ИНГИБИТОР ВИРУСОВ Советский патент 1973 года по МПК C12N7/06 

Изобретение относится к медицине, а именно к вирусологии.

Предлагаемое соединение в качестве ингибитора вирусов в (патентной литературе не описано.

В качестве ингибитора вирусов предложено применять 3-окси-1,3-диметил-6-арилпииеридоны-4 общей формулы

где Аг -- арильный радикал, содержащий в 0-, м- и и-положения. галоид, алкильные н алкоксильные группы.

Пример. К раствору 0,3 г-моль метиламина в 70 мл изопропанола прибавляют 0,13 г-моль 1,2 эпокси-2-метил-5-арил-4-пентен-3-она. Реакционную смесь встряхивают при комнатной температуре в течение 30 час. Изопропанол отгоняют гори пониженном давлении, а остаток подкисляют 5%-ной соляной кислотой. Кислый раствор экстрагируют эфиром для удаления нейтральных продуктов, а затем подщелачивают поташом.

Выделивщийся продукт отфильтровывают, промывают на фильтре водой, сушат и кристаллизуют из гексана. Получают З-окси-1,3диметил-6-арилпиперидоны-4 (I-П1) с выходом до 84%: I (Аг СбН5), т. пл. 53°С, хлоргидрат, т. пл. 124°С; II (Аг п-РСбН5), т. пл. , хлоргидрат, т. пл. 113°С; III (Аг п-СНзОСбН4), т. пл. 95°С. хлоргидрат, т. пл. 165°С.

Хлоргпдраты 3-окси-1,3-диметил-6-арилпиперидинов-4 представляют собой белые кристаллические вещества, легко растворимые в воде.

Антивирусную активность названных соединений определяют на модели аденовируса 3 типа.

Эталонный штамп 3 типа получен из музея вирусов Института вирусологии им. Д. И. Ивановского АМИ СССР. В опытах применяют

вирусосодержащую культуральную жидкость с титром 5,3 Ig ТЦДбо. Первичный отбор ингибирующих соединений проводят на пассируе.мых кожно-.мышечных клетках эмбрио-на человека по снижению цитопатического дейстПИЯ (ЦПД) вируса.

Пассируемые кожно-мыщечные клетки эмбриона человека выращивают на среде из 5% гемогидролизата с 10% бычьей сыворотки. Используют пробирочные культуры на четвертые сутки роста с посевной дозой клеток в 1,0 мл 4-10 -2-10. В качестве поддерживающей среды применяют «гемогидролизат-поддерживающую среду. Влияние соединепий на инфекционную активность вируса определяют на культуре трипсинйзированных клеток почки эмбриона человека (ПЭЧ). Клетки ПЭЧ выращивают в пробирках с посевной дозой б-Ю -7-10 в 1,0 мл по общепринятому методу на 0,5%-ном растворе гидролизата лактальбумина с 10% бычьей сьгворотки. Берут опыт на 5-е сутки роста и поддерживают на той же среде, но без сыворотки. Перед инфицированием культуру клеток однократно отмывают соответствующей поддерживающей средой. В отборочных опытах вирус с множественностью инфекций 0,03-0,3 ТЦДбо/кл инкубируют в присутствии 1,0 Л1Л поддерживающей среды, содержащей препарат в нетоксичной дозе для культуры клеток в течение 7-10 суток. Учитывают разницу ЦПД вируса, обработанного препаратом и контрольного в проце-нтах поражения клеточного монослоя. ЦПД оценивают по общепринятой четырехкрестной системе, где; 1+ соот ветствует 25%, , , 4-|- -100% поражения клеточного пласта. Инфекционную активность вируса определяют методом титрования по ЦПД. Титр вируса вычисляют по методу L. Reed, Н. Muench (1938). Сравнивают титр вируса репродуцированного в присутствии соединения и контрольного. Достоверность различий принята па уровне 95%.. Препараты являются мало токсичными. Лищь такие высокие концентрации как 1600 мкг/ли оказывают цитотоксическое действие, а дозы 800 мкг/мл и ниже не вызывают никаких морфологических изменений. Соединение хлоргидрат-З-окси-1,3 диметил-6-фенилниперидона-4 (I) снижает репродукцию вируса более чем па 2,0 Ig ТЦДбо/О, в концентрации 800, 40 мкг/мл и в концентрации 200,100 мкг/мл - на 1,0-0,8 Ig. Второе соединение хлоргидрат-3-окси-1,3-дйметил-6-(л-Р-фенил) пиперидоиа-4 (П) снижает титр репродуцированного вируса на 1,8 Ig в концентрации 800 мкг/мл, на 1,0-0,8 Ig ТЦД5о/0,1 в концентрации 400-100 мкг/мл. Таким образом, для обоих препаратов максимально действующая концентрация равна 800 Л1кг/мл, а минимально действующая - 100 мкг/мл. Оба препарата снижают репродукцию аденовируса 3 типа на 2,0-2,8 Ig ТЦД5о/0,1. В то же время препараты не обладают ни вирулицидным, ни профилактическим действием, а на стадии адсорбции снижают на 0,5- 0,8 Ig ТЦД5о/0,1 титр вируса. Предмет изобретения Применение 3-окси-1,3-диметил-6-арилпиперидонов-4 общей формулы где Аг - арильный радикал, содержащий в О-, м- и л-положениях галоид, алкильные и алкоксильные группы, в качестве ингибитора вирусов.