Изобретение относится к способам изготовления диагностических биопрепаратов.
До настоящего времени способа получения аитигена для серологической диагностики безноитиоза крупного рогатого скота нет.
Целью предлагаемого способа является получение специфического антигена для серо.логической диагностики безноитиоза с полиым отделением возбудителя цист безноитий от соедииительной ткани.
Сущность способа заключается в том, что иораженную цистами безноитий ткаиь иодвергают фермеитативному гидролизу с иоследующей отмывкой физиологическим раствором и измельчением шуттелированием.
Материалом для приготовления антигена служит соединительная ткань, пораженная цистами безноитий больного животного.
Ткань с цистами измельчают, фарш подвергают ферментативному расщеплению до освобождеиня цист возбудителя от окружающей их соединительной ткани. Берут 35 г фарша, 2,5 мл соляной кислоты, 3,5 г пепсииа, 500 мл физиологического раствора хлористого натрия и термостатируют при температуре 37°С в течение 16-17 час. Затем фильтруют через капроновый фильтр с диаметром 0,8-1 мм. Через 5 мин надосадочную жидкость сливают, а осадок (цисты) промывают физиологическим раствором. Промывку повторяют пять раз.
2
К осадку добавляют физиологическпй раствор 1 : 10 и шуттелируют в течение 4 час со стеклянными бусами.
Полученную гомогенную эмульсию гомогенизируют в микроизмельчителе в течение 10 мин при 5000 о61мин, затем центрифугируют в течение 20 .мин при 7000 об/л/г/н. Падосадочпую жидкость сливают, к ней добавляют эфир 1 : 2, шуттелируют в течение 1 час,
помещают в делительиую воронку и выдерживают в холодильнике 16 час. Жидкость разделяется на три слоя. Нижний слой осторожно сливают, гомогенизируют в микроизмельчителе в течение 10 мин при 5000 об/мин
и используют в качестве антигена.
Предлагаемый способ получення безиоитиозного антигена может быть использован не только для серологической диагностики безноитиоза крупного рогатого скота, но и для
диагностики безноитиоза лошадей, севериых оленей и других домашних и диких животных, а также для серологнческой диагностики саркосиоридиоза и других заболеваний животных, вызываемых пистообразуюищми возбудителями.
Предмет изобретения
Способ получеиня антигена для серологической диагностики безноптиоза крупного рогатого скота, отличающийся тем, что, с целью 3 полного отделения возбудителя цист безно11ТИЙ от соединительной ткани, пораженную цистами безноитий, ткань подвергают фермен4тативлому гидролизу с последующей отмывкой физиологическим раствором и измельчением шуттелированием.
