fe
Использование: в качестве веществ, обладающих гипогликемическим действием. Сущность изобретения: продукт - (S)X+)-2- этокси-4-{М-{Н2-пиперидино-фенил)-3-ме тия-1 -бутил - аминокарбонил метил бензойная кислота; т.пл. 130-131 °С.а о20 +7,45° (с 1,06 в метаноле). Выход 87,7%. Реагент 1; сложный эфир (3)-2-этокси-4- М- /1-(2-пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутил/ аминохарбонилметил}-бензойной кислоты. Реагент 2: неорганическая или органическая кислота, или гидрокси натрия или калия, или катализатор гидрирования. Условия реакции: в среде органического растворителя. 2 ил.
Изобретение относится к новому соединению, имеющему фармакологическое действие, в частности к (5Х+)-2-этокси-4-{Ы- 1-{2-пипе- ридино-фенил)3-метил-1-бутил аминокар- бонилметил}-бензойной кислоте, ее гидрату или физиологически переносимой соли, имеющим гипогликемическое действие.
Известно, что производные бензойной кислоты, напр.. рацемат 2-этокси-4-{М-{1-{2- пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутил ами- нокарбонилметил}-бензойной кислоты формулы н,с СН,
сн
I СН7
Ьн
C-NH-CO-CHj-Q-COOH
KDОСгН5
и его физиологически переносимые соли обладают гипогликемическим действием.
Цель изобретения - получение нового производного бензойной кислоты, обладающего повышенной эффективностью по сравнению с вышеназванным рацематом.
Поставленная цель достигается (З)-анантиомером 2-этокси-4-{М-{1-2- пиперидино-фенил)3-метил-1-бутил. аминокарбонилметил}-бензойной кислоты, ее гидратом или физиологически переносимой солью.
(SJ-энантиомер получают следующим образом.
а) Взаимодействие (5}-амина формулы
00 Сл
i
со
сн
з/СН3 СН ,
сн, Ьн
C-NH2
ю ,
с карбоновой кислотой общей формулы
. . .
HOOC-CH Q-W (Щ,
ОС2Н5
где W означает карбоксильную группу или снабженную защитным радикалом карбоксильную группу,
или с ее получаемыми, в случае необходимости, In situ, реакционноспособными производными, и, в случае необходимости, последующее отщепление защитного радикала.
В качестве реакционнеспособного производного соединения общей формулы (II) можно использовать, например, его сложные эфиры, например, сложный метиловый эфир, сложный этиловый эфир или сложный бензиловый эфир, его сложные тиоэфиры, например, сложный метилтиоэфир или сложный этилтиоэфир, его галогениды, например, хлорангидрид кислоты, его ангидриды или ими дазо л иды.
Взаимодействие целесообразно осуществляют в среде растворителя, например, метиленхлорида, хлороформа, четыреххло- ристого углерода, простого эфира, тетрагид- рофурана, диоксана, бензола, толуола, ацетонитрила или диметилформамида, в случае необходимости, в присутствии активирующего кислоту агента или обезвоживающего агента, например, в присутствии сложного этилового эфира хлормуравьйно- вой кислоты, сложного изобутилового эфира хлормуравьиновой кислоты, тионилхлори- да, треххлористого фосфора, полупятиокиси фосфора, N,N -дициклогексилкарбодиими- да, М.Ы -дициклогексилкарбодиимида и N -оксисукцинимида, М,М-карбонилдиимида- зола или Ы,м -тионилдиимидазола или tpn- фенилфоисина и четыреххлористого углерода, или активирующего аминогруппу агента, например, треххлористого фосфора, и, в случае необходимости, в присутствии неорганического основания, например, карбоната натрия, или третичного органического основания, например, триэтиламина или пиридина, которые одновременно могут
0
5
0
0
5
0
5
0
5
служить в качестве растворителя, при температуре -25 - 250°С, предпочтительно, однако, между -10°С и температурой кипения используемого растворителя. Взаимодействие также можно осуществлять без растворителя, Кроме того, образующуюся вовремя взаимодействия воду можно удалять путем ацеотропной перегонки, например, путем нагревания с толуолом на водоотделителе или путем добавления сушильного агента, например, сульфата магния или молекулярного сита.
Возможно необходимое последующее отщепление защитного радикала предпочтительно осуществляют путем гидролиза, целесообразно или в присутствии кислоты, например, соляной кислоты, фосфорной хислоты, трифторуксусной кислоты или трихлоруксусной кислоты, или в присутствии основания, например, .гидроокиси натрия или калия, в среде пригодного растворителя, например, воды, метанола, смеси метанола и воды,, этанола, смеси этанола и воды, смеси воды и изопропанола или смеси воды и диоксана, при температуре -10-120°С, например при температуре между комнатной температурой и точкой кипения реакционной смеси.
Используемый в качестве защитного радикала трет.бутил можно отщеплять термически, в случае необходимости, в среде инертного растворителя, например, метиленхлорида, хлороформа, бензола, толуола, тетрагидрофурана, диоксана или ледяной уксусной кислоты, и предпочтительно сильной кислоты, например, трифторуксусной кислоты, бромистого водорода, п-толуол- сульфокислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты или полифосфорной кислоты.
Используемый в качестве защитного радикала бензил можно отщеплять путем гид- рогенолиза в присутствии катализатора гидрирования, например, палладия на угле, в среде пригодного растворителя, например, метанола, этанола, смеси этанола и воды, ледяной уксусной кислоты, сложного этилового эфира уксусной кислоты, диоксана или диметилформамида.
6) Расщепление (5)-соединения общей формулы
сн3 „cnv
Чй
5
I СН
(НО
г
s
ц-C-NH-CO-CHfQ...
NЈ)осгн5
где А означает группу, путем гидролиза, термолиза или гидрогенолиза переводимую в карбоксильную группу.
Поддающейся гидролизу группой могут являться, функциональные производные карбоксильные группы, например, ее незамещенные или замещенные амиды, сложные эфиры, сложные тиоэфиры, сложные ортозфиры, простые иминоэфиры.амидины или ангидриды, нитрил, тетразолил, незаме- щенный йли замещенный 1,3-оксозол-2-ил или 1,3-оксазолин-2-ил, отщепляемой путем термолиза группой могут быть, сложные эфиры с третичными спиртами, например, сложный трет.бутиловый эфир, а отщепляе- мой путем гидрогенолиза группой могут являться аралкилы, например, бензил. Гидролиз целесообразно осуществляют или в присутствии кислоты, например, соляной кислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты, трифторуксусной кислоты или трихло- руксусной кислоты, или в присутствии основания, например, гидроокиси натрия или калия, в среде пригодного растворителя, например, воды, смеси воды и метанола, этанола, смеси воды и этанола, смеси воды и йзрпропанола или смеси воды и диоксана, при температуре -10-120°С, например, при температуре между комнатной температурой и точкой кипения реакционной смеси.
В этом случае, если в соединении общей формулы (III) А означает нитрил или амино- карбонил, то данные группы можно переводить в карбоксильную группу 100%-ной фосфорной кислотой, при температуре 100- 180°С, предпочтительно при температуре 120-160°С, или нитритом, например, нитритом натрия, в присутствии кислоты, например, серной кислоты, причем последнюю целесообразно одновременно используют в качестве растворителя, при температуре 0- 50°С.
