Способ получения замещенного имидазола или его нетоксичной фармацевтически приемлемой кислотно-аддитивной соли Советский патент 1993 года по МПК C07D233/58 A61K31/415 

и соответствующего альдегида формулы (III)

С)

нс4сн2)ц

в соответствующем растворителе, таком как тетрагидрофуран или диметоксизтан, в присутствии низковольтного титанового реактива в инертной атмосфере, например, в азоте или в.аргоне, в результате чего получают соединения формулы (I), в которой R4 и R5 образуют общую связь (IY)

0

5

ен-СН2(СН{

5

I

-Н ,:; - . , .

Пример

1-Бензил-5(1-)4-фторфенил)-3-фенил-1 -пропенил)-1 Н-имидазол.

Четыреххлористый титан (0,03 ммоля) по каплям добавляли к перемешанной суспензии порошкообразного цинка (0,06 ммоля) в тетрагидрофуране (30 мл) при температуре -10°С в атмосфере сухого азота. Эту смесь нагревали до кипения с обратным холодильником и продолжали нагревать с обратным холодильником в течение 1 часа. Этот раствор охлаждали до 0°С, после чего в зт смесь добавляли Ьбензил-Б-О-И Фтор фенил)-1-оксометил)-1 Н-имидазол (0,005

моля) в тетрагидрофуране (10 мл) и фенила- цетальдегид (0,006 моля) в тетрэгидрофу- ране. Эту смесь нагревали с обратным холодильником при перемешивании в течение 1 часа. Темную смесь выливали в воду (60 (60 мл), тетрагидрофуран выпаривали, а смесь экстрагировали метиленхлоридом (2x100 мл), раствор метиленхлорида промывали 1н. раствором гидрокиси натрия и водой, высушивали с помощью сульфата натрия и выпаривали до сухого состояния. Остаток очищали при помощи испарительной хроматографии.

Спектр Н ЯМР (в виде основания,

CDCI3):

3,35 и 3,45 (2d, 28), 4,62 и 4,65 (23, 2Н), 6,03 и 6,20 (2t. 1H), 6,8-7,3 (m. 16H), 7,50 и 7,64(25, 1 Н)/

П р и м е р 2.

,3-бис(4-нитрофенил)пропил -1 Н-имидазол.

1,8 г (14,8 ммоля) нитрата мочевины добавляли небольшими порциями к смеси 2,7 г (7,3 моля) 4-(1,3-дифенилпропил)-1Н- имидазола в 6,4 мл концентрированной серной кислоты при температуре 10°С, Реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре. Эту смесь подщелачивали 2М раствором гидроокиси натрия и целевой продукт очищали при помощи испарительной хроматографии, используя смесь метиленхлорида и метанола (95:5) в качестве элюента.

ПримерЗ.

4-(1-(4-фторфенил)-5-фенилпентил)-1Н- имидазол.

Хлоргидрат 4-(1 -(4-фторфенил)-5-фенил- 1-пентенил)-1Н-имидазола (2,0 г) растворяли в этаноле и добавляли каталитическое количество 10Pd/C. реакционную смесь интенсивно перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода до тех пор, пока не прекращалось поглощение водорода. Эту смесь фильтровали, а фильтрат выпаривали до сухого состояния. Остаток, представлявший деловой продукт, очищали при помощи испарительной хроматографии, производят элюирование смесью метиленхлорида и метанола. Выход составил 82%.

Спектр Н ЯМР (в виде основания,

CDCI3):

1,1-2,7 (m. 8H), 3,84 (t, 1H), 8,71 (широкий S, 1Н) 7,80-7,38 (т, 9Н), 7,47 (широкий S, Ж). 9,22 (широкий S, 1H).

При использовании аналогичного метода были получены следующие соединения, входящие в объем настоящего изобретения:

4- 1-{4-фторфенил)-5-(3-метилфенил)пен- Н-имидазол.

Масс-спектр: 322(20, М4), 189(28). 176(38). 175(72), 149(100). 125(20), 121(14), 109(42), 105(16). 97(21).

