(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МЕЧЕННЫХ ТРИТИЕМ НУКЛЕОЗИД-5 -ТРИФОСФ АТОВ акции продукты десорбируют скатализатор 100 мл 10%-ноге водного пиридина и лабильный тритий замещают на водород путе трехкратного изотопного уравновешивания с водой. Сухой остаток после отгонки последней порции воды растворяют в 15 мл дистиллированной воды и наносят на колонну, содержащую дауэкс 1x8 в формиатной форме {1,2х2О,О см). Колонну промывают 150 мл дистиллированной воды, при это выходит четкий пик цитидина-5(Т). Затем при элюации 15О мл 0,25 н.муравьиной кислоты выходит четкий пик цитидин-5-монофосфата-5(Т). Далее выделяют 5-бром-цитидин-5 -монофосфат-Т( G ), используя для элюации 2, 2 н. муравьиную кислоту. 11итидин-5(Т) концентрируют в вакууме при 37°С. Цитидин-5-монофосфат-5(Т кднцентрируют с помощью активированного угля, в опыте получают 31тс цитидина -/т-.„-, л КЮРИ -51Т; с удельной активностью 7,4 ммоль 113 тс циТидин-5 -монофосфата-5(Т) с удельной активностью 5,86 - -ммоль9 тс 5-бром-цитидин-5 -монофосфата-Т( Q ) с удельной активностью 0,2 ммоль Полученный препарат цитидин-5 -монофосфата-5 (Т) фосфорилируют, используя 1,0 мл стандартного ферментного растворф до цитидин-5-трифосфата-5(Т). Продукты фосфорилирования разделяют ионообменной хроматографией на колонке (3,0x30 см) с ДЭАЭ-целлюлозой А-25 в бикарбонатной форме. Для элюации применяют линейный градиент триэтиламмонийбикарбонатного буфера рН 8,6 (0,1-О,6 м).. Соответствующие фракции собирают, обессоливают при помощи сефадекса КМ-25 в H-форме и концентрируют в вакууме. Получают 86тпс цитидин-5-трифос та-5( Т) с удельной акн тивностью 4,12 ;1„°., . Теоретически, по формуле, удельная активность препарата должна составить 4,7 ,2 ,.„..„. уд - теоретически достигаемая удельная активность маркируемого соединения в данных экспериментальных условиях, кюри/ммопь; Т - количество трития в исходном газе, ммоль; Н - количество водорода в исход-i ном газе, ммоль; М - исходное количество 5-бромцитидин-5-монофосфата, ммоль; число атомов водорода в лабильных положениях молекулы 5-бромщ1тидин-5-монофосфата ; G - количество катализатора, мг. Полученный препарат цитиди№-5-трифос фата-5(Т) хроматографически однороден и радиохимически чист. рмула изобретени Способ получения меченных тритием нгук еозид-5 -трифосфатов обработкой адсорби- рованного на палладиевом катализаторе соответствующего бромпроизводного нуклеозид-5 -монофосфата газообразным тритием, ыделением меченного тритием нуклеозид5 -монофосфата и его биохимическим фос- орилированием, совмещенным с радиохими еской очисткой, отличающийся ем, что, с целью повышения удельной акивности и радиохимической чистоты целеого продукта, обработку бромпроизводного уклеозид-5 -монофосфата тритием проводят ри 50-150ОС.
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
Способ получения меченного тритием гуанизин-5-триофосфата | 1973 |
|
SU461622A1 |
Способ получения меченного тритием гуанозин-5-трифосфата | 1971 |
|
SU404348A1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МЕЧЕННЫХ ТРИТИЕМНУКЛЕОЗи | 1969 |
|
SU250147A1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МЕЧЕННЫХ ТРИТИЕМ 2`-ДЕЗОКСИУРИДИНОВ | 1980 |
|
SU915444A1 |
Способ получения меченных тритием D, L-аминокислот | 1977 |
|
SU677229A1 |
Способ получения меченных тритием DL-аминокислот | 1976 |
|
SU611412A1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МЕЧЕННЫХ ТРИТИЕМ СОЕДИНЕНИЙ, ВЫБРАННЫХ ИЗ КЛАССОВ АМИНОКИСЛОТ, АМИНОВ, АМИНОСАХАРОВ, САХАРОВ, ПУРИНОВЫХ И ПИРИМИДИНОВЫХ ОСНОВАНИЙ И НУКЛЕОЗИДОВ, КАРБОНОВЫХ КИСЛОТ, АЗОТСОДЕРЖАЩИХ ПРОИЗВОДНЫХ ТЕТРАГИДРОТИОФЕНА | 1987 |
|
SU1774613A1 |
СПОСОБЫ РАЗДЕЛЕНИЯ СМЕСИ ЭНАНТИОМЕРОВ | 1992 |
|
RU2235724C2 |
Равномерномеченный дейтерием и тритием 3-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин | 2014 |
|
RU2620190C2 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ (МЕТИЛ- H)ТИМИДИНА | 1983 |
|
SU1127280A3 |
Авторы
Даты
1976-10-25—Публикация
1973-07-13—Подача