В том случае, если в соединении общей формулы (III) А означает, например, трет-бутилоксикарбонил, то трет-бутил мож- но отщеплять термически, в случае необходимости, в среде инертного растворителя, например, метиленхлорида. хлороформа, бензола, толуола, тетра гидрофура на, диоксана или ледяной уксусной кислоты, и, предпоч- тительно, в присутствии сильной кислоты, например, трифторуксусной кислоты, бромистого водорода, п-толуолсульфокислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты или полифосфорной кислоты, при температуре 0- 100°С, предпочтительно при температуре между 20°С и точкой кипения используемого растворителя,
В том случае, если в соединении общей формулы (III) А означает, например, бенэцлоксикарбонил, то бензил можно отщеплять путем гидрогенолиза в присутствии катализатора гидрирования, например, палладия на угле, в среде пригодного растворителя, например, метанола, этанола, смеси метанола и воды, смеси этанола и воды, ледяной уксусной кислоты, диоксана или диметил- формамида, предпочтительно при темпера-, туре 0-50°С, например, при комнатной температуре и водородном давлении 1-5 бар.
в) Взаимодействие (5)-соеди нения общей формулы
С з/СН3
сн
СИ,
1/н
Y-C-NH-CO-CH2-O-W (iv),
NOон
где W -означает карбоксильную группу или алкоксикарбонил с 2-5 атомами углерода в общей сложности, причем алкильная часть алкоксигрулпы не замещена или замещена фенилом, с соединением общей формулы
Z-CHa-СНз(V)
где Z означает нуклеофильно заменяемую группу, например, атом галогена, сульфони- локсигруппу, или вместе с соседним атомом водорода диазогруппу и, в случае необходимости, последующий гидролиз или гидроге- нолиз. Взаимодействие целесообразно осуществляют с соответствующим галогени- дом, сложным эфиром сульфокислоты или сложным диэфиром серной кислоты, например, этилбромидом, этилйодидом, диэтил- сульфатом, сложным этиловым эфиром п-толуолсульфокилоты или метансульфокис- лоты, или диаэоэтаном, в случае необходимости, в присутствии основания, например, гидрида натрия, карбоната калия гидроокиси натрия, трет-бутилата г,алия или трйэти- ламина, предпочтительно s среде пригодного растворителя, например, ацетона, простого диэтилового эфира, тетрагид- рофурэна, диоксана, пиридина или диметилформамида, при температуре 0- 100°С, предпочтительно при температуре 20-50° С.
В том случае, если в соединении общей формулы (IV) W означает карбоксильную группу, то ее можно переводить в соответствующий сложный эфир.
В случае необходимости последующий гидролиз осуществляют или в присутствии кислоты, например, соляной кислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты, трифто- руксусной кислоты или трихлоруксусной кислоты, или в присутствии основания, например, гидроокиси натрия или калия, вереде пригодного растворителя, например, воды, метанола, смеси воды и метанола, этанола, смеси воды и этанола, смеси воды и изопропанола или смеси воды и диоксана, при температуре -10-120°С, например, при температуре между комнатной температурой и точкой кипения реакционной смеси, или последующий гидрогенолиэ осуществляют в присутствии катализатора гидрирования, например, палладия на угле, в среде пригодного растворителя, например, метанола, этанола, смеси этанола и воды, ледяной уксусной кислоты, сложного этилового эфира уксусной кислоты, диоксана или ди- метилформамида, при водородном давлении 1-10 бар.
г) Энантиоселектиеное восстановление соединения общей формулы
t
У-СО-СН0-/Л
(V1)
-NQОС2Н5
где W означает карбоксильную группу или алкоксикарбонил с 2-5 атомами углерода в общей сложности, причем алкилькая часть алкоксигруппы не замещена или замещена фенилом,а
Y - группа формулы
ХН,
ХСН
V
II
-C-NH
СН,
СН,
снэ х
Н
-C-NHили
сн сн, сн - сн.
2 случае необходимости, с последующим гидролизом,
Восстановление предпочтительно осуществляют водородом в присутствии пригодного хирального катализатора гидрирования в среде пригодного растворителя, например, метанола, этанола, изопропанола, этилацета- та, диоксана, тетрагидрофурана, смеси метанола и тетрагидрофурана, смеси метанола и метиленхлорида, смеси этанола и метилен- хлорида или смеси изопропанола и метиленхлорида, при температуре 0-100°С. предпочтительно, однако, при температуре 20-50°С, и водородном давлении 1-1000 бар, предпочтительно 5-100 б.ар, целесообразно
с добавлением 0,1-5%. предпочтительно 0,3-1%, тетраиэопропилата титана (IV), и, предпочтительно, с исключением кислорода воздуха. Предпочтительно восстановление осуществляют с (Е)-формой соединения общей формулы (VI).
В качестве хирального катализатора гидрирования можно использовать соответствующие комплексы лиганда металла, например, Ru(OCO-CH3)2(S)-BINAP, Ru2CU(S) х М(С2Нф, Rh(S)-BINAP- NBDJCI04 или Rh(-)-NORPHOS-COD BF4.
При каталитическом гидрировании бензи- локсикарбонил можно одновременно восстанавливать и переводить в карбоксильную
группу.
В случае необходимости последующий гидролиз осуществляют или в присутствии кислоты, например, соляной кислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты, трифторуксусной кислоты или трихлоруксусной кислоты, или в присутствии основания, например, гидроокиси натрия или калия, в среде пригодного растворителя, например, воды, метанола, смеси метанола и воды, этанола, смеси этанола и воды, смеси воды и изопропанола или смеси воды и диоксанэ, при температуре -10-120°С, например, при температуре между комнатной температурой и точкой кипения реакционной смеси.
д) Окисление (З)-соединения общей формулы
СНа СНЬ
ъ
сн
СН,
Н -C-NH-CO-CH
(VII),
5
5
NQ
// N/
ОС2Н5
где W означает группу, путем окисления переводимую в карбоксильную группу.
Такой поддающейся окислению группой может являться, например, формил и 0 его ацеталы, оксиметил и его простые эфи- ры, незамещенный или замещенный ацил. например, ацетил, хлорацетил, пропионил, малоновая кислота-(1)-ил или сложный малоновый эфир-(1)-ил.
Взаимодействие осуществляют агентом окисления в среде пригодного растворителя, например, воды, ледяной уксусной кислоты, метиленхлорида, диоксана или простого диметилового эфира гликоля, при температу- ре 0-100°С, предпочтительно, однако, при
температуре 20-50°С. Предпочтительно же взаимодействие осуществляют окисью серебра в натровом щелоке, двуокисью марганца в ацетоне или метиленхлориде, перекисью водорода в натровом щелоке, бромом или хлором и натровом щелоке или растворе едкого кали, или трехокисью хрома в пиридине или пиридинхлорхромате.
е) Разделение смеси, состоящей из любого количества (З)-энантиомера общей формулы
СН3/СН5 СН
СН,
/Н -C-NH-CO-CH
(VIII)
N
о
осгн5
и любого количества (Н)-энантиомера общей формулы
C-HVCH3
I
СН2
|.-н
C-NH-CO-CH,
о
ОС2Н5
где W - означает карбоксильную группу или алкоксикарбонил с 2-5 атомами углерода в общей сложности, причем алкильная часть алкоксигруппы не замещена или замещена фенилом, предпочтительно смеси с соотношением (S)- и (Я)-энантиомеров 50:50, через их диастереомерные аддукты, комплексы или соли, в случае необходимо- сти, с последующим гидролизом или гид- рогенолизом,
Разделение предпочтительно осущест- . вляют путем хроматографии на колонке или жидкостной хроматографии под давлением с помощью образования диастереомерных аддуктов или комплексов на хиральной ере- де.
