

Результаты опытов представлены в табл.1

В речультате опытов установлено титр антигена ll-й фззы равен 1 :Я, 1-й фазы - 128.

Для постановки РДСК согласно Методических указаний по серологической диаг- ностике лихорадки Ку животных, утвержденного ГУВ МСХ СССР 1409.84 г. используют в удвоенном титре, следовательно, олбоией дозой антигенов для коксиелл Бсрнетз l-ой фазы будет 1:64-, 2-ой фазы - 1:4

П р и м е р 2. Опыты по составлению комплексного антигена путем физического смешивания антигенов коксиелл Бернета I- ой и ll-ой фазы в рабочих дозах в соотноше4J

fe

00

ю N ел

00

го

ниях 1:1, 1:2 и 1:4 и изучение их специфичности к иммунным сывороткам крови от зараженных с возбудителем лихорадки Ку морских свинок.

С этой целью антигены 1-й и 11-й фазы в рабочих дозах на физиологическом растворе по общепринятой методике смешивались, например, путем добавления к 10 мл лнтигена 1-й фазы + 10 мл антигена 11-й (1.1), соответственно 6,67 мл 1-й фазы + 3.33 мл 11-й фазы (1:2) и 7,5 мл I и фазы + 2 мл 11-й фазы (1.1) и, наобороз, путем добавления соотвегс г вен но к аи п. гену П-й фазы получение соотношений I и фазы 1:1, 1:2 и 1.4. Полученными разведениями смесей анти- геноп 1-й и l -й фаз коксиелл Бернета ставились РДСК на специфическую активность комплексных антигенов с иммунными сыао- ротками от морских свинок. Результаты представлены в табл.2.

В результате проведенных опытов установлено, что комплексный антиген проявляет себя в наиболее высокой активности с иммунной сывороткой от зараженных с возбудителем лихорадки Ку животных при соотношениях разведения смесей антигенов I и II фаз 1:1 и 1.2. Наивысшая активность проявляется в соотношениях антигенов в комплексе 1:1, котооый был использован в да. ьнсиших опытах.

П р и м е р 3. Проводились специальные опыты по изучению специфической актив- ногти комплексного антигена в РДСК с ге- терологичными иммунными сыворотками от животных, зараженных возбудителями бруцеллеза, листериоза, парагриппозной и хла- мидийной инфекций. Результаты представлены в табл. 3.

Из данной таблицы следует, что гетеро- логичные иммунные сыворотки от больных и зараженных животных бруцеллезом, лис- териозом. парагриппом и хламидиозом по РДСК с комплексным антигеном лихорадки Ку дают отрицательную реакцию при положительной реакции в контроле - со специфической иммунной сывороткой.

П р и м е р 4. Предложенное техническое решение апробировалось в производственных условиях при исследовании сыворотки крови животных 18 проб по реакции длительного связывания комплемента (РДСК). По данной реакции комплексный антиген сравнивался с антигенами в отдельности коксиелл Бернета I и I фазы. Результаты представлены в табл.4.

Из таблицы видно, что комплексный антиген выявляет в сыворотке крови и животных специфические антитела к антигенам как в фазе I, так и в фазе II. Таким образом, исключается необходимость исследования

сыворотки крови на лихорадку Ку с антигенами фазы I и фазы II в отдельности.

Технико-экономическая эффективность предлагаемого изобретения заключается в том, что использование комплексного антигена по серологической диагностике лихорадки Ку, например, в РДСК позволяет сэкономить дорогостоящих компонентов реакции (комплемент, гемолизин, эритроциты, антигены и др.), повышает производительность труда и ускоряет серологическую диагностику в два раза и, очевидно, позволяет выявить с помощью компонента антигенов П-й фазы животных со свежим течением инфекции и компонента 1-й фазы

животным с хроническим течением или обнаружить следовой иммунологический ответ анамнестического характера в хозяйствах ранее неблагополучных по данной инфекции для взятия их на ветеринарный

контроль.

Формула изобретения Способ диагностики лихорадки Ку у животных путем постановки серологической

реакции с антигенами I и II фаз с последующим учетом полученных результатов, отличающийся тем, что ставят реакцию длительного связывания компонента, при этом антигены I и II фаз перед постановкой

реакции смешивают в рабочих титрах в соотношении (об/об) 1:1 - 1:2.

Т а б л и ц а 1

Использование: ветеринарная микробиология, иммунология, комплексный антиген из коксиелл Бернета I и II фазы, серологическая диагностика лихорадки Ку. Сущность изобретения: получают комплексный антиген посредством физического смешивания антигенов II фазы и I фазы из шт. Грита в рабочих дозах в соотношении 1:1-1:2. 4 табл.

Примечание. Крестиками обозначено задержка гемолиза эритроцитов.

Таблица 2

Примечание. Крестиками обозначена степень задержки гемолиза в РДСК.

Примечание:- обозначено отрицательная РДСК;

+ степень задержки гемолиза по РДСК (положительная реакция).

Таблица 3

Таблица 4

Продолжение табл.4

Продолжение табл.4