СПОСОБ МАЦЕРАЦИИ PACTHTEJibHblX ТКАНЕЙ Советский патент 1972 года по МПК A01G7/00 

Мацерация - разделение ткали на отдельные составляющие ее клетки путем растворения межклеточного вещества. Используется мацерация при изучении вопросов роста и дифференциации растений, а также для пересчета результатов физиологических и биохимических анализов при нроведении исследований на клеточном уровне.

Существует несколько способов мацерации растительных тканей, которые подробно изложены в литературе. Однако ни один из них не дает полной мацерации семян подсолнечн}1ка. Известен способ Манжена, обеспечивающий некоторую степень мацерации молодых семя1: подсолнечника в возрасте от 6 до 12 дней. По этому способу части растений сначала помещают на 24 час в подкисленную воду илп в подкисленный сипрт (на 3-5 частей воды нлп снирта 1 часть соляной кислоты), а затем на то же время - в 10%-ный раствор аммиака, содержащий ион аммония, причем для ускорения процесса части растений кинятят в этом растворе приблизительно в течение часа. Если же ткань плохо распадается на клетки, концентрацию аммиака повыщают до 30% и даже используют крепкий аммиак.

Недостатком способа Манжена является то, что он эффективен лищь для тканей молодого возраста, кроме того, работа с высокими концентрациями аммиака вредна для здоровья,

2

Цель изобрегения - разрапотк; Ilux-ooa мацерации, обес 1ечиваюи1еи) полное разделение на клетки зрелых семян иодсолпечника.

Достигается это тем, что объекты растительных тканей номещают в смесь KOimeiiTpiiрованной соляной кислоты и 96 этилового спирта (1:1) и выдерживают 48-72 lac (в завнсимост от возраста растения), .чагом luiпятят в 0,5% растворе щавелеБокис.1(11Ч) а.ммо11ИЯ, содержащего ион аммония, в гсчоние 20-30 мин.

Пример. Свежи или 3ailJHi4CHpt)iiaiJiibiii материал помеи1.ают в коническую колбу i)ui.емо.м 50 мл и заливают с.мссью KoimcHTjinjiuванной соляной кнслоты и 96° этплов1)Г() сии )та (1:1) в количестве, иревыи1аю це.м объем нсследуемого магернала в 10-15 раз. В этой смеси материал )1аходптся 48-72 час (в зависимости от возраста и степени зрелости семян). Затем его переносят в 0,5% раствор щавелевокислого аммоння, содержащего поп аммония, и кинятят в течение 20-30 мин. После этого объекты становятся мягкими и легко распадаются на отдельные клетки при втягивании раствора в шприц и выталк1 вании его обрат}10 иа стенки сосуда. Полученную таким способом суспензию клеток доводят до нужного объема дистиллированной водой. Общий объем суспензии можно варьировать в зависимости от количества исследуемой ткани и пробе. Разведение суспензии необходимо для облегчения подсчета числа клеток в счетных к а iMер ах,. Предлагаемый способ мацерации растительП1 1х ткапей оказался пригодным также и для корепжов и листьев подсолнечника. Степень мацерации тканей подсолнечника в зависимости от способа обработки видна из прилагаемой таблицы

Предмет изобретения

Способ мацерации растительных тканей, например, подсолнечника, включающий выдерживание исследуемого материала в смеси концентрированной соляной кислоты и этилового спирта и обработку в растворе, содержащем lioii аммония, отличающийся тем, что, с целью обеспечепия более полной мацерации тканей.

соляную кислоту и этиловый снирт берут в соотношении 1:1, выдерживают исследуемый материал в смеси в течение 48-72 час, в качестве раствора, содержащего ион аммония, используют раствор щавелевокислого аммония, предпочтительно концентрацией 0,5%, а обработку в цоследнем проводят путем кипячения в течение 20-30 мин.