В случае необходимости последующий гидролиз осуществляют или в присутствии кислоты, например, соляной кислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты, трифто- руксусной кислоты или трихлоруксусной кислоты, или в присутствии основания, на- пример, гидроокиси натрия или калия, в среде пригодного растворителя, например, воды, метанола, смеси метанола и воды, этанола, смеси этанола и воды, смеси воды и
10
15
20
5
0
5 0
5
0 5
изопропанола или смеси воды и диоксана, при температуре -10-120°С, например, при температуре между комнатной температурой и точкой кипения реакционной смеси, или последующий гидрогенолиз осуществляют в присутствии катализатора гидрирования, например, палладия на угле, в среде пригодного растворителя, например, метанола, этанола, смеси этанола и воды, ледяной уксусной кислоты, сложного этилового эфира уксусной кислоты, диоксана или ди- метилформамида, при водородном давлении 1-10 бар,
Получаемый таким образом предлагаемый (З)-энантиомер, обладающий оптической чистотой по меньшей мере 90%, путем фракционированной кристаллизации можно переводить в (З)-энантиомер, обладающий оптической чистотой по меньшей мере 95%, предпочтительно 98-100%.
То же самое относится и к предлагаемым (5)-соединениям формул (И.Г), (IV) и (VII), в частности к их сложным эфирам.
Получаемый таким образом предлагаемый (5)-энантиомер неорганическими или органическими кислотами или основаниями можно переводить в его физиологически переносимые соли. При этом в качестве кислот можно использовать, например, соляную кислоту, бромистоводородную кислоту, серную кислоту, фосфорную кислоту, молочную кислоту, лимонную кислоту, винную кислоту, янтарную кислоту, малеиновую кислоту или фумаровую кислоту, а в качестве основания - гидроокись натрия, калия или кальция, циклогексиламин, этаноламин, диэта- ноламин, триэтаноламин, этилендиамин или лизин.
Используемые в качестве исходных соединений соединения формул (I)-(IX) или известны из литературы, или их получают с помощью известных методов.
(5)-амин формулы (I) можно получать из соответствующего рацем: еского амина путем разделения рацематов, например, путем фракционированной кристаллизации диастереомерных солей пригодными оптически активными кислотами, предпочтительно Ы-ацетил- -глутаминовой кислотой, и, в случае необходимости, перекристаллизации с последующим разложением солей, или путем хроматографии на колонке или жидкостной хроматографии под давлением на хиральных фазах, в случае необходимости в виде производного ацила, или путем образования диастереомерных соединений, их разделения и последующего расщепления.
Кроме того, (5)-амин формулы (I) можно получать путем энантиоселективного восстановления водородом в присутствии пригодного хирального катализатора гидрирования, исходя из соответствующего N-ацил-кетимина или энамида, целесообразно с добавлением 0,1-5% тетраизопро пилата титана, и, в случае необходимости, последующего отщепления ацильного радикала, например, формила или ацетила, или путем диастереоеелективного восстановления соответствующего хирэльно замещенного у атома азота кетимина или гидразина, а именно водородом в присутствии пригодного катализатора гидрирования, целесообразно с добавлением 0,1-5% тетраизопропилата титана, и, в случае необходимости, последующего отщепления хирального вспомогательного радикала, например, (5)-1-фенэтила путем каталитического гидрогенолиза, или путем диастереоселективного присоединения соответствующего металлоорганиче- ского соединения, предпочтительно соединения Триньяра или лития, к соответствующему хирально замещенному у атома азота альдимину, в случае необходимости, с добавлением 0,1-10% тетраизопропилата титана, последующего гидролиза и, в случае необходимости, разделения получаемых ди- астереомеров и последующего отщепления хирального вспомогательного радикала, например, (Rj-1-фенэтила путем каталитического гидрогенолиза, и, в случае необходимости, его можно подвергать образованию соли пригодными с последующим разложением соли, в результате чего можно достичь высокой степени чистоты энантмомера.
Используемые в качестве исходных соединений соединения общих формул (111), (IV) и (VI) получают путем взаимодействия (5)-амина (I) с соответствующей карбоновой кислотой или ее реакционноспособным производным и, в случае необходимости, последующего отщепления используемого защитного радикала.
Используемое в качестве исходного соединения соединение общей формулы (VI) получают путем ацилирования соответствующего иминосоединения или его металло- органического комплекса соответствующей карбоновой кислотой или ее реакционноспособным производным, в случае необходимости, с последующим отщеплением сложного эфира.
Новый (5} энантиомер является практически нетоксичным. Например, в течение 14 дней после однократной аппликации через
рост 1000 мг на кг (в виде суспензии в 1 %- ной метил целлюлозе) у 5-крыс-самцов и 5 крыс-самок не умер ни один из животных. Благодаря фармакологическим и фармакокинетическим свойствам предлагаемый (5)-энантиомер и его физиологически переносимые соли пригодны для лечения сахарного диабета. Для этого (5)-энантио- мер и его физиологически переносимые соли, в случае необходимости, вместе с другими активными веществами, можно . вводить в принятые лекарственные формы, например, таблетки, драже, капсулы, порошки, суппозитории,суспензии или инъекционные жидкости. При этом одна доза для взрослого человека составляет 0,1-20 мг, предпочтительно 0,25-5 мг, в частности 0,25, .0,5, 1,0, 1,5, 2,0, 2,5, 3,0 или 5,0 мг, причем такую дозу апплицируют раз, дважды или
трижды в день.
Фармакологические опыты. Оба энантиомера известного рацемата, а именно ($Х+)-2-этокси-4-{М- 1-{2-пипери- дино-фенил)-3-метил-1-бутил -аминокарбо1нилметил}-бензойная кислота (в нижеследующем: Е5)и(РХ-)-2-этокси-4-{Ы- 1-(2-пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутил аминокарбонилметил}-бензойная кислота (в нижеследующем: ER) исследовали в отношении их гипогликемического действия у крыс-самок.
Неожиданно выявилось, что ES является эффективным энантиомером, и что его действие у крысы сохраняется больше чем в
течение б ч.
Исходя из этих результатов опытов у крыс для человека предлагается использовать лишь ES, благодаря чему дозу можно снижать на 50% по сравнению с дозой рацемата. Это и сравнительно большая длительность действия подтвердились в опытах на людях. Кроме того, в результате опытов на людях выявилось, что ES обладает неожиданными фармакокинетическими свойствами, которые не могли предвидеть, исходя из данных по рацемату. Таким образом, ES имеет неожиданные терапевтические преимущества по сравнению с рацематом (в нижеследующем: РАЦ).
Неожиданные результаты опытов на людях следующие:
а)Концентрация ES в крови быстрее приближается к нулю, чем концентрация РАЦ, даже при одинаковой абсолютной доэе, чего не ожидали из-за сравнительно большой длительности действия.
б)По отношению к достигаемому снижению содержания сахара в крови появляется значительно меньшая концентрация
ES в плазме крови чем ожидали бы при 50%-ном снижении дозы РАЦ.
в) После аппликации ES гипогликемиче- ское действие наблюдается быстрее чем после аппликации РАЦ.
.Решающая разница между двумя энан- тиомерами в .том, что неожиданно эффективный энантиомер, т.е., ES, несмотря на сравнительно большую длительность действия элиминируется значительно быстрее, чем неэффективный энантиомер ER, что показано на фиг. 1 и 2. Т.е., после подачи рацемата неэффективный энантиомер ER является излишним балластом не только в отношении одинаковой с ES концентрации в плазме крови, но и из-за в неожиданной степени больших максимальных и постоянных концентраций. Это при аппликации, например, одной таблетки, содержащей 2 мг РАЦ, и одной таблетки, содержащей 1 мг ES, соответственно, в опыте у 12 и 6, соответственно, людей сказывается следующим образом. Максимальные концентрации составили 84±25 и 28 ±18 нг/мл, соответственно, концентрации по истечении 4 ч составили 19±8 и 0,7 ± 1,0 нг/мл, соответственно, концентрации по истечении 5ч составили 13 ± б и 0,3 ±0,7 нг/мл, соответственно, а концентрации по истечении 6 ч составили 10 ± 6 и 0,3 ± 0,7 нг/мл, соответственно.
Неожиданно быстрое начало снижения содержания сахара в крови после аппликации ES по сравнению с РАЦ является особенно выгодным для больных диабетом потому, что оно позволяет оптимально контролировать данную болезнь.