Спектр Н ЯМР (в виде хлористоводо- родной соли, MeOH-d4): 1,1-2,7 (m. 8H). 2,27 (S, ЗН), 4,06, (t, 1H), 6,7-7.5 (гл,8Н), 7,37 (d.1H). 8,77 (d, 1H).

4-{1-{4-фторфенил}-5-(4-метилфенил/пен- Н-имидазол.

0 Спектр 1Н ЯМР (в виде хлористоводородной соли, MeOH-d4);

1,1-2,7 (m, 8Н), 2,26 (S, ЗН), 4,05 (t, 1H), 6,8-7,6 (m, 9Н), 8,78 (d, 1H).

4-(1-(4-фторфенил)-5-{2-метилфенил(пен- 5 тил)-1 Н-имидазол.

Масс-спектр: 322 (53, М 189(30), 176(55), 175(100), 148(18), 121(12), 105(42). 101(11), 79(12), 77(13).

Спектр Н ЯМР (в виде хлористоводо- 0 родной соли, MeOH-d4): 1.1-2,7(m, 8H), 2,24 (S,3H), 4,11(t.1H), 6,9-7,5 (m,9H),8,79 (d, 1H).

4-(5-{3,5-диметилфенил)1-(4-фторфенил}- пентил)-1 Н-имидазол.

5Масс-спектр: 336 (47, М+), 189(90),

176(87), 175(100), 166(13). 148(16), 121(12), 119(16), 91(14L

Спектр МР (в виде хлористоводородной соли, MeOH-d4):

01,1-2.6 (m, 8H), 2,22 (S, 6H), 4,09 (t, 1H),

6,6-7,4 (m, 7H), 7,40 (широкий S, 1H), 8,80 (широкий S, 1Н).

(4-фторфенил)-5-(3-метоксифенил) пентил -1 Н-имизазол.

(3,5-диметоксифенил)-1-(4-фторфенил)пентил -1 Н-имидазол.

П р и м е р 4

4-(1,3-дифенилпропил)-1 Н-имидазол,

1-бензил-5-(1,3-ди-фениллропил)-1 Н-и 0 мидазол гидрогенизировали в смеси 2 н. раствора хлористоводородной кислоты и этанола при температуре 60°С и использовании 10% Pd/C в качестве катализатора.

После прекращения поглощения водо- 5 рода реакционную смесь охлаждали, фильтровали и выпаривали до сухого состояния. Добавляли воду и смесь подщелачивали гидроокисью натрия. Полученный продукт экстрагировали в метиленхлориде. промы- 0 вали водой, высушивали с помощью сульфата натрия и выпаривали до сухого состоянии. Остаток очищали при помощи испарительной хроматографии, используя смесь метиленхлорида и метанола (9,5:0,5) в 5 качестве элюента. Выход составил 73%.

Спектр Н ЯМР (в виде основания, CDCI3):

2,1-2,7 (m, 4H), 3,88 (t, 1H). 6,71 (широкий S, 1Н), 7,01-7,26 (т, ЮН), 7,30 (, 1Н), 10,5 (широкий S, 1Н).

При использовании аналогичного метода было получено следующее соединение:

4-(1,5-диАенилпентил)-1 Н-имидазол.

Спектр Н ЯМР (в виде хлористоводородной соли, MeOH-d4):

1,2-2.3 (m, 6H), 2,57 (искаженный t, 2H), 4,05 (t, 1 Н), 7,05-7,40 (т, 1 Н), 8,73 (d, 1 Н).

П р м е р 5

1-бензил-4-(1,3-дифенилпропил)-1Н-и мидазол .- .

2,0 г бензилбромида в 5 мл толуола по каплям добавляли к смеси 4-{1,3-дифенилп- ропил)-1Р-имидазола (2,6 г), 48% аОН (10 мл), толуола (20 мл) и бромида тетрабутиламмо- ния (0,2 г) при комнатной температуре. После окончания добавления эту реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Добавляли воду и отделяли слой толуола Фазу толуола промывали водой и выпаривали до -сухого состояния. Остаток содержал изомеры 1- бензил-4-(1,3-дифенилпропил)-1 Н-имидазо ла и 1-бензил-5-(1,5-дифенилпропил)-1Н- имидазола. Первый изомер отделяли и очищали при помощи испарительной хроматографии (смесь метиленхлорида и метанола, 9,5:0,5).

