Изобретение относится к производству бактериальных препаратов, применяемых для защиты расгенпй от насекомых-вредителей.
Известны бактериальные препараты для зашиты растений от насекомых-вредителей - энтобактерин, дендробациллин, пнсектин, которые готовят на штаммах спорообразуюших кристаллоносиых бактерий группы Bacillus thuringiensis и которые состоят из спор и крпсталлических включений. Эти препараты применяются для борьбы с листогрызушими гусеницами из семейства чешуекрьктых.
Известны также препараты, основанные па бактериях этой же группы (I серотип - Вас. thuringiensis var. thuringiensis), но с более широким спектром действия - чешуекрылые, двукрылые, жесткокрылые и полужесткокрылые. К таким препаратам относятся, в частности, турицид и бактан.
Более широкий круг действия двух последних иреиаратов объясняется наличием в них, помимо спор и кристаллов (токсического белка), еше и термоустойчивого экзотоксинного комплекса, называемого «мушиным токсином по названию тест-объекта Musca domestica L., чувствительного к экзотоксину. Экзотоксин оказался токсичным для гусениц, бабочек и личинок двукрылых, прямокрылых и перепопчатокрылых насекомых. Экзотоксин токсичен для пчел, однако в дозах, применяемых в сельскохозяйственном производстве (I-2 кг/га} он нетоксичен.
Недостатком некоторых известных бактериальных препаратов является отсутствие в них экзотоксинного комплекса. Именно это обстоятельство и сокрашает спектр действия бактериальных инсектицидов. Выявление бактерий, способных синтезировать экзотоксин, имеет большое практическое значение, потому что иа этом принципе можно получать бактериальные препараты.
Установлено, что Bacillus insectus Guk. способен производить термостойкий экзотоксинный комплекс.
Предлагается способ получения термостойкого экзотоксинного комплекса, включаюшпй культивирование бактерии-продуцента на обычных питательных средах с последующей: сепарацией и стерилизацией культуральной жидкости, как это принято ири получении экзотоксинного комплекса с использованием известных для этой цели бактерий, при котором: в качестве бактерии-продуцента берут Вас.insectus Guk.
в течение 48 час на среде, содержащей 3% кукурузного экстракта и 0,7% глюкозы, в сосудах на качалке. Полученную культуральную жидкость подвергали сепарации с помощью центрифуги (3000 об/мин) и стерилизации в течение 20 мин нри 1 атм (для уничтожения спор и кристаллов).
Таким же образом получали культуральные жидкости четырех бактерий, причем в качестве эталона была взята культуральная жидкость бактерии Вас. thuringiensis var. thuringiensis, которая продуцирует экзотоксинный комплекс.
Испытание проводили на личинках комнатной мухи, взятой в качестве тест-объекга. Культуральную жидкость давали с кормом в дозе 1 лл на 1 г корма.
В каждом варианте было по 90 шт. личинок.
Результаты испытаний приведены в таблице.
Влияние стерильной культуральной жидкости некоторых бактерий на выживаемость комнатной мухи.
Из таблицы видно, что культуральная жидкость Вас. insectus Guk. обладает высокой токсичностью по отношению к личинкам комнатной мухи, которая вполне сравнима с токсичностью культуральной жидкости Вас. thuringiensis var. thuringiensis и, конечно, значительно выше чем у других бактерий, которые не образуют экзотоксинного комплекса.
Летальная концентрация культуральной жидкости Вас. insectus Guk, при которой погибает половина личинок и пупариев (ЛКво), для комнатной мухи составила 1,5-2,0%.
Испытание культуральной жидкости Вас. insectus Guk. на гусеницах капустной совки также дало удовлетворительные результаты. Погибло 80% гусениц. Эитобактерин, дендробациллин и инсектин, как известно, не поражают гусениц капустной совки.
Предлагаемый способ получения термостойкого экзотоксинного комплекса позволяет изготовлять известными способами энтомонотогенные бактериальные препараты, содержащие споры, белковые кристаллы и экзотоксинный комплекс, а также препараты, содерж.ащие только экзотоксин.
Предмет изобретения
Способ иолучения термостойкого экзотоксинного комплекса, включающий культивирование бактерии-продуцента на питательной среде с последующей сепарацией и стерилизацией культуральной жидкости, отличающийся тем, что, с целью расширения спектра действия бактериальных препаратов, основанных на использовании спор, белковых кристаллов и/или экзотоксинов, в качестве бактерии-продуцента, берут Bacillus insectus Guk.
