СПОСОБ ОЧИСТКИ ЦИСТ BESNOITIA BESNOITI КРУПНОГО Советский патент 1972 года по МПК A61K39/02 

Изобретение относится к способам изготовления биологических препаратов.

Способов изготовления биологических препаратов из очищенных безноитий в настоящее время не известно.

Предлагаемый способ очистки цист безноитий крупного рогатого скота состоит в том, что пораженную цистами безноитий ткань подвергают механическому разрушению в 0,05 М растворе тетраоксалата калия на физиологическом растворе хлористого натрия, а затем остатки структурных элементов ткани подвергают ферментатив юму перевариванию пепсином.

По предлагаемому способу очистку цист Besnoitia besnoiti производят следующим образом.

3-5 г ткани, пораженной цистами безноитий, измельчают ножницами, помещают в размельчитель тканей, заливают 300-400 Л1Л 0,05 М раствором тетраоксалата калия на физиологическом растворе хлористого натрия, рН раствора от 1-4 и гомогенизируют 5-7 мин. Полученную смесь центрифугируют при 1000-1500 об/мин в течение 1-2 лшн. Надосадочную жидкость удаляют, а осадок ресуспендируют в 300-400 мл 0,05 М растворе тетраоксалата калия на физиологическом растворе, снова гомогенизируют 5-7 мин и центрифугируют, надосадочную жидкость удаляют, а с осадком подобные операции повторяют еще 3-5 раз, пока надосадочная жидкость не станет совершенно прозрачной. Затем осадок, содержащий цисты, заливают 0,5%-ным раствором пепсина на 0,05 М растворе тетраоксалата калия с 0,85% хлористого натрия и термостатируют при температуре 37-38°С в течение 4-6 час. Через каждые 1-2 час проводят микроскопический контроль ферментативной смеси. По окончании ферментативного расщепления остатков структурных элементов ткани цисты 2-3 раза отмывают вышеуказанным раствором. Очищенные цисты безноитий используют для приготовления безноитиозного антнгена. Хранить цисты можно в физиологическом растворе NaCl с добавлением мертиолата 1:10000 при 4°С.

Предмет изобретения

Способ очистки цист Besnoitia besnoiti крупного рогатого скота, отличающийся тем, что, с целью отделения цист от ткани для изготовления специфического антигена для серологической диагностики безноитиоза, пораженную цистами безноитий ткань подвергают механическому разрушению в 0,05 М растворе тетраоксалата калия на физиологическом растворе хлористого натрия с последующим ферментативным перевариванием остатг -ов структурных элемеитов ткани.