Таким образом, неожиданное преимущество ES по сравнению с РАЦ в том, что избегают ненужно высокой и длительной нагрузки организма соответствующим веществом, что при длительном лечении, которое необходимо в случае сахарного диабета, имеет важное значение.
Опыты на людях показывают, что новый (5)-энантиомер как обладающее гипоглике- мическим действием вещество благодаря неожиданно быстрой элиминации из крови, непредвиденной ввиду сравнительно большой длительности действия, по сравнению с РАЦ обладает значительными преимуществами, далеко выходящими за рамки обычных преимуществ энантиомера перед его рацематом, в частности преимуществом возможности 50%-ного снижения дозы.
В нижеследующем изобретение поясняется с помощью примеров, причем примеры 1-10 поясняют получение исходных соединений, примеры 11-16 - получение
промежуточных соединений, а примеры 17- 22 - получение новых соединений. (5)-энан- тиомера и (Р)-энантиомера.
Пример 1. (5)-1 2-Пиперидино-фе- 5 нил)-3-метил-1-бутиламин.
К размешиваемому раствору 122 г (0,495 моль) рацемического 1-{2-пиперидино-фе- нил)-3-метил-1-бутиламина в 1000мл ацетона добавляют 93,7 г (0,495 моль) 0 Ы-ацетил-1 -глутаминовой кислоты. Нагревают на паровой ванне с обратным холодильником и порциями добавляют метанол (всего примерно 80 мл) до получения прозрачного раствора. Дают охлаждаться и ос- 5 тавляют стоять при комнатной температуре в течение ночи, затем полученные кристаллы отсасывают, дважды промывают 200 мл ацетоном температурой -15°С и сушат.
Полученный продукт 98,8 г, точка плав0 ления: 163-166°С, a D20 +0,286° (с 1 в
метаноле) перекристаллизуют из 1000 мл
ацетона при добавлении 200 мл метанола, в
результате чего получают (5)-1-(2-пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутиламин в виде ад5 дитивной соли М-ацетил-1 -глутаминовой
кислоты.
Выход: 65,1 г (60,4% теории),
точка плавления: 168 -171°С
Рассчитано,%: С 63,42; Н 8,56; N 9,65. 0Найдено, %: С 63.64; Н 8,86; N 9,60.
аЬ20 +0,357° (с 1 в метаноле)
Свободный амин получают в виде масла путем выделения, например, из раствора гидроокиси натрия или аммиака, экстра- 5 кции, например, из толуола, простого эфира, этилацетата или метиленхлорида, и сушки, фильтрации и упаривания экстракта в вакууме.
(5)-конфигурацию амина доказывают 0 следующим образом.
Взаимодействие амина с (S )-1-фенэтй- лизоцианатом в простом эфире с получением соответствующего производного мочевины точка плавления; 183-184°С, -2,25° (с 5 1 в метаноле), выращивание кристаллов из смеси этанола и воды соотношение 8:1) и последующий ренгеноструктурный анализ, который показывает (S,S конфигурацию производного мочевины и таким 0 образом (З)-конфигурацию используемого амина.
Чистоту энантиомера определяют следующим образом.
с пригодной для этого анализа колонкой фирмы Бейкер, в которой (5)-М-{3,5-динит- робензоил)-3-фенил-глицин ковалентно связан с аминопропил-силикагелем (величина зёрен: 5 мкм, шариковидный, величина пор 60 А, длина колонки:250 мм, внутренний диаметр: 4,6 мм, элюент: смесь n-гексана и изопропанола в соотношении 100:5, скорость течения: 2 мл в минуту, температура: 20°С; УФ-детекция при 254 нм.
Найдено:.
Пик 1 (R): пик 2(3) 0,75% : 99,25%
чистота энантирмера - 98,5% (S).
Эфирным раствором хлористого водорода (3)-аин можно переводить в его гидрат дигидрохлорида.
Точка плавления: 135-145°С (разложение)
Рассчитано (хНаО),% С Н 8,97; N8,31; CI 21,02.
Найдено, % С 56,85; Н 8,93; N8,38; €121,25. .
+26,1 ° (с 1 в метаноле)
Пример 2. М-Ацетия-М-{1-{2-пипер.и- дино-фенил)-3-метил-1-бутен-1-ил -амин.
К раствору 20 г (81,8 ммоль) свежеприготовленного изобутил-(2-пиперидино-фе- нил}-кетимина в 200 мл ацетонитрила при комнатной температуре добавляют 4,7 мл (81,8 ммоль) ледяной уксусной кислоты, 25,7 г (98,2 ммрль) трифенилфосфина, 34,2 мл (245 ммоль) триэтиламина и 7,9 мл (8t,8 ммоль) четы реххлористого углерода и размешивают при комнатной температуре в течение 18 ч. Затем упаривают в вакууме и распределяют между этилацетатом и водой. Органический экстракт сушат, фильтруют и упаривают в вакууме. Остаток от упаривания очищают путем хроматографии на колонке, наполненной силикагелем (элюент: смесь толуола и этилацетата в соотношении 10:1), причем элюируется сперва (Е)-форма, а затем (г)-форма.
(Е)-форма:
Выход: 6,1 г (26% теории),
точка плавления: 135-137°С (из смеси эти л ацетата и петролейного эфира)
Рассчитано,%: С 75,48; Н9,15; N9.78. Найдено.%: С 75.47; Н 9,35; N9,70.
(г)-форма:
Выход; 3,1 г (13% теории),
точка плавления: 140-143 С (из этилацетата)
Рассчитано, %: С 75,48; Н 9,15; N9.78. Найдено,%: С 75,56; Н 9,30; N 9,79.
Пример 3. М-Ацетил-Ы-{1-(2-пипери- дино енил -метил-1-бутен-1-ил}-амин.
К размешиваемому раствору 44 г (0,18 моль) свежеприготовленного иэобутил-(2пиперидино-фенил)-кетиминэ в 440 мл толуола при внутренней температуре 0°С каплям добавляют 17 мл (0.18 ммоль) ацетангидрида. Продолжают перемешивать при температуре 0°С в течение 3 ч, затем при комнатной температуре в течение 15 ч, затем упаривают в вакууме, остаток от упаривания растворяют в этилэцетате и повторно встряхивают водным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу сушат, фильтруют и упаривают в вакууме. Остаток от упаривания очищают путем хроматографии на колонке, наполненной силикагелем (элюент: смесь толуола и этилацетата в соотношении 5:1). причем элюируется сперва (Е)-форма, а затем (2)-форма.
(Е)-форма:
Выход: 3,0 г (5,8% теории),
(г)-форма:
Выход: 17,8 г (34,5% теории),
точка плавления: 139-141°С(из этилацетата)
Рассчитано,%: С 75,48; Н 9J5; N9,78. Найдено,%: С 75,68; Н 8,99; N 9,86.
Пример 4. М-ацетил-1 -(3)-1-(2-пипе- ридино-фенил)-3-метил-1-бутил-1 -амин.
0,57 г (1,99 ммоль) (2)- ацетил-Ы- 1-(2- пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутен-1-ил - амина, имеющего точку плавления 139- 141°С. растворяют в 10 мл дегазированной смеси растворителей (метанола и метиленх- лорида в соотношении 5:1) в среде аргона, затем его добавляют к раствору 16,8 г (1мояь.%) катализатора Ноери (полученного из RU(COD) с (З -бис ифенилфос- фино)-1,1-бинафтилом, триэтиламином и ацетатом натрия) и 3,4 мг (0,5 моль. %) тетра- изопропилата титана в 10 мл дегазированной смеси растворителей (метанола и метиленхлорида в соотношении 5:1). Реакционную смесь подают в вакуумированный при мбар автоклав. Повторно промывают водородом при давлении 4 бар, и при температуре 30°С и давлении 100 бар гидрируют до прекращения поглощения водорода (170 ч). Затем коричнево-красный раствор упаривают в вакууме, остаток от упаривания кипятят с обратным холодильником с 30 мл л-гексана и в горячем состоянии нерастворимые компоненты удаляют путем фильтрации. При охлаждении фильтрата происходит кристаллизация.
