Способ получения меченного тритием гуанизин-5-триофосфата Советский патент 1976 года по МПК C07H19/20 C07B23/00 

дород путем трехкратного изотопного уравновешивания с водой. Сухой остаток после отгонки последней порции воды растворяют в 15 мл дистиллированной воды и наносят на колонку, содержащую дауэкс 1x8 в формиатовой форме (1,0x15 см). Колонку про мывают 150 мл дистиллированной воды, при этом выходит четкий пик гуанина-8 (Т). За тем при элюции 150 мл 0,25 н, муравьино кислоты выходит четкий пик гуанозина-8( Т). Далее выделяют 8-бромгуанозин-Т ( Q ), используя для элюции 2,2 н. муравьиную кислоту. Получают 1Отпс гуанина-8 (Т) с удельной активностью 3,65 кюри/ммоль, 146fnc гуанозина-8( Т) с удельной активностью 6,7 кюри/ммоль и 8 тс 8-бромгуанозина-Т( G ) с удельной активностью 0,3 кюри/ммэль. Полученный препарат гуанозина-8(Т) концентрируют при помощи активированного угля типа Норит и фосфорилируют, используя 1,0 мл стандартного ферментного раствора, до гуанозин-5 -трифосфата-8 (Т). Продукты фосфорилирования разделяют ионообменной хроматографией на колонке (ЗхЗО см) с ДЭАЭ- целлюлозой А-25 в бикарбонатной форме (Зх хЗО см). Для элюции применяют линейный градиент триэтиламмонийбикарбонатного буфера рН 8,6 (от 0,2 М до 0,6 М), Фракции собирают, обессоливают при помощи сефадекса КМ-25 в Н -форме и концентрируют в вакууме, получают 5 О тле гуанозин-5 -трифосфата-8 (Т) с удельной активностью 4,6 кюри/ммоль. Теоретически по приведенной ниже формуле удельная активность препарата должна составить 4,1 кюри/ммоль. 2.9,2 где уд теоретически достижимая активность маркируемого соединения в данньйс экспериментальных условиях, кюри/ммоль; 29,2- коэффициент пересчета удельной активности, кюри/ммоль; Т - количество трития в исходном газе, ммоль; Н - количество водорода в исход-ном , ммоль; - количество водорода в лабильных положениях маркируемого соединения, ммоль; М - исходное количество бромгуанозина, ммоль; и 6 - число атомов водорода в лабильных положениях молекул 8-бромгуанозина; 100 -количество водорода, содержащегося в катализаторе, способного к изотопному уравновешиванию с тритием, ммоль; GT - количество катализатора., мг. Полученный препарат гуанозин-5-трифосфат-8-(Т) хроматографически однороден и радиохимически чист. Формула изобретения Способ получения меченного тритием гуанозин-5 -трифосфата обработкой адсорбированного на палладиевом катализаторе 8-бромгуанозина газообразным тритием, выделением меченного тритием гуанозина-8(Т) с последующей радиохимической очисткой последнего, совмещенной с биохимическим фосфорилированием, отличающийся тем, что, с целью повышения удельной активности и радиохимической чистоты целевого продукта, обработку 8-бромгуанозина тритием проводят при 50-150ОС.