Примерб.

4-(1,4-бис(4-фторфенил)бутил))-1 Н-имидазол,

1-бензил-5-(1,4-бис{4-фторфенил}-1-бу- тенил)-1 Н-имидазол (0,2 г) в виде гидрохло- ридной соли гидрировался, как описано в примере 1,

Н ЯМР (в виде основания, CDCI3):

1,4-1,88 (m. 2H), 1,8-1.95 (М.1 Н), 2.05- 2,2 (т, 1Н), 2,5-2,65 (т, 2М), 3,87 (t, 1H), 6.7 (с, 1Н), 6,8-7,2 (т, 8Н), 7,5 (с, 1Н).

Пример

4-(1,4-бис)4-фторфенил(бутил)-1 Н-имидазол.

Концентрированный водный раствор формата аммония (0,1 б г в 2 мл воды) добавлялся по каплям к кипящей смеси 1-бензил- 5-(1,4-бис(4-фторфенил)-1-бутенил)-1 Н-эмида- зола (0,21 г) и 10% палладия на угле (0,02 г) в 20 мл этанола и воды (3:1). Смесь нагрева- лась с.обратным холодильником в течение 2 часов. Катализатор отфильтровывался и растворитель выпаривался, Добавлялся 2М NaOH и продукт экстрагировался в тиленхлорид. Метиленхлориднэя фаза сушилась и выпаривалась досуха, давая продукт.

Соединения по настоящему изобретению являются особенно полезным в качестве ингибиторов ароматазы и поэтому успешно применяются при лечении болезней вызываемых экстрогенами, например. рака молочной железы.

Экстрогены являются важными стероидами в физиологии и нормальном развитии молочной железа и половых органов у женщин. С другой стороны, экстрогена стимулируют рост злокачественных опухолей, вызываемых экстрогенами. в частности злокачественных опухолей молочной железы и матки, причем они могут увеличивать опасность развития злокачественной опухоли

0 молочной железы при введении в виде фармацевтических доз в течение длительного периода времени. Избыточное образование экстрадиола также может вызывать другие доброкачественные нарушения в гормоно5 зависимых органах. Важное значение экстрогенов в качестве стимуляторов и/или регуляторов роста злокачественных опухолей подчеркивается тем фактом, что антиэк- строгены занимают центральное место при

0 лечении злокачественных опухолей молочной железы, имеющей многочисленные рецепторы экстрогена. Действие антиэкстрогенов выражается в связывании рецепторов эстрогана, в результате чего ин5 гибируется биологическое воздействие экстрогенов. Другим подходом, направленным на блокирование действия экстрогенов, является ингибирование синтеза экстрогенов. Это было достигнуто в клинических услови0 ях с помощью аминоглютемида, ингибирую- щего синтез вредных стероидов. Синтез экстрогенов можно блокировать путем ин- гибирования ароматазы фермента, которая является ключевым ферментом в биохими5 ческом синтезе экстрогенов. Ингибирование ароматазы имеет важное значение потому, что некоторые опухоли молочной железы синтезируют эстрадиол и эстрон в этом месте, в результате чего стимулируется

0 постоянный рост опухоли (Алан Липтон идр. Са се 69:779-782, 1987 г.).

Способность соединений по этому изобретению ингибировать ароматазу фермента испытывалась в лабораторных условиях