Выход: 0,31 г (54% теории), . Точка плавления: 127-131 °С.
Чистота энантиомера 82% (3) (условия жидкостной хроматографии под давлением см. пример 1);
Из полученного при кипячении с 30 мл n-гексана нерастворенного компонента путем дальнейшего кипячения с п-гексаном,
фильтрации и выкристаллизовывания из гексанового раствора получают 14% рацемического N-ацетил-амина, имеющего точку плавления 154-156°С.
Пример 5. (3}-1-(2-пиперидино-фе- нил)-3-метил-1-бутиламин.
1 г (3,47 ммоль) 1М-ацетил-М-{(5)-1-{2-пи- перидино-фенил)-3-метил-1-бутил -амина, имеющего точку плавления 128-133°С, и чистоту 99,4%, в 10 мл концентрированной соляной кислоты в течение 5,5 ч нагревают с обратным холодильником, охлаждают и выливают в смесь концентрированного аммиака и льда. Дважды экстрагируют этила- цетатом, органическую фазу промывают водой, сушат, фильтруют и упаривают в вакууме,
Выход: 0,84 г (98.8% теории) масляного амина.
В результате реацетилирования с 0,42 мл (1,3 эквивалентными), ацетангидрида в 8,4 мл ледяной уксусной кислоты при комнатной температуре в течение ночи, упаривания в вакууме, распределения остатка от упаривания между этилацетатом и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, сушки, фильтрации и упаривания органического экстракта в вакууме получа- ютО,83г(84,7% теории)М-ацетил-М-(5)-1-{2- пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутен-1-ами на,
Точка плавления: 130-132°С, чистота энантиомера 99,4%.
Пример 6. Сложный этиловый эфир 2-этокси-4-{М-{1-(2-пиперидино-фенил)-3 М етил-1-бутен-1-ил}- эминокарбрнмлметил}- бензойной кислоты.
Получают аналогично примеру 2 из изо- бутил-(2-пиперидино-фенил)-кетимина и 3- этокси-4-этоксикарбонилтфенилуксусной кислоты. Очищают путем хроматографии на колонке, наполненной силикагелем (элю- ент: смеси толуола и ацетона в соотношении .10:1), причем элюируется сперва (Е)-форма, а затем (2)-форма.
(Е}-форма: .
Выход: 4% теории,
точка плавления: 101-103°С.
Рассчитано.%: С 72,77: Н 8,00; N 5,85.
Найдено,%: С 72,74; Н 7.78; N5,86.
(2}-форма:
Выход: 28,1% теории,
точка плавления: 124-127°С (из смеси петролейного эфира и толуола в соотношении 5:1).
Рассчитэно,%: С 72,77; Н 8,80; N 5,85. Найдено, %: С 72,90; Н 7.86; N5,83.
Пример. И(5 1-фенэтилН {(5)-1- (2-пиперидино-фенил)-3-метил-1 -бутил }-ам ин.
17 г (49 ммоль) N-{(5 )-1-фенэтил -иэобу- тил-(2-пиперидино-фенил)-кетимина, имеющего точку плавления 150-155°С при 0,3 торр и полученного из изобутил-(2-пипери5 дино-фенил)-кетона и (S )-1-фенэтил-амина (чистота 99,6%) в толуоле и триэтиламине путем добавления каплями раствора тетрах- лорида титана в толуоле, растворяют в 170 мл безводного этанола. Добавляют 1,7 г тет0 раизопропилата титана и 8 г никеля Ренея и гидрируют при температуре 50°С при водородном давлении 200 бар. По истечении 20 ч добавляют еще раз 8 г никеля Ренея и гидрирут в тех же условиях в течение еще 52
5 ч. Катализатор удаляют фильтрацией через слой целита с использованием фритты марки G3, и фильтрат упаривают в вакууме.
Выход: 13,1 г(76,6% теории), точка плав- 0 ления: 152°С при 0,2 Торр
Рассчитано,%: С 82,23; Н 9,78: N7,99. Найдено,%: С 82,00; Н 10,03; N7,74.
а о -55,3° (с 1,1 в метаноле)
Чистоту диастереомера определяют пу- 5 тем жидкостной хроматографии под давлением с использованием колонки марки Лихрозорб RP18 фирмы Э. Мерк; DE; длина колонки: 250 мм, внутренний диаметр: 4 мм, величина частиц: 7 мкм, элюент: смесь мета- 0 нола, диоксана и 0,1 %-ного водного раствора ацетата натрия в соотношении 135:60:5, ледяной уксусной кислотой доведенная до значения рН. равного 4.05. температура: 23°С, УФ-детекция при 254 нм. 5
Найдено:.Пик 1 (5,5):пик2(Р,5) 98,4%: :1,4%,
чистота диастереомера - 97,0% (S.S )Примере. (ЗН пиперидино-фе- 0 нил}-3-метил-1-бутиламин.
12,5 г (36 ммоль) N-{(5 1-фенэтил - (5)1-(2-пиперидино-фенил(-3-метил-1-бут ил амина чистотой 97,0% (S.S ) растворяют в 125мл воды и 3,6 мл концентрированной 5 соляной кислоты. Добавляют 1,3 г 10%-ного палладия на угле и гидрируют при температуре 50°С и водородном давлении 5 бар. По окончании поглощения водорода (10 ч) катализатор удаляют путем фильтрации че- 0 рез слой целита. Фильтрат подщелачивают концентрированным аммиаком при добавлении льда и экстрагируют этилацетатом. Органический экстракт сушат, фильтруют и упаривают в вакууме.
5
Выход: 6,4 г (72,1% теории),точка плавления: 115-117°С при 0,44 торр, чистота энантиомера 93,5% (5). (путем жидкостной хроматографии под давлением (после пред- ыдущегр ацетилирования). см. пример 1).
Пример 9. М-С(Р 1-фенэтил -М(5)-1- (2-пиперидино-фенил)- З-метил-1-бутил - амин.
К размешиваемому в ванне при температуре 60ПС раствору 27,4 ммоль .эквивалента) бромида изобутилмагния в 22 мл безводного тетрагидрофуранэ каплями добавляют раствор 2 г(6,84 ммоль) М-(К 1-фе- нэтил -(2-пиперидино-бензальдимина), полученного из эквимолярных количеств 2- пиперидино-бензальдегида и (R )-1-фенэти- ламина тем, что оставляют стоять при комнатной температуре в течение ночи и затем сушат над сульфатом натрия в растворе, простого эфира, в 20 мл безводного тет- рагидрофурана. По истечении 18 ч температуру ванны повышают до 80°С, и добавляют еще 2 эквивалента бромида изобутилмагния в 11 мл тетрагидрофурана. Затем по истечении еще 12 ч при 80°С еще раз добавляют 2 эквивалента раствора бромида изобутилмагния. По истечении примерно 90 ч при температуре 80°С охлаждают, разбавляют избытком концентрированной соляной кислоты и упаривают досуха в вакууме, создаваемом при помощи водоструйного насоса. Остаток от упаривания растворяют в воде и подщелачивают концентрированным аммиаком. Экстрагируют простым эфиром, органический экстракт сушат над сульфатом натрия, фильтруют и упаривают в вакууме. Остаток от упаривания очищают путем хроматографии на колонке, наполненной силикагелем (элюент: смесь толуола и ацетона в соотношении 95:5). Выход : 0,20 г (8,3% теории), точка пдавления: 20°С. Чистоту диастереомера определяют описанным в примере 7 образом с помощью жидкостной хроматографии под давлением Найдено: пик 1 (R,R(): пик 2 (S.R ) 4,4% : 95,6%
чистота диэстереомера: 91,2% (S.R1). При аналогичном исходном растворе с 2,0 г Шиффово основания и 6 эквивалентов бромида изобутилмагния в смеси толуола и тетрагидрофурана (соотношение: 4:1) и с добавлением 5% тетраизопропилата титана (IV) в результате нагревания при температуре 100°С в течение 60 ч достигают выхода 5% при чистоте диастереомера, равной 97,6% (S.R).
