СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТРАНСПОРТНОЙ РИБОНУКЛЕИНОВОЙКИСЛОТЫ Советский патент 1966 года по МПК C12N1/00 

Известен способ получения транспортной рибонуклеиновой кислоты (т-РНК), заключающийся в том, что биологический источник обрабатывают смесью воды и фенола, причем т-РНТ экстрагируется в водную фазу, водный слой отделяют центрифугированием, т-РНК очищается сорбцией из водных растворов на целлюлозном ионообменнике - диэтиламиноэтилцеллюлозе, элюируется растворами солей и осал дается спиртом.

С целью получения продукта высокой степени чистоты, предлагается в качестве аминоалкилцеллюлозы применять аминоэтилцеллюлозу и сорбцию вести непосредственно из водного раствора, полученного после фенольной экстракции. Предлагаемый способ заключается в том, что биологический источник обрабатывают смесью воды и фенола, суспензию центрифугируют и водный слой пропускают через колонку, содержащую аминоэтилцеллюлозу, элюируют т-РНК растворами солей и осаждают из раствора спиртом,

Пример. 50 кг пекарских дрожжей, 50 л йоды и 50 л 80Vo-Horo водного фенола переме шивают в течение 2 час. Суспензию цетрифугируют, и водный слой пропускают через коЛоику, содержащую 2 ке аминоэтилцеллюлозы. Колонку промывают 40 л воды, 40 л 1,0 М. хлористого натрия и т-РНК элюируют 2,0 М хло)эистым натрием. Элюат, содержащий Т-РНК, смещивают с двумя объемами спирта, осадок отделяют центрифугированием и промывают спиртом. Осадок суспендируют в 1,0 М ацетатном буфере рН 5, и суспензию центрифугируют. К надосадочной л :идкости добавляют 1,0 л спирта, и осадок отделяют центрифугированием. К осадку т-РНК добавляют 0,3 л 0,1 М карбонат-бикарбонатного буфера рН 10. Раствор выдерживают 1 час при температуре 37° С, подкисляют до рН 5, и

т-РНК выделяют осаждением спиртом. Осадок промывают спиртом и лиофильно высущивают. Весь процесс, за исключением процедуры сущки, проводят ири температуре 20- 25° С.

Получают препарат т-РНК со следующими

характеристиками: 2o,i«s 20-22 ед. оптической плотности; константа седиментации Szota 4,0; акцепторная активность для ряда аминокислот 1,5-2,0 ммк-моль на 1 мг т-РНК. Выход 300-500 мг/кг дрожжей.

Предмет изобретения

Способ получения трансйортной рибонук-лекновой кислоты из биологических источников путем экстракции водно-фенольной смесью, сорбц -. на ионообменнике -- аминоалкилцеллюлозе, элюции растворами солей и 3 чистоты, в качестве аминоалкилцеллюлозы применяют аминоэтилцеллюлозу и сорбцию 4 ведут непосредственно из водного раствора, полученного после фенольной экстракции.