Способ количественного определения продуктов деградации фибриногена и фибрина в моче Советский патент 1976 года по МПК G01N33/16 

гируют IS мин при 25ОО об/мии. Измеряют объем надосадочной жидкости и опр&.деляют задержку полимеризации мономерного фибрина продуктами деградации полученной фракции белков мочи. Таким образом из 100 мл мочи получают 2 мл белковой фракции. Для определения задержкой полимеризации 0,1 мл 0,5%-н го раствора мономерного фибрина вносят в смесь,содержащую 1,6 мл; 0,063 М фос- фатного буфера рН 7,5, Oil мл соевого ингибитора трипсина (8,5 мг растворяют в 5 мл этого же буфера), 0,1 мл белковой фракции и ОЛ мл 1,81О М хлористого .кальция. Регистрируют время полимеризаций секундомером, и, если время полимеризадии выше 15 мин, товьщелейную ГЩФ-фрак цию белков перед внесением разбавляют Перед этим определяют время полимеризаци в контроле (вместо белковой фракции вносят буфер), которое в этом примере 93 се После внесения в опытную смесь О,1 мл разбавленной в 4 раза фракции белков время поли1иеризации мономерного фибрина 372 сек. Из этих данных рассчитывают эффект то можения по формуле: t - где: t - время полимеризации мономерного фибрина в исследуемой пробе: t-Q - Б .контроле; п. - эффект торможения полимеризации, В приведенном примере fl j З.По калибровочной кривой зависимости эффекта торможения полимеризации мономегиого фибрина от концентрации продуктов деградации ибриногена (фибрина) определяют весовое количество Т1ДФ в пробе. Расчет проводят по формуле:a-V-R --1/7где: С - количество продуктов деградации в исследуемой моче, мг/1ОО мл, d количество продуктов деградации в пробе, определенное по калибровочной кривой, мг/мл; V - объем выделенной белковой фракций, МЛ в - разведение белковой фракции, для внесения в пробу;: j - объем белковой фракции, вынесенной в пробу мономерного фибрина, мл. Ф о р мула изобретения Способ количественного определетгия про-;дуктов деградации фибриногена и фибрина в моче, включающий выделение белков и их последующую обработку, отличающийся тем, что, с целью упрощения диагностики почечных заболеваний, получ«1ной белковой фракцией воздейств)гют на мономерный фябран в присутствии фосфатного буфера, соевого ингибитора, трипсина и хло4 ристого кальция, а количество продуктов деградации фибриногена и фибрина опреде,ляют по увеличению :времени полимеризации мшомерного фибрина.