Пример 10. (3)-1-(2-пиперидино-фе- нил)-3-метил-1-бутиламин.
Раствор 0,15 г (0,428 ммоль) N-(R )-1-фенэтил -М-(5)-1-{2-пиперидино-фенил)-3-ме тил-1-бутил }-амина (чистота диастереомера 91,2%), 0,47 мл (0,47 ммоль) IN-соляной кислоты и 1,5 мл воды гидрируют в присутствии 20 мг 10%-ного палладия на угле при температуре 50°С и водородном давлении 3,4 бар в течение 5 ч. Фильтруют через кизельгур, подщелачивают концентрированным аммиаком и экстрагируют этилацетатом. Экстракт сушат, фильтруют и упаривают в вакууме.,
Выход: 0,066 г (62,8% теории), точка плавления: 20°С, чистота энантиомера
0 87,6% (S) (условия жидкостной хроматографии под давлением (после предыдущего ацетилирования) см. пример 1).
Пример 11. Сложный этиловый эфир (5}-2-этокси-4-{М-(1-(2-пиперидино-фенил)5 З-метил-1-бутил)- аминокарбонилметил - бензойной кислоты.
К раствору 0.47 г (1,91 ммоль) (5)-3-ме- дил-1-(2-пипёридино-фенил)-3-метил-1-бут иламина (чистота энантиомера 98,5%) в 5
0 мл безводного ацетонитрила последовательно добавляют 0.48 г (1,91 ммоль) 3-эток- си 4-этокси карбон ил-фен ил уксусной кислоты, 0,60 г (2,29 ммоль) трифенилфосфи- на, 0.80 мл (5,73 ммоль) триэтияамина и 0,18
5 мл (1,91 моль) четыреххлористого водорода. Размешивают при комнатной температуре в течение 20 ч. Затем упаривают в вакууме и распределяют между этилацетатом и водой, Органический экстрактсушат, фильтру0 ют и упаривают в вакууме. Остаток от упаривания очищают путем хроматографии на колонке, наполненной силикагелем (элюент: смесь толуола и этилацетата в соотношении 10:1).
5 Выход: 0,71 г{77,3% теории), точка плавления: 110-112°С.
Рассчитано.%: С 72,47; Н 8,39; N 5,83. Найдено,%: С 72,29; Н 8,42; N5,80. Чистоту энантиомера определяют пу0 тем жидкостной хроматографии под давлением с пригодной для этого анализа колонкой фирмы Бейкер, в которой (SHM- 3,5-динитробензоил-лейцин ковалентно связан с аминопропил-силикагелем; вели5 чина зерен: 5 мкм, шариковидный, величина пор 60 А, длина колонки: 250 мм, внутренний диаметр: 4,6 мм, злюент: смесь п-гекса- на, тетрагидрофурана, метиленхлоридя и этанола в соотношении 90:10:1:1, скорость
0 течения: 2 мл в минуту, температура: 20°С,
УФ-детекция при 242 нм.
Найдено: Пик 1 (R): пик 2(5) 0,75% : 99,25%
чистота энантиомера 98,5% (S).
Пример 12. Сложный этиловый эфир
5 (5)-2-этокси-4- Ы-(1-(2-пиперидино-фенил)- З-метил-1 -бутил)- аминокарбонилметил - бензойной кислоты.
К раствору 2,71 г (11 ммоль) безводного (3)-3-метил-Н2-пиперидино-фенил)-3-мет ил-1-бутиламина (чистота энантиомера
98,5%) в 30 мл абсолютного толуола при комнатной температуре добавляют 2,77 V (11 ммоль) З-этокси-4-этоксикарбонил-фе- нилуксусной кислоты и размешивают до получения раствора. Затем добавляют 2,38 г (11,55 ммоль) N.N -дициклогексил-карбо- диимида и размешивают при комнатной температуре. По истечении 24 ч добавляют еще 0,54 г (2,14 ммоль) З-этокси-4-этокси- карбонил-фенилуксусной кислоты и 0,48 г (2,33.ммоль) М,М -дициклогексил-карбодии- мида и размешивают в течение ночи. Затем охлаждают до внутренней температуры +5°С, осадмвшееся вещество фильтруют на нутче и промывают 5 мл толуолом; Объединенные фильтраты от толуола сгущают в вакууме до обьема примерно 10 мл. Полученный таким обрчзом раствор нагревают на паровой ванне, и к нему порциями добавляют петролейный эфир (всего 55 мл) до остающейся мутности. Охлаждают льдом, причем происходит кристаллизация. Фильтруют на нутче и сушат при температуре 75°С и 4 торр. Полученный продукт (4,57 г, точка плавления 111-112°С, чистота энантиомера 98,9%) суспендируют в 50 мл петро- лейного эфира. Нагревают на паровой ванне и порциями добавляют толуол (всего 8 мл) до получения раствора. Затем охлаждают льдом, кристаллизат фильтруют и сушат при температуре 75°С и 4 торр.
Выход : 3,93 г (74,3% теории),
точка плавления: 117-118°С.
Рассчитано, %: С 72,47; Н 8,39; N 5,83.
Найдено,%: С 72,44; Н 8,43; N 5,93.
- +9,4° (с 1,01 в метаноле)
Чистота энантиомера 99,9% (условия жидкостной хроматографии под давлением см. пример 11).
Пример 13. Сложный этиловый эфир (5)-2-этокси-4-{М-1-(2-пиперидино-фенил}-3 -метил-1-бутил)- аминокарбонилметил -бен- зойной кислоты.
0,79 г (1,65 ммоль) сложного этилового эфира (2)-2-этокси-4- М-(1-(2-пиперидино- фенил)-3-метил-1-бутен-1 -ил)- аминокэрбо- нилметил -бензойной кислоты, имеющего точку плавления 124-127°С, в атмосфере аргона растворяют в 10 мл дегазированной омеси растворителей (метанола и метиленх- лорида в соотношении 5:1) и добавляют к раствору 17 мг катализатора Ноери (полученного из Ru(COD) с ($)-2.2 -бис-Сдифенил- фосфино)-1,1 -бинафтилом, триэтиламином и ацетатом натрия) и 3 мг тетраизопропилата титана в 10 мл дегазированной смеси растворителей (метанола и метиленхлорида в соотношении 5:1). Реакционную смесь подают в автоклав, вакуумированный при 10
мбзр. Пять раз промывают водородом под давлением 5 бар, затем гидрируют при температуре 30°С и давлении 100 бар до прекращения поглощения водорода (154 ч). 5 Коричнево-красный раствор упаривают в вакууме, остаток от упаривания растворяют в 80 мл простого эфира, нерастворенные хлопья фильтруют через активный уголь, и полученный таким образом прозрачный 0 светло-желтый фильтрат упаривают в вакууме. Остаток от упаривания (0,60 г) кипятят с обратным холодильником в 60 мл п-гексана, и в горячем состоянии путем фильтрации удаляют нерастворенный компонент. Филь- 5 трат оставляют стоять при комнатной температуре в течение ночи. Отфильтруют образовавшиеся кристаллы.
Выход: ОЛ5 г(56,7% теории), точка плавления: 13ЫЗЗ°С (после спекания, начиная 0 с 120°С).
