Способ выращивания растенийпОдСОлНЕчНиКА Советский патент 1981 года по МПК A01H1/04 

Борная кислота10 Цинк сернокислый10 Натрнй молибденовокислый однозамещенный0,25 Медь сернокислая0,025 2.5 мл раствора натриевой соли этнлендисминтетрауксусной кислоты7,45 г Железо сернокислое5,57 г в 3.Мезоинозит100 а-аминоуксусная кислота2 Никотиновая кислота5 Витамин ,5 Витамин Вб0,5 Фолиевая кислота0,5 4.:р-индолил-уксусная кислота0,5 5.Агар-агар8 г Сахароза20 г Однако среда Нича и Нич также малопригодна для культивирования эмбрионально-молодых зародышей подсолнечника из-за превращения зародышей в каллусную

Влияние возраста зародышей и питательной среды на частоту и время выхода растений 5 1 л 10 15 20 25 ткань. В результате получается низкий выход растений при сравнительно продолжительном времени выраш,ивания зародышей. Это затрудняет достижение поставленной цели, направленной на сокращение вегетационного периода. Целью изобретения является ускорение селекционного процесса, в частности подсолнечника за счет использования эмбрионально-молодых зародышей и питательной среды. Поставленная цель достигается тем, что для выращивания используют 9-11-дневные зародыши, а в среду Нича и Нич дополнительно вводят а-нафтилуксусную кислоту 2-3 мг; кинетин 2,4 мг; активированный уголь 1-1,5 г и содержание р-индолилуксусной кислоты доводят до 1 - 1,5 мг, а а-аминоуксусной кислоты - до 10-15 мг на 1 л среды. Определение оптимального возраста зародышей и создание оптимальной питательной среды обеспечивают сокращение времени выращивания и больший выход растений (см. табл.).

Примечание: 1 - Среда Нича и Нич без добавок.

2 - То же, с предлагаемыми добавками.

Из таблицы видно, что выращивание растений подсолнечника из более молодых зародышей занимает в 2-3 раза больше времени. В этой связи следует считать, что для достижения поставленной цели необходимо использовать зародыщи 10 дневного возраста.

Использование в качестве добавок ауксинов, цитокинина и активированного угля (роль последнего сводится к адсорбции избытка ауксинов и поглощению вредных продуктов метаболизма) способствует быстрому развитию молодых зародышей в нормальное растение.

Способ осуществляется следующим образом.

10-дневные зародыши извлекают из семянки и семени под микроскопом М.БС-2

(на стерильном столике) с помощью стерильной препаровальной иглы и пинцета. Затем микробиологической иглой, с соблюдением правил асептики, зародыши переносят на питательную среду (пробирка или колба). Пробирки с зародышами помещают в камеры искусственного климата (+28- 30°, освещенность 8 тыс. люкс, относительная влажность 70-75%). Через 4-5 дней 80-90% зародышей образуют первую пару настоящих листьев и хорощо развитую корневую систему. В таком состоянии растения пересаживают в сосуды с почвой. При этом корневую систему тщательно очищают от питательной среды.

Питательной средой, используемой в данном способе, служит модифицированная

реда Нича и Нич следующего состава (мг а 1 л. среды):

однозамещенный68 Марганец сернокислый25 Борная кислота10 Цинк сернокислый10 Натрий молибденовокислый однозамещенный0,25 Медь сернокислая0,025

Железо сернокислое5,57 г в 1 л

кислота1,0-1,5 а-нафтил-уксусная

кислота2,0-3,0

Кинетин2,0-4,0 а-аминоуксусная

кислота10,0-15,0

уголь1,0-1,5 г

Сахароза10-20 г

Агар-Агар0,8 г

Использование изобретенияпозволит сократить вегетационный период за счет исключения фазы развития и созревания семян на 40-50 дней в зависимости от генотинических особенностей линий. Это нозволит, например, сократить весь цикл перевода линий на ЦМС (цитонлазматическая мужская стерильность) основу и создание линий восстановителей фертильности для каладой в отдельности на 240-300 дней,

т. е. в 2 раза.

Формула изобретения

Способ выращивания растений подсолнечника in vitro включающий выращивание зародышей подсолнечника на питательной среде Нича и Нич отличающийся тем, что, с целью ускорения селекционного процесса, для выращивания используют 9-11дневные зародыши, а в среду Нича и Нич дополнительно вводят а-нафтилуксусную кислоту - 2-3 мг, кинетин - 2,4 - мг, активированный уголь - 1 -1,5 г и содержание р-индолилуксусной кислоты доводят до 1 -1,5 мг, а а-аминоуксусной кислоты до 10-15 мг на 1 л среды.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Семихненко П. Г. и др. Культура подсолнечника, М., «Колос, 1960, с. 105. 2. Бутенко Р. Г. От свободно живущей клетки к растению, М., «Колос, 1971 г., с. ,29-30.

3. Ж. .Science, США, 169, № 3862, 1969, с. 85-87 (прототип).