Способ подготовки хвои для микроскопического исследования устьиц Советский патент 1976 года по МПК A01G7/00 

Изобретение относится к вопросам общей ботаники, в частности к физиологии растений, и может быть использовано для подготовки хвои для микросколического исследования устьиц на поверхности эпидермы.

Известен способ подготовки хвои для микроскопического исследования устьиц, .включающий химическую обработку хвои перед исследованием.

Недостатком известного способа является то, что он «е обеспечивает целостного микроскопического изображения характера распределения устьиц по всей поверхности определенного участка хвои.

Цель изобретения-сохранение целостности эпидермы хвои для получения обзорного качественного .микроскопического изображения.

Для этого по предлагаемому способу из целых «усочков хвои экстрагируют хлорофилл 96° спиртом, затем в течение суток окрашивают кусочки хвои в 70° спиртовом растворе акридинового оранжевого коицентрации 1:200 и исследуют устьица на люминесцентном микроскОПе в отраженном фиолетовом свете.

Способ осуществляют следующим образом.

Для исследования берут как свежую хвою, так и фиксированную в этиловом спирте или формалине. У хвоинок вырезают участки длиной 4 мм. Полученные кусочки хвои погружают в 96° этиловый спирт для экстрагирования хлорофилла. Продолжительность полного экстрагироваиия 1-2 суток в зависимости от размеров хвои и способа ее предшествующей фиксации. Затем кусочки хвои окрашивают

70° спиртовым раствором акридинового оранжевого концентрации 1 :200 в течение суток. Экстрагирование хлорофилла и окрашивание хвои производят в небольших стеклянных бюксах с притертой пробкой. Окрашенные кусочки хвои помещают на предметное стекло и несколько раз промывают их из пипетки 70° спиртом, затем на них наносят 1-2 капли глицерина и покрывают покровным стеклом.

Изучение устьиц производят на люминесцентном .микроскопе в отраженном свете с применением фиолетового «возбуждающего и желто-зеленого «запирающего светофильтров.

Способ подготовки хвои для микроскопического исследования устьиц может получить широкое распространение в ботанических и селекционных учреждениях при ранней диагностике видов, сортов и полиплоидов хвойных

растений.

Формула изобретения

Способ подготовки хвои для микроскопического исследования устьиц, включающий химическую обработку хвои перед исследован и3ем, отличающийся тем, что, с целью сохранения целостности эпидермы хвои для получения обзорного качественного микроскопичеокого изображения, из делых кусочков хвои экстрагируют хлорофилл 96° спиртом, затем5 4 в течение суток окрашивают кусоЧКИ хвои в 70° спиртовом растворе акридинового оранжевого концентрации 1:200 и исследуют устьи-ца на люминесцент1ном микроскопе в отражен«ом фиолетовом свете.