Чистота энантиомера 39,9% (S) (условия жидкостной хроматографии под давлением см. пример 11).
При м е р 14. Сложный этиловый эфир 5 (3)-2-этокси-4- Ы-1-(2-пиперидино-фенил)-3 -метил-1-бутил)- аминокарбонилметил -бен- зойной. кислоты.
К раствору 0,68 г (1,15 ммоль) сложного этилового эфира (5)-2-окси-4- М-(1-(2-пипе- 0 ,ридино-фенил)-3-метил-1-бутил}- зминокар- бонилметил -бензойной кислоты точка плавления: 125-126°С, +12,87° (с 1,01 в метаноле) в 5 мл безводного диметил- формамида добавляют 0,05 г (1.15 ммоль) 5 55%-ного гидрида натрия в масле и перемешивают при комнатной температуре в течение полчаса. Затем каплями добавляют раствор 0,12 мл (1,15 ммоль) этилйодида в 2,5 мл безводного диметилформамида и 0 размешивают при комнатной температуре в течение 5ч. Упаривают в вакууме, распределяют между разбавленным натровым щелоком и хлороформом, органический экстракт сушат, фильтруют и упаривают в вакууме. 5 Остаток от упаривания очищают путем хроматографии на колонке, наполненной сили- кагелем (элюент: смесь толуола и этилацетата в соотношении 10:1).
Выход: 0,48 г (67% теории), точка плав- 0 ления: 110-112°С.
Рассчитано ,%: С 72I47; Н 8,39; N 5,83.
Найдено,%: С 72,61; Н 8.54; N 5.97.
Чистота энантиомера 98,5% (S) (условия жидкостной хроматографии под давле- 5 нием см. пример 11).
Пример 15. Сложный этиловый эфир (5)-2-этокси-4- М-(1-{2-пиперидино-фенил}- З-метил-1-бутил)- амияокарбонилметил - бензойной кислоты.
Получают аналогично примеру 14(из(5)- 2-окси-4- М-(1-{2-пиперидино-фенил)-3-мет и л-1-бутил)- аминокарбонил метил -бензой- ной кислоты, используя 2 эквивалента гидрида натрия и 2 эквивалента этилйодида.
Выход: 42% теории, точка плавления: 1fl)-112°C.
Рассчитано,%: С 72,47; Н 8,39; N 5.83.
Найдено.%: С 72,61; Н 8,54: N 5,99.
Чистота энантиомера 98,3% (S) (условия жидкостной хроматографии под давлением см. пример 11).
Пример 16. Сложный этиловый эфир (5Х+)-2-этокси-4-{М-(1-{2-пиперидино-фенил )-3-метил-1-бутил)- аминокарбонилметил}- бензойной кислоты.
Сложный этиловый эфир (НХ-)-2-этокси- (1-{2-пиперидино-фенил}-3-метил-1-бу тил)- эминокарбонилметил}-бензойной кислоты.
920 мл сложного этилового эфира (± )-2- этокси-4-{М-(1-(2-пиперидино-фенил)-3-мет ил-1-бутил)- аминокарбонилметил -бензой- ной кислоты разделяют на отдельные дозы размером 10 мг на пригодной для этого колонке фирмы Бейкер, в которой (S)-N-3,5-flH- нитробензоил-лейцин ковалентно связан с аминопропил-силикагелем (величина зерен: 40 мкм, длина колонки: 250 мл, внутренний диаметр: 20 мм, элюент: смесь п-гексана, тетрагидрофурана, этанола и метиленхло- рида в соотношении 180:20:3:2, скорость течения: 21,25 мл в минуту, температура: 27°С, УФ-детекция при 285 нм), причем элюирует- ся сперва (ВХ-)-энантиомер (пик 1), а затем (5)(+)-энантиомер (пик 2).
Из разрезанных и собранных соответствующим образом фракций в результате упаривания в вакууме получают
фракция пик 1 (R): 423 мг (сырой),
фракция пик 2 (S): 325 мг (сырой);
Для удаления нежелаемых компонентов (например, содержащегося в тетрагидрофу- ране стабилизатора 2,6-ди-трет.бутил-4-ме- тил-фенола) обе фракции очищают путем хроматографии на колонке, наполненной силикагелем (элюент: смесь толуола и ацетона в соотношении 10:1).
(РХ-)-энантиомер:
Выход: 234.5 мг (51% теории), точка плавления: 122-124°С (из смеси петролей- ного эфира и ацетона).
Рассчитано, %: С 72,47; Н 8,39; N 5.83. Найдено.%: С 72,40; Н 8,18; N5.71. -8.3° (с 1 в метаноле). (5)-энантиомер:
Выход: 131,2 мг (28,5% теории), точка плавления: 122-124°С (из смеси петролей- ного эфира и ацетона в соотношении 8:1). Рассчитано,%: С 72,47; Н 8.39; N 5,83.
Найлено.%:.072,28; Н 8,44; N 5,70. +8.3°С 1 в метаноле). Для разделения энантиомеров также можно использовать колонку марки Хиралцель OD фирмы Дэсель. На колонке длиной 250 мм и внутренним диаметром 4,6 мм (элюент: смесь абсолютного этанола и п-гексана с 0,2% диэтиламина в соотношении 5:95, температура 40°С, УФ-детекция при
245 нм) (В)-энантиомер элюируется по истечении 6,8 мин, а (5}-энантиомер - по истечении 8,5 мин.
Пример 17. (5)-2-этокси-4-{М-(Н2-пи- перидино-фенил)-3-мётил-1-бутил)- аминокарбонилметил -бензойная кислота.
Раствор 3,79 г (7,88 ммоль) сложного этилового эфира (5)-2-этокси-4 М-(1-(2-пи- перидино-фенил)-3-метил-1-бутил)- аминокарбонил мети л -бензой ной кислоты
(чистота энантиомера 99,9%) в 37 мл этанола размешивают в ванне температурой 60°С и добавляют 10 мл (10 ммоль) IN-натро- вого щелока. После размешивания при температуре 60°С в течение 4ч при сохранении
температуры добавляют 10 мл (10 ммоль) 1М-соляной кислоты и охлаждают до комнатной температуры. После прививки оставляют стоять в течение ночи, затем охлаждают льдом при размешивании в течение часа. Кристаллизат фильтруют на нутче и дважды промывают водой, каждый раз используя 5 мл. Затем сушат над полупяти- окисью фосфора при температуре 75°С, в конце 100РС и 4 торр в вакуумном сушильном шкафу.
Выход: 3,13 г (87,8% теорий), точка плавления: 130-131°С (высокоплавкая форма).
Рассчитано,%: С 71,64; Н 8.02; N 6,19. Найдено.%: С 71,48; Н 7.87; N 6,39.
t +7,45° (с 1,06 в метаноле).
Чистоту энантиомера определяют путем жидкостной хроматографии под давлением с пригодной для этого анализа колонкой фирмы Хромтех (Швеция) с использованием фазы AGP(a 1-кислый гликоп- ротеин); внутренний диаметр: 4,0мм, длина: 100 мл, диаметр частиц: 5 мкм, температура: 20°С, элюент: 0.1%-ный водный раствор КНзР04 (А) и 20%-ный ацетонитрил (-Б), повышение градиента на 40% в течение 4 мин (Б); скорость течения: 1 мл в минуту, УФ-дете кция при 240 нм Время удерживания (3)-энантиомер: 2,7 мин, время удержи- вания (RJ-энантиомер; 4,1 мин.
Найдено,%: (S):(R) - 99.85% : 0:15%
чистота анантиомера 99,7% (S).
При повторной кристаллизации пробы из смеси этанола и воды (соотношение 2:1) точка плавления не изменяется.
В результате наг ревания пробы в смеси петролейного эфирз и толуола (соотношение 5:3), фильтрации нерастворенного компонента (точка плавления: 130-131°С) и быстрого охлаждения фильтрата получают низкоплавкую форму целевого продукта, имеющую точку плавления 99-101°С.
