Способ определения жирных кислот с сопряженными двойными связями в жире молока Советский патент 1975 года по МПК G01N33/04 

1

Изобретение относится к молочной промышленности.

Известен способ определения жирных кислот с сопряженными двойными связями в жире молока, который заключается в измерении оптической плотности раствора жира в п-гексане на спектрофотометре СФ-4 и последующем расчете тетра-, три- и диеновых кислот. Однако этот способ предусматривает выделение из молока сливок и выделение из последних жира с последующим абсолютным обезвоживанием его путем фильтрации через сернокислый натр.

После нахождения оптической плотности на спектрофотометре расчетным путем определяют содержание кислот в жире. Продолжительность подготовки пробы по известному способу составляет 40 час, что является существенным его недостатком.

С целью упрощения процесса, по предлагаемому способу гексановый раствор жира получают путем добавления в пробу молока 1 мл 10%-ного раствора аммиака, 5 мл смеси Дуола (смесь изопропилового спирта, гексана и 1Н серной кислоты в соотношении 40: 10: 1) и 4 мл гексана, перемешивания смеси и отбора полученного гексанового раствора жира после расслаивания смеси.

Предлагаемый способ заключается в следующем.

В пробу молока (5 мл) добавляют 1 мл 10%-ного раствора аммиака, 5 мл смеси Доула (указанного выше состава) и 5 мл гексана и все перемешивают. После расслаивания смеси отбирают верхний слой гексана с экстрагированным в нем жиром. Экстракцию проводят трехкратно. Все три дозы отобранного экстракта сливают вместе и доводят гексаном до заданной концентрации, при которой оптическая плотность измеряемых растворов находится в пределе 0,2-0,8.

На спектрофотометре, например, СФ-4 измеряют оптическую плотность раствора жира.

Получив данные оптической плотности растворов жира, рассчитывают содержание тетра,три- и диеновых кислот.

Пример. В исследуемой пробе молока определяют содержание жира. Оно составляет 3,50/0.

В пробирку с притертой пробкой вливают 5 мл пробы молока и 1 мл 10%-ного раствора аммиака. Все тщательно перемещивают путем десятикратного перевертывания. Через 30 мин смесь расслоилась.

Затем отбирают верхний слой гексана с экстрагированным в нем жиром. Количество экстракта равно примерно 3-3,5 мл. Для повторной экстракции добавляют 4 мл гексана и отстоявщийся слой (3-3,5 мл) опять собирают в градуированную пробирку, в которую

был помещен первый экстракт. Так же проводят третью экстракцию и собирают 3-3,5 мл отстоявшегося гексана. Всего собирают около 10 мл гексана. Раствор доводят до 10 мл гексана. Затем в полученном растворе жира в гексане рассчитывают содержание его в граммах на 10 мл гексана. Концентрация жира в 10 мл гексана из 5 мл молока (при содержании жира 3,5%) составляет 0,175 г; следовательно, в 100 мл гексана концентрация - 1,75 г. Данный раствор используют для определения содержания тетраеновых кислот. Оптическая плотность данного раствора при длипе волны 301 нм составляет 0,204.

Содержание тетраеновых кислот в жире определяют путем следующего расчета:

4,09 мг. о/о 1,75-2850 Для определения количества триеновых кис- 20 лот 1 мл исходного раствора смешивают с 4 мл гексана. Таким образом получают раствор жира в гексане концентрацией 0,35 г в 100 мл. Оптическая плотность данного раствора при длине волны 268 нм составляет 25 0,296. Содержание триеновых кислот в жире определяют следующим образом: 0.296.100.1000 ,/ 0,35.1930 Для определения количества диеновых кислот 0,5 мл предыдущего раствора смешивают с 4,5 мл гексана. Получают раствор жира в гексане концентрацией 0,035 г в 100 мл. Оп- 35 тическая плотность данного раствора при длине волны 232 нм составляет 0,490.

Содержание диеновых кислот в жире ляют путем следующего расчета:

0,490.100.1000

: 1176мг %.

0,035.1190

В результате анализа жира, выделенного из молока и исследованного описываемым способом, было определено содержание конъюгированных кислот в следующих количествах:

навеска 0,03517 г в 100 мл гексана, оптическая плотность при 232 нм равна 0,494, количество диеновых кислот 1180 мг %; навеска 0,3498 г в 100 мл гексана, оптическая плотность при 268 пм равна 0,298, количество

триеновых кислот 44,1 мг %; навеска 2,0344 г в 100 мл гексана, оптическая плотность при 301 пм равна 0,239; количество тетраеновых кислот 4,12 мг %. Предмет изобретения Способ определения жирных кислот с сопряженными двойными связями в жире молока, предусматривающий получепие гексапового раствора жира, и последующее спектрофотометрическое измерение оптической плотности полученных растворов и расчет тетра-, три- и диеновых кислот, отличающийся тем, что, с целью упрощения процесса, гексановый раствор жира получают путем добавления в пробу молока 1 мл 10%-ного раствора аммиака, 5 мл смеси Доула (смесь изопропилового спирта, гексана и Ш серной кислоты в соотношении 40 : 10 : 1) и 4 мл гексана, перемешивания смеси и отбора полученного гексанового раствора жира после расслаивания смеси.