5 по методу М.Пасанена (Biological Research In Pregnancy, т. 6, № 2. 1985 г., стр. 94-99). В ходе исследования использовали фермент с ароматазой человека. Этот фермент готовили из плаценты человека, которая от0 личается большим содержанием этого фермента. Микросомную фракцию (100000 х г осадка) готовили центрифугированием. Ферментный препарат использовали без дальнейшей очистки. Испытуемые соедине5 ния добавляли вместе с Т / Аандростен- 3.17-дионом, скорость распада которого составляла 100000 распадов в минуту, и системой генерации А РН. Концентрации испытуемых соединений равнялись 0,001; 0,01: 0,1 и 1,0 ммоль. Инкубацию производили при температуре 37 С J течение АО минут. Ароматизация 1,2/ЧЧ/-адростен- 3,17-диона привела к образованию ЧЧ20. Насыщенную тритием воду и насыщенный тритием субстрат легко разделяли при по- мощи миниколонны Sep-Рак, в которой происходило поглощение стероида и элюи- рование свободной воды, Счет радиоактивности вели при помощи жидкостного сцинтилляционного счетчика. Степень инги- бирования ароматазы определяли при сравнении радиоактивности Н20 у образцов, обработанных ингибитором, и у контрольных образцов, не содержащих ингибиторов. Значения средней концентрации ингибиро- вания (1С-50) высчитывали в виде концентраций, ингибирующих активность фермента на 50%. Эти концентрации представлены в таблице 2.

Активность в отношении расщепления боковой цепи холестерина (CSCC) десмола- за) измеряли по методу Пазанена и Пелко- нена (Стероиды) 43:517-527, 1984). Инкубацию производили в 1,5 мл пластиковых пробирках Эппендорфа с использова- нием в качестве единого устройства вибратора Эппандорфа, центрифуги и термостата. В 300 мл инкубированном объеме готовили субстрат (5 ммолей) по методу Ха- нукоглуиДжефкоута(1.Сг1Готаходг. 190:256- 262, 1980), в которы1й затем добавляли радиоактивный Н-4-холестерин, скорость распада которого составляла 100000 распадов в минуту (чистоту этого соединения про- веряли с помощью тонкослойной хроматографии) в 0,5% Твине 20, 10 ммол , 5 мкмолей цианокетояа и 2 ссоля А РН. Контрольные образцы содержали все вышеуказанные вещества, но ферментный препарат инактивировали до инкубации по- средством добавления 900 мкл метанола. В качестве источника фермента использовали митохондриальную фракцию (1 мг белка) из планцеты человека или надпочечников коров. После инкубации в течение 30 минут при температуре 37°С реакцию завершали путем добавления 900 мкл метанола; в каждый термостат добавляли маркер, представляющий 14С-4-прегненолон со скоростью распада 1500 распадов в минуту, после чего пробирки интенсивно встряхивали. После достижения равновесного состояния в течение 10 минут осажденные метанолом белки отделяли путем центрифугирования (8000 х г в течение 2 мин), а всплывающий слой заса- сывали в 1 мл пластиковый шприц и переносили в предварительно уравновешенную (75% метанол) миниколонну. Эту колонну промывали одним мл 75% метанола, а затем 3 мл 80% этанола. Элюат 80% метанола

помещали в счетную пробирку и добавляли 10 мл сцинтилляционной жидкости. Счет радиоактивности вели с использованием программы с двумя метками в жидкостном сЦинтилляционном счетчике(LKB RackBeta). Типичные значения активности для ферментного препарата плаценты человека и надпочечников коровы соответственно представляли 0,5-3 и 50-100 ммолей пре- гненолона, образованного на мг белка в минуту.

В экспериментах по ингибированию полученное вещество (в интервале концентраций от 1 до 100 мкмолей) добавляли к инкубационной смеси в объеме 110-20 мкл обычно в виде раствора в метаноле или этаноле. Такой же объем растворенного вещества добавляли в контрольную инкубационную пробирку. Значения средней концентрации ингибирования (концентрация, вызывающая 50% ингибирование) определяли графически, и полученные результаты представлены в таблице 2, В таблице 1 указаны соединения, которые были испытаны.

Острую токсичность, среднюю летальную дозу, определяли с использованием молодых взрослых самок мышей вида МР1. Введение испытуемых соединений производили перорально. Значения средней летальной дозы испытуемых соединений формулы (1) равнялись - 400 мг/кг или больше.

Суточная доза для больного изменяется от примерно 20 до 200 мг при введении пероральным способом.

Это изобретение иллюстрируется следующими примерами. Спектры Н ЯМР определяли при помощи аппарата Брукера WP 80 (80 мгц). Вещество, выбранное для сравнения, представляло тетраметилсилан. Масс-спектры определяли при помощи аппарата Кратоса М 80РГ с автоматическим пультом.

