ШТАММ ДРОЖЖЕЙ CANDIDA LIPOLUTICA 695ВСЕСОЮЗНАЯRAliHTHe-TtXKHiEQRAH:ЬИб Советский патент 1972 года по МПК C12N1/16 C12Q1/02 

Изобретение от носится к способам получеиия новых штаммов дрожжей, используемых в качестве индикаторных культур, например, при количествевном определении тиамина (витамина Bi) и. может быть применено в методах контроля содержания витаминов .в о бъектах различного пр.оисхождения.

Известны штаммы дрожжей рОда Candida, используемые в качестве индикаторных культур .при количественном онределении тиами«а. Однако такие штаммы дрожжей не способны синтезировать витамины группы В и ряд иньгх соединений.

Ири культивировании этих микроорганизмов приходится иметь дело со сложными средами, содержащими гидролизат казеина или дрожжевой экстракт, предварительно освобожденными от следов витамина BI, и вводить .в эти среды необходимые витамины (биотин, ниридоксин, никотиновую и пантотеновую кислоты, И нозит). Кроме того, эти штамМы нечувствительны к низким концентрациям витамина BI и с их помощью можно определить содержание витамина. Bj в интервале концентрации 0,,1 мкг/мл.

Цель изобретения- создайие такого штамма дрожжей, который по сравнению с известными индикаторными культурами дрожжей обладает следующими преимуществами.

1.|Культура является гетеротрофной только в отношении витамина В и не требует других стимуляторов роста, в связи с этим выращивание культуры мож.но нроводить на

простой минеральной среде Ридер, не содержащей Витаминов группы В или других биологически активных веществ.

2.Одинаково хорошо растет как на средах с глюкозой, так и с нормальными алканами.

Алифатические углеводороды полностью свободны от следов тиамина и его осколков (тиазола. и пиримидина). При этом отпадает необходимость очистки субстрата от следов тиамина в случае использо.вания этого субстрата для роста предлагаемого штамма др.ожжей. Это значительно упрощает метод 0:Пределения витамиНа В.

3.При выращивании предложенного штамма на средах с н-алканами резко повышается

чувствительность определения витамина BI. В этом случае гиамин может быть определен с достаточной точностью при содержании его В жидкости 0,0001-0,001 мкг/мл.

Штамм дрожжей Candida lipolytica 695 выделен из ила нефтеочистительных сооружений i(r. Ангарск) с использованием жидкого парафина в качестве единственного источника углерода. Штамм хорошо растет на средах как с алифатическими углеводородами, так и саМолодая культура на жидком или агаризованном сусле состоит из одиночных, овальных и вытянутых клеток размером (5-7,5 ж/с) X Х(2,5-5 мк). При старе«ин появляются цепочки клеток.

При росте на жидком сусле при 28°С через трое суток на иоъерхности сусла образуется тонкая пленка, утолщенная по краю, на дне пробирки хлопьевидный осадок, а через 14 дней - мощный слоистый осадок.

Колонии на сусло-атаре кремовые, неправильной формы, вьняуклые, оильноскладчатые.

Рост по штриху выпуклый, сильноскладчатый, цвета слоновой КОСти. Псевдомицелий образуется как еа картофельном агаре, так и в старых культурах на сусло-агаре.

Ассимилирует глюкозу, этанол, н-алканы, при этом .происходит сильное подкисление среды.

Следы роста на (галактозе и мальтозе. Не растет на сахарозе, лактозе, рафииозе, арабинозе, крахмале. Использует (NH4)2SO4, NHiCF и пептоН в качестве источошка азота. На нитратах не растет.

Молоко пептонизирует. Полная пептонизация молока, наступает через 10-12 суток роста при 28°С.

Желатину разжижает.

Жир .расщепляет.. Активное расщепление :жира о. уже через трое суток роста.

Оптимальн. те.мпература для роста 28-30°С.

Штамм поддерживают и хранят на агаризо1ванной среде Ридер с ларафииом.

Штамм дрожжей Candida lipolytica 695 в качестве вндикаторной культуры обеспечивает резкое повышение чувствительности микробиологического метода определения тиамина и его структурного компонента витаминного пиримидина.

Предмет изобретения

Штамм дрожжей Candida lipolytica 695.

Органическая среда. Жидкое или атаризованное сусло. Клетки овальные и вытянутые, одиночные. Размер клеток (5- 7,5л««;)Х(2,5-5,0 мк). В старой культуре клетки соединены в цепочки.

Жидкое с у ело. Роств виде тонкой пленки на поверхности, среды и хлопьевидного осадка на дяе пробирки.

Сусло-агар. Колонии кремового цвета, неправильной формы, выпуклые, сильноскладчатые. Рост пО щтриху выпуклый, сильноскладчатый, цвета слОНовой кости.

Ка ртофел ь« ы и агар. Нсевдомиделий хорошо развит. О т н о ш е ни е к с а х а р а м. Сахара не

ображивает, строгий аэроб. Ассимилирует глюкозу, этанол, н-алканы с одновременным подкислением среды. Следы роста на галактозе и мальтозе. Не растет на сахарозе, лактозе, рафинозе, арабинюзе, крахмале.

Отйошение к источникам азота. Хорошо растет на. аммонийном азоте и пепто не. На нитратах не растет. Молоко пептонизирует. Желатииу разжижает. Жир расщепляет. Оптимальная температура роста 28-30°С.

Штамм поддерживают и хранят на агаризованной среде Ридер с парафином.