Способ культивирования продуцента бацитрацина BACILLUS LICHENIFORMIS Советский патент 1993 года по МПК C12P21/04 

Изобретение относится к микробиологической промышленности и может быть использовано в производстве бацитрацина.

Цель изобретения - увеличение антиби- отикообразования и уменьшение инактивации продукта,

Способ культивирования продуцента бацитрацина Bac.llchenlfoumis 356 заключается в выращивании продуцента на жидкой питательной среде, содержащей компоненты при следующем соотношении, мас.%:

Соевая мука 9,0-9,8

Крахмал2,4-2,6

Мел0,36-0,40

MgSCM 7Н20 0,12-0,3

ВодаОстальное

Культивирование ведут при температуре 38 ±1°С и скорости аэрации 500-800 м3/ч, затем, начиная с момента антибиоти- кообразования и при достижении соотношения углерода и азота в среде .11-13:1, температуру понижают на 3-4°С, одновременно корректируют рН до значения 6,9-7,1 и скорость аэрации увеличивают до 1000- 1800м3/ч.

Пример 1. Посевной материал для засева питательной среды в ферментере готовят на питательной среде следующего состава, мас.%:

Мука соевая7,5

Крахмал1,8

Мел0,2

Аммоний сернокислый0,2

Вода дистиллированнаядо 100%

Среду разливают по 400 мл в трехлитровые колбы и стерилизуют при Т 125± 2°С в течение 5 мин. Засев стерильной среды осуществляют суспензией, полученной с косяка смывом культуры 12-15 мл МПБ, в количестве 2,5 мл в каждую из 4-х колб. Выращивание культуры проводят в термостате на качалке с числом оборотов 180-220 в минуту при температуре 30 ±1°С в течение 24 ч, рН конечное 6,4 ±0,1. Полученным посевным материалом в количестве 0,002% засевают питательную среду в ферментере емкостью 63 м3 с объемом среды 30,5 м , состоящей, мас.%:

Соевая мука 8,0

Крахмал2,2

Мел0,32

MgSCM 7Н20 0,1

Водадо 100

Культивирование начинают при температуре 38 ±1°С с аэрацией 500 м3/ч. При данной температуре культивируют до начала антибиотикообразования и достижения

соотношения углерода к азоту CLN 10, что соответствует приблизительно 8-10 ч роста продуцента. Затем температуру снижают на 3°С с одновременным поддержанием рН на уровне 6,9 и увеличивают аэрацию до 1000

м /ч. Продуктивность Bac.lichentformis 356 составила 13900 мкг/мл.(см. табл.).

Пример 2. Способ культивирования осуществляют аналогично примеру 1 (см. табл.) при 38 ±1°С с аэрацией 800 м3/ч до

достижения соотношения C/N 11. Затем температуру понижают на 4°С с одновременной корректировкой рН до значения 6,95 и увеличивают аэрацию до 1800 м3/ч. Продуктивность Вас. licheniformis 356 составила 15850 мкг/мл.

Пример 3. Способ осуществляют по примеру 1 (см. табл.) при 38 ±1°С с аэрацией 800 м3/ч до достижения соотношения C/N 12, затем температуру понижают на

4°С с одновременной корректировкой рН до значения 7,05 и аэрацией 1800 м3/ч. Продуктивность Вас. licheniformis штамма 356 составила 16100 мкг/мл,

Пример 4. Способ осуществляют по

примеру 1 (см. табл.1) при 38 ±1°С и аэрации 600 м /ч до достижения соотношения C/N 13, затем температуру понижают на 4°С с одновременной корректировкой рН до значения 7,1 и аэрацией 1600 м3/ч. Продуктивность Вас. llcheniformls шт. 356 составила 15900 мкг/мл.

Пример 5. Способ осуществляют по примеру 1 при 38° ±1°С и аэрацией 700 м /ч (см. табл.) до достижения соотношения C/N 14, затем температуру понижают на 4°С содновременной корректировкой рН до значения 6,9 и аэрацией 1700 мэ/ч. Продуктивность Вас. lichenlformte шт. 356 со- стзоила 14900 мкг/мл.

Таким образом, предлагаемый способ культивирования Вас, licheniformis позволяет повысить продуктивность культуры на 29-30% и снизить инактивацию на 3-4%. (56) 1. Авторское свидетельство СССР

Ns 1280880, кл. С 12 Р 21/04, 1985.

2. Авторское свидетельство СССР № 497333.кл. С 12 Р 21/104, 1975.

3. Промышленный регламент ПР 104.180-8 на производство бацитрацина в цехе 33, утв. 16.04.84. Директором БХЗ Б.В.Прилепским.

Формула изобретения СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ПРОДУЦЕНТА БАЦИТРАЦИНА BACILLUS LICHENIFORMIS 356 путем засева в питательную среду, содержащую соевую муку, крахмал, мел, сернокислый магний, при .перемешивании в условиях ступенчатого режима температуры и аэрации, отличающийся тем, что, с повыше-. ния антибиотикообразования и уменьшения инактивации продуцента, засев осуществляют в питательную среду при следующем соотношении компонентов, мас.%:

5

Соевая мука9,0 - 9,8 Крахмал 2,4-2,6 Мел 0,36 - 0,40 Сернокислый магний 0,12-0,13 Водопроводная вода Остальное после засева культивирование ведут при температуре 38 ± 1 С и скорости аэрации 500 - 800 м3/ч, затем, начиная-с.момента антибиотикообразования и по достижении соотношения углерода и азота в среде 11- 13 : 1, температуру понижают на 3 - 4 С. одновременно корректируют рН до значе ния 6,9 - 7,1 и скорость аэрации увеличив /ют до 1000- 1800м3/ч.

Использование: в микробиологической промышленности при культивировании продуцентов антибиотиков. Процесс культивирования ведут при ступенчатых режимах аэрации и температуры, в начале процесса при 38±1 С и скорости аэрации л 500-800 м /ч а начиная с момента антибиотико- образования и достижения соотношения углерода и азота в среде 11 - 13 :1, температуру культивирования понижают на 3 - 4°С с одновременной корректировкой рН до значения 6,9 - 7.1 и скорость п аэрации увеличивают до 1000-1800м /ч Культивирование проводят на питательной среде следующего состава мас.%: соевая мука 9,0 - 9.8, крахмал 2,4 - 2,6; мел 0.36 - 0.40; MgS04«7H О 0,3, вдда водопроводная остальное. Активность оацитроцкнз увеличивается на 29 - 30%, а инактивация уменьшается на 3 - 4%. 1 табл.