Способ определения форм растений Советский патент 1976 года по МПК A01H1/04 

1

Изобретение относится к биохимическому анализу белков для определения форм растений путем диск-электрофореза в гелевом носителе и может быть использовано в сельскохозяйственной и лесной селекции.

Известны способы биохимического определения сортовой принадлежности по электрофоретическим спектрам белков в гелевом носителе с последующим сравнением электрофореграмм испытуемых и эталонных образцов. Такие способы основаны на анализе отдельных фракций белков, преимущественно спирторастворимых, с использованием крахмального геля.

Анализ спирторастворимых фракций белков (глиадинов) имеет существенное значение в основном только для пшениц. Продолжительность анализа указанного метода составляет 6-8 час и требуется приготовление вытяжек спирторастворимых белков. Кроме того, крахмальный гель обладает плохой воспроизводимостью и малой разрешающей способностью.

Цель изобретения - повышение разрешающей способности, сокращение продолжительности и упрощение процесса.

Поставленная цель достигается тем, что диок-электрофорезу подвергают суспензию муки в ТуО«с-глициновом буфере. Способ основан на том, что каталитически активные

белки в большинстве своем относятся к легкорастворимым кислым белкам (70-80% общей суммы белков) и являются самыми многокомпонентными.

Электрофорез суспензии муки проводят в полиакриламидном геле в виде стержня предпочтительно длиной 100 и диаметром 6 мм при градиенте напряжения 60 В/см, плотности тока 18 мА/см в течение 1 час.

На фиг. 1 приведены схемы электрофореграмм различных видов растений.

Из приведенного видно, что каждый вид имеет определенный электрофоретический спектр белков наряду с видовыми признаками имеются признаки, общие для семейства. Так, семейство зерновых (рожь, пшеница, ячмень) имеет общие диски с Ri 0,06+0,02; 0,12; 0,25+0,02; 0,37; 0,43+0,02. Семейство бобовых (бобы, вика, горох) имеет общие диски

с Rf 0,31; 0,35+0,02; семейство сосновых (сосна, кедр)-0,07, 0,27+0,02, 0,33. Для сравнения приведена схема электрофоретического спектра яблони.

Проведенные исследования показали, что

способ диск-электрофореза суспензии муки позволяет решать ряд практических задач селекции и семеноводства сельскохозяйственных растений, в том числе проводить идентификацию сортов; устанавливать практическое

наличие гибридного материала в Р (по зерну); устанавливать доминантность сорта при скрещивании, характер наследования свойств родительских форм гибридами; устанавливать наличие мутантных форм.

В связи с тем, что диск-электрофорезу подвергают суспензию муки, практически исключены потери материала при переносе, благодаря чему способ позволяет использовать малые количества испытуемого материала при хорошей воспроизводимости, быстроте и простоте выполнения анализа.

Пример. Определение формы растения.

На фиг. 2 приведены электрофорет1ические спектры известных Сортов ржи и пеизвестного (X).

Для идентификации неизвестного образования озимой ржи составляют атлас электрофоретичесюпх спектров известных сортов ржи.

Затем готовят суспензию муки из зерна неизвестного сорта и подвергают ее электрофорезу в цилиндрах нолиакриламидного геля, имеющих длину 100 и диаметр 6 мм, при

градиенте напряжения 60 В/см и плотности тока 18 мА/см в течение 1 час. Полученные электрофоретические спектры суммарного белка сопоставляют с электрофоретическими спектрами белков известных сортов.

Неизвестный сорт является гибридом Вятки 2 и Харьковской 60.

Формула изобретения

1.Способ определения форм растений, включающий диск-электрофорез белков в гелевом носителе и сравнение электрофоретических спектров испытуемых и эталонных образцов, отличающийся тем, что, с целью повышения разрешающей способности, сокращения продолжительности и упрощения процесса, диск-элео ;трофорезу подвергают суспензию муки в г/г7ыс-глициновом буфере.

2.Способ по п. 1, отличающийся тем, что гелевый носитель - полиакриламидный гель используют в виде стержня.

D,0

ffSjiOHJiffedp Приея1/л1,с/1ол Sxm/fffl /rcffcme fi/Spu f af 2