Способ получения модели клеточной мембраны Советский патент 1977 года по МПК G09B23/38 

1

Изобретение относится к учебным моделям, а точнее к способам получения моделей клеточных мембран.

Известен способ получения модели клеточной мембраны, например, бимолекулярных фосфолипидных мембран (БФМ), заключающийся в нанесении фосфолинидной смеси в водном растворе КС1 на отверстие в тефлоновом наконечнике (1).

Таким способом нельзя получить мембраны с ионной проницаемостью, близкой к проницаемости реальных мембран и малых размеров.

Предложенный способ не имеет этих недостатков и отличается от известного тем, что к фосфолипидной смеси добавляют белок-цитохром «с, а тефлоновый наконечник устанавливают на шприц и выдувают пленку сферической формы.

Предлагаемую модель получают из белково-фосфолипидного комплекса. При этом используют общие фосфолипиды, полученные из мозга быка и белок-цитохром «с.

Берут цитохром «с из сердца лошади, фирмы «Реанал. Препарат предварительно восстанавливают аскорбатом и дополнительно очищают гель-фильтрацией на колонке с сефадексом С-75 и с целлюлозой ДЕ-32, собирая центральные окрашенные фракции. Опыты с высокоочищенным цитохромом «с из коры надпочечников дали аналогичные результаты.

Берут белково-фосфолипидный комплекс 1:10. Растворы фосфолипидов в н-гептане (в концентрации 80 мг/мл) и белка в фосфатном буфере (концентрация белков 1-5Х10 м), встряхивают в течение 3-5 мин. Полученную смесь оставляют в холодильнике на 2-3 час. За это время происходит полное отслаивание

водной и гидрофобной фаз, причем, по крайней мере, часть переходит в гидрофобную фазу за счет образования комплекса с фосфолинидами.

Берут каплю смеси белок-фосфолипид и наносят на отверстие в тефлоновом наконечнике, погруженном в раствор в кювете (0,1 М КС1). Паконечник устанавливают на шприц. При помощи шприца из отверстия выдувают сферическую мембрану.

При онисанном способе мембраны обладают следующими преимуществами перед БФМ:

1)наличие сферической формы и больших размеров (от 9 до 12 мм), что дает возможность точнее исследовать проницаемость ионов, чем на модели БФМ.

2)проницаемость названных мембран практически равна проницаемости клеточных.

3)палпчие белково-фосфолипидпого комплекса структурно приближает их к биологической поверхности клетки. 34

Формула изобретениясти, к фосфолипидной смеси добавляют белокСпособ получения модели клеточной мем-навливают на шнриц и выдувают пленку сфебраны путем нанесения фосфолипидной смесирической формы.

в водном растворе КС1 на отверстие в тефло-5 Источники информации, принятые во вниновом наконечнике, отличающийся тем,мание при экспертизе:

что, с целью приближения свойств мембраны«I. Physical chemistry, v. 67, 1963, p. 534

к реальным и улучшения ионной проницаемо-(прототип).

553653

цитохром «,с, а тефлоновый наконечник уста