Рассчитано,%: С 71.64: Н 8,02; N 6,19.
Найдено,%: С 71.66: Н 7,97; N 6,44.
Низкоплавкая и высокоплавкая формы отличаются друг от друга относительно ИК- спектра с использованием бромистого калия, однако, они не отличаются друг от друга относительно ИК-спектра с использованием раствора (метиленхлорида).
При нагревании пробы низкоплавкой формы выше точки плавления наблюдают вторую точку плавления при 127-130°С.
В результате перекристаллизации пробы низкоплавкой формы из смеси этанола и воды (соотношение 2:1) получают высокоплавкую форму.
Высокоплавкую и низкоплавкую формы исследовали путем дифференциальной сканирующей калориметрии, используя аппарат марки TA-300-System фирмы Меттлер, Швейцария. Результаты исследования даны в таблице.
Пример 18. (ЯХ-)-этокси-4- М-(1-(2-пи- перидино-фенил)-3-метил-1 -бутил)- амино- карбонилметил -бенэойная кислота х 0,4
н2о;
Получают аналогично примеру 17 из 150 мг (0,312 ммоль) сложного этилового эфира (Р)(-)-2-зтокси-4- Ы-(1-(2-пиперидино-фенил) -З-метил-1-бутил)- эминокарбонилметил - бензойной кислоты точка плавления 122- 124°С, «Ь20 -8,3° (с 1 в метаноле) путем омыления IN-натровым щелоком в этаноле,
Выход: 95,8 мг (66,7% теории), точка плавления: 103-105°С (из смеси толуола и петролейного эфира)
Рассчитано, (х 0,4 Н20),%: С 70,51: Н 8,01; N6,09. Найдено.:С 70.88; Н 7,79; N 5,81.
Моль-пик М+: рассчитано: 452
найдено: 452
а о -6,5° (с - 1 в метаноле) чистота этантиомера 99,7% (R) (условия жидкостной хроматографии под давлением см. пр.17).
Пример 19. (5Х+)-2-этокси-4-{М-{И2- пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутил)- ами- нокарбонилметил -бензойная кислота х 0.4 НгО.
Получают аналогично примеру 17 из 89 мг (0,198 ммоль) сложного этилового эфира ЗХ+У-З-этокси М-О- -пиперидино-фенил) -З-метил-1-бутил)- аминокарбонияметил}- бензойной кислоты точка плавления 122124 С. -- +8.3° (с - 1 в МПТРНОЛО) путем омыления IN-нагровым щелоком в этаноле.
Выход: 44.5 мг (48.8% теории), точка плавления: 102-103°С (из смеси толуола и 5 петролейного эфира)
Рассчитано (х 0,4 Н20).%: С 70.51; Н 8,01.
Найдено,%: С 70,80: Н 8,06.
Пример 20. (5)-2-этокси-4- М-(1-(2-пи- перидино-фенил)-3-метил-1-бутил)- амино- 5 карбонилметил -бензойная кислота.
Гидрируют 0,26 г (0,47 ммоль) сложного бензилового эфира (5)-2-этокси-4- М-(1-(2- пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутил)- ами- нокарбонилметил -бензойной кислоты 0 точка плавления 9Г-92°С, гф20 +9,5° (с 1,05 в метаноле) в 10 мл этанола в присутствии 0,12 г 10%-ного палладия на угле при температуре 50°С и водородном давлении 5 бар. По истечении 5 ч катализатор удаляют 5 фильтрацией с использованием кизельгура и упаривают в вакууме. Остаток от упаривания кристаллизуют из смеси этанола и воды (соотношение 2:1).
Выход: 0,15 г (70% теории), точка плав- 0 ления: 130-13ГС.
Рассчитано,%: С 71,64; Н 8,02; N 6,19.
Найдено,%: С 71,76; Н 8.12; N 6,05.
Чистота энантиомера 99,6% (условия жидкостной хроматографии под давлением 5 см. пр. 17).
П р и м е р 21. (5)-2-этокси-4- М-(1-(2-пи- перидино-фенил)-3-метил-1-бутил)- амино- карбонилметил -бензойная кислота.
102 мг (0.20 ммоль) сложного трет.бути0 левого эфира (5)-2-этокси-4- М-(1-(2-пиперидино-фенил)-3-метил-1-бутил)аминокарбонилметил -бензойной кислоты
точка плавления 122-123рС, +8,7° (с
1 в метаноле) в 5 мл бензола нагревают с
5 обратным холодильником в течение полдня
на некоторых кристаллов гидрата п-толуолсульфокислоты. В результате этого получают
целевое соединение, что подтверждается
значением Rf полученным в результате тонко0 слойной хроматографии, и масс-спектром.
Точка плавления: 129-131°С.
Моль-пик М :
Рассчитано,%: 452. . Найдено,%: 452.
5П р и м е р 22. (5)-2-этокси-4-{М-{1-(2-пиперидино-фенил)-3-метил-1-6утил)- амино- карбонилметил -бензойнэя кислота.
200 мг (0,395 ммоль) сложного трет.бу- тилового эфира (5)-2-этокси-4-{г -(1-(2-пипе- ридино-фе ни л)-3-метил-1-бутил)аминокарбонилметил -бензойной кислоты точка плавления 122-123°С, +8,7°(с 1 в метаноле) в 2 мл метиленхлорида вместе с 0,45 г (3,95 ммоль) трифторуксусной кислоты размешивают при комнатной температуре в течение ночи. Упаривают в вакууме, и остаток от упаривания распределяют между водным раствором бикарбоната натрия и этилацетатом. Органический экстракт сушат, фильтруют и упаривают в вакууме. Остаток от упаривания кристаллизуют из смеси этанола и воды (соотношение 2:1).
Выход: 115 мг-(64,7% теории), точка плавления: 126-128°С.
Рассчитано,%: С 71,64; Н 8,02; N 6,19.
Найдено, %: С 71,39; Н 7.91; N 6.06.
+6,97° (с 0,975 в метаноле) чистота энантиомера 99.8% (условия жидE.coli 36 1,56
P.aeruginosa 26 0,39
Р.aeroginosa 175 .3,13
Б.aero- gens 84 100
3,130,780,780,390,390,20,10,10,1
0,780,0250,10,050,20,0250,0250,050,025
3,130,10,780,390,780,390,390,20,05
503,130,781,560,780,391,560,391,56
E.coli 36 0,1 0,05 0,1 0,1 0,39 0,2 0,1 0,2 0,1
P.aerugi- nosa 26
P.aerogi- nosa 175
E.aero- gens 84
0,1 0,1 0,1 0,05 0,05 0,025 0,025 0,025 0,1
0,39 0,78 0,39 0,78
1,56 0,39 0,78 6,25
0,2 0,39 0,1 0,39 0,2
it
1,56 1,56 0,78 0,78 1,56
костной хроматографии под давлением см. пр. 17).
Форму л а изобретен и я (5Х+)2-этокси-4-{М- 1-(2-пиперидино-ф енил)-3-метил-1-бутил аминокарбонилме- тил}-бензрйная кислота формулы
сНз/снз сн
I
снг ,сн-ын-со-сн2-/3-соон
15
;нП
ОСгН5
или ее гидрат, или фармацевтически пере- .носимая соль, обладающая гипогликемиче- ским действием.
Продолжение таблицы
0,2 0,39 0,1 0,39 0,2
it
1,56 1,56 0,78 0,78 1,56
/иг/мл}
но
. 1 Концентрации ES и ER в плааме крови «осле внутривенно аннлнкацни 1,0 мг РАЦ у мужчин (число «робаидов 12)
.1831481
А
tn
::;
-I
:г
(- - ф
6 ft/
в tt