Формула изобретения

Способ получения замещенного имида- зола общеЈ} формулы

{bC-tfbHCHi

У КЦ RS

R

)ет

,i«

или его нетоксичной фармацевтически приемлемой кислотно-аддитивной соли где R1, R2, RT и R2 - одинаковые или разные, Н. СНЗ, С2Н5. СЗ-Н7, COM3. ОН, СН20Н. N02, NH2, CN, CF3, CHF2, CH2F или галоген; R -H или

СН

где Рз - Н, СНз или галоген;

R4-H;

RS - Н, или R4 и Rs вместе связь;

Y-0-4,

отличающийся тем, что бе дазол общей формулы

О

н

где R имеет указанное значение,

РГ и R2 - одинаковые или разные, Н, СНз, C2Hs, СзН7, ОСНз, N02, СРз. CHF2, GH2F или галоген,.

подвергают взаимодействию с альдегидом формулы

О HC-tCH tj

гдеРц R2-одинаковые или разные, Н.СНз, С2Н5. СзНу, ОСНз, ОН, СН2ОН, N02, NH2, CN, СРз. CHF2, CH2F или галоген; Y имеет указанное значение,

в присутствии титанового реагента с низкой валентностью для получения соединения общей формулы

и необязательно гидрируют данный продукт для получения соединения общей формулы:

N V 0 СН-СН СН уJ

и необязательно, когда R -замещенная или незамещенная бензильная группа, его подвергают реакции гидрогенизации или реакции переноса водорода для получения соединения общей формулы

NRftarni О-сн-сн2(сн2)

н

гидрируют данный продукт или преобразуют данный продукт с помощью реакции переноса водорода для получения соединения общей формулы

{/ СН-СН2(СН2

,. ft

к

Приоритет по признакам:

30.03.89 при Ri, R2. Ri . R2- одинаковые или различные, Н, СНз, С2Н5, СзН, ОСНз, ОН, СН20Н, N02, NH2, CN или галоген R - Н или

ru гДе R3 Н, СНз или

V/n2 vy-Kij )

галоген, R4 - Н и RS - Н, Y 0-2;

31.03.89при Рз и RS вместе образуют связь, Y 3-4;j

29.03.90при Ri, R2, Ri HR2-CF3, CHF2. CH2F.

Использование: в качестве препаратов, ингибирующих ароматазу и десмолззу. Сущность изобретения: продукт общей формулы ЈН-(СН2 1 1 где RI, R2. RI и Ra , одинаковые или разные - Н, СНз. C2Hs. СзН, ОСНз. ОН, СНаОН, N02, NH, CN, CF3. CHF2, CH2F или галоген; R - Н йли . t . 1 -CH,-//«: -D rfleRs-H, СНз или «I галоген; Ri-H, Rs-H или Ita и Rs вместе обрачзуют йвязь; у 0-4. Реагент 1: бензоил-имидазол формулы где R имеет указанные значения; Ri1 и R2 , одинаковые или разные и представляют Н, СНз, С2Н5, СзН, ОСНз, N02, CF3, CHF2, CH2F или галоген. Реагент 2: альдегид формулы О НС-(СН2)у ( / Кгде RI и R2. одинаковые или разные, - Н, СНз, С2Н5, СзН7. ОСН, ОН, СН2,ОН, N02.NH2, CN, СРз, CHF2, CH2F или галоген; у имеет указанное значение. Реагент 3: соединение формулы V сл с (СНг)9 -if где R , Ri . R2 . Ri, R2 имеют указанные значения. Реагент 4: соединение формулы 1 Ra 00 СО О Сл) СЛ $ Сл) Ri, R2 имеют указанные

Испытание соединений

Таблица 1

13

Т а б л и ц а 2

Ингибирование ароматазы и диомолазы в организме человека (С С С)

под действием испытуемых соединений. Средняя концентрация ингибированйя (1С-50) представляет концентрацию, которая ингибирует

50% фермента

1836354

14 Продолжение табл.1