Способ приготовления антитоксического эритроцитарного диагностикума Советский патент 1977 года по МПК A61K35/18 

(54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ АНТИТОКСИЧЕСКОГО ЭРИТРОЦИТАРНОГО ДИАГНОСТИКУМА

1

Изобретение относится к медицине, а именно к производству диагпостикумов.

Известен способ приготовления эритроцитарных диагностикумов, заключающийся в том, что формалинизированные эритроциты стандартизируют путем приготовления 2,5%ной клеточной взвеси, тонизируют в течение 10 мин и сенсибилизируют в течение 30 мин (сенсибилизирующую зону антигена берут стандартную - 1 объем антигена на 5 объемов клеточной взвеси). Клетки отмывают в 2 объемах нормальной сыворотки кролика (1 : 200) и взвешивают для стабильности в объеме нормальной кроличьей сыворотки того же разведения.

Известен также способ приготовления антитоксического эритроцитарного днагностикума, при котором эритроциты дефибринируют, фильтруют, отмывают, ресуспендируют, вновь фильтруют и отмывают, тонизируют (1 : 20000) в течение 15-30 мин, отмывают, сенсибилизируют в течение 2 час варьирующей дозой концентрированного анатоксина (300-1500 ЕС или ЛФ), добавляют 40%-ный формалин с рН 7,2, отмывают, ресуспендируют физиологическим раствором с нормальной кроличьей сывороткой, а затем консервируют 40%-ным формалином.

Однако известные способы не обеспечивают высокой специфичности препарата.

С целью повыщения специфичности препарата сенсибилизацию эритроцитов осуществляют в течение 19-20 час из раствора, содержащего в 1 мл дозу анатоксина, достаточную для приготовления 0,8-1,2 мл диагностикума, и весь процесс проводят в солевой среде.

Способ осуществляют следующим образом. Эритроциты дефибринируют в стерильных условиях в течение 10 мин путем встряхивания со стеклянными бусами, фильтруют, отмывают 1/75 М буфером с рН 7,1-7,2, ресуспендируют 1/30 М буфером до 11 - 13%-ного содержания эритроцитов. Формалинизацию ведут 35-40%-ным формалином, нейтрализованным едким калием при рН 7,2, в соотнощении 4 : 1 при комнатной температуре в течение 16 час. Формалинизированные эритроциты фильтруют, отмывают, ресуспендируют 1/15 М буфером с рН 7,2 до 2,5%-ной концентрации, добавляют в соотнощениц 1 : 1 танин, разведенный тем же буфером (1:40000), и

тонизируют в течение 9-10 мин при комнатной температуре. Затем тонизированные эритроциты вновь отмывают, ресуспендируют 1/15 М буфером с рН 6,4 до 2,5%-ной конценграции, добавляют в соотношении 1 : 1 анатоксин, разведенный тем же буфером до содержания анатоксина, достаточного для приготовления 1 мл диагностикума, и сенсибилизируют в течение 19-20 час при 37°С. Сенсибилизацию прекращают 0,4%-иым формалином, разведенным 1/15 М буфером при рН 6,4, через 50-60 мин эритроциты двалады отмывают от избытка анатоксина 1/30 М буфером с рН 7,2 и ресуспендируют до 2,5%-ной концентрации 1/15 М буфером, содержащим 0,4% формалина.

Весь процесс получения эритроцитарного диагностикума ведут в фсфатном буферном растворе, содержащем 0,85% хлористого натрия.

Препарат хранят ири температуре . Замораживание не допускается. Срок годности препарата не менее 3 лет.

Формула изобретения

Способ приготовления антитоксического эритроцитарного диагностикума путем сенсибилизации анатоксином танизированных эритроцитов с последующей формалинизацией, отличающийся тем, что, с целью повыщения специфичности препарата, сенсибилизацию осуществляют в течение 19-20 час из раствора, содержащего в 1 мл дозу анатоксина, достаточную для приготовления 0,8-1,2мл диагностикума, и весь процесс проводят в солевой среде.