Способ получения гормона роста из гипофизов человека Советский патент 1975 года по МПК A61K38/27 

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГОРМОПА РОСТА центрифугированием и смешивают с 20ОО мл постепенно добавляемой дистиллированной воды, а затем центрифугируют 45 ыин при 6000 об/м и центрифугат отбрасывают. Промывку повторяют, уменьшая количество воды до 1500 мл. Промытый осадок сырца СТГ суспендируют в 450 мл воды и к суспензии добавляют при перемешивании 5О мл М КОН При этом осадок дол)ен полностью раствориться, в противном случае количество добавляемой шелочи немного увеличивают. Раствор сразу же затем начинают подкислять, приливая понемногу 2М уксусную кислоту до рН 8,0 - 8,2. При этом рН и температуре 37-39 С слегка мутный раствор медленно перемешивают в течение 1,5 ч, а затем продолжают подкислять уже без подогрева до РН 4,8 - 5,2s проверяя полноту образования осадка. Смесь выдерживают 2-3 ч при 4 - 8 С и центрифугируют. Осадок переосаждают из 4ОП мл водного раствора (рН 8,0 - 8,2)s повторяя пош исление до рН 4,8 - 5,2 . Центрифугаты от основного осаждения и переосаждения осадка объединяют и после нейтрализации диализируют против нескольких смен дистиллированной воды в течение 10-12 ч. Диализат, который должен быть абсолютно прозрачным, охлаждают и медлен но смешивают при интенсивном охлаждении с равным объемом постепенно добавляемого холодного эа илового спирта. Через 1 ч добавление спирта заканчивают, однако, размешивание продолжают на холоду еще ЗО м и смесь выдерживают в холодильнике до пол ного формирования осадка, Образовавшийся осадок высокоактивного, низкомолекулярного СТГ собирают центрифугированием при охлаждении, промывают холодным спиртом, а затем ацетоном и досушивают в вакуумэксикаторе. Выделение СТГ спиртом можно заменить лиофилизацией, подвергнутого стерильной фильтрации диализата. Выход готового препарата СТГ составляет в среднем до 49о от веса гипофизарного высушенного ацетоном порошка при условии, если гипофизы были свежими и хранились в высушенном состоянии в холодильнике в гермеа-цческой упаковке не более 6 месяцев. Выход из замороженных гипофизов до 8%. Формула изобретения Способ,получения гормона роста путем экстракции измельченного гипо4)иза человека уксусной кислотой, освобождения экстракта от примесей и выделения целевого продукта из фильтрата, отли чаюшийс я тем, что, с целью упрощения способа и повы1иения слепени чистоть целевого продукта, экстракцию осуществляют разбавленной уксусной кислотой, например 2М, при 40-43 С; а очистку проводят осаждением сырца гормона суль4)атом аммония при 1,82,2% насышения, промывкой сырца дистиллированной водой, растворением в 0,15- 0,2 М щелочи, например едком кали, подкислением раствора до рН 8,0-8,2, размешиванием при 37-3 9°С в течение приблизительно 1,5 ч, дальнейшим подкислением до рН - .,