Способ количественного определения олсандрина в листьях олсандра кавказского Советский патент 1974 года по МПК G01N33/00 

1

Изобретение относится к области медицины, а именно к способам получения лекарственных препаратов.

Известен способ количественного определения олеандрина в листьях олеандра кавказского путем хроматографирования гликозидов олеандра в тонком слое кизельгура с помощью подвижной фазы (смеси этилацетата и хлороформа) с последующим колориметрированием. Для колориметрического определения кардиотонических гликозидов может быть использован 2,4-динитродифенилсульфон.

Однако такой способ не обеспечивает высокой точности определения.

С целью устранения указанного недостатка по предложенному способу хроматографирование проводят с помощью этилацетата, насыщенного водой, на силикагеле КСКПример. 10 г измельченного сырья помещают в колбу емкостью 250 мл, заливают 100 мл 25%-ного спирта и встряхивают в течение 3 час. Жидкость отфильтровывают через бумажный фильтр.

На пластинку с тонким слоем сорбента наносят сплошной полосой (длиной 5-6 см) 0,15-0,18 мл фильтрата; одновременно в контрольную точку наносят 0,05 мл стандартного раствора олеандрина, используемого в качестве «свидетеля. Пластинку хроматографируют восходящим методом, используя в качестве подвижной фазы этилацетат, насыщенный водой. Затем ее вынимают, подсушивают на воздухе в течение 15-20 мин, сушат в сушильном шкафу 20 мин при температуре 120°С и просматривают в ультрафиолетовом свете. По контрольному пятну олеандрина с Rf 0,50-0,60 отмечают его зону на испытуемой полосе адсорбента, которую затем осторожно соскабливают и переносят в стеклянную колонку. Олеандрин из колонки элюируют 15 мл 95%-ного спирта в круглодонную колбу со шлифом емкостью 50 мл. Спирт отгоняют досуха под вакуумом при температуре бани около 60°С и полученный сухой остаток растворяют в 2 мл

95%-ного спирта.

10 мг олеандрина - стандарта растворяют в 95%-ном спирте в мерной колбе емкостью 25 мл и затем на стартовую линию пластинки наносят сплошной полосой (длиной 4-5 см)

0,08-0,10 мл этого раствора и хроматографируют. Светящуюся зону адсорбента, соответствующую олеандрину, осторожно соскабливают в стеклянную колонку и элюируют, сухой остаток растворяют в 2 мл 25%-ного спирта (стандартный раствор).

В колбу к исследуемому или стандартному раствору прибавляют (к каждому) по 2,5 мл раствора 2,4-динитродифенилсульфона и 0,5мл 0,15 н. раствора едкого кали. Раствор перемешивают и определяют оптическую плотность

tOMHO через 7 мин после добавления щелочи на фотоэлектроколориметре при длине волны 590-600 им в кювете с толщиной слоя 1 см против контрольного раствора, который готовят смещиванием 4 мл 95%-ного спирта, 5 мл 0,075%-ного спиртового раствора 2,4-динитродифенилсульфона и 1 мл 0,15 н. раствора едкого кали. Измерение повторяют и по средней величине оптической плотности вычисляют процентное содержание олеандрина в сырье.

Предмет изобретения

Способ количественного определения олеандрина в листьях олеандра кавказского путем хроматографирования гликозидов олеандра с последующим колориметрированием, отличающийся тем, что, с целью повыщения точности определения, хроматографирование проводят с помощью этилацетата, насыщенного водой, на силикагеле КСК.