Изобретение относится к производству ветеринарных биологических препаратов и представляет собой, новый штамм Leptospira tanicola, используемый для приготовления вакцин против лептоспироэа сельскохозяйственных и промысловых животных.
Высокая иммуногенная активность штамлов лептоспир, из которых изготавливается вакцина, является одним из основных условий, обеспечивающих получение активной вакцины против лептоспироза животных. В настрящее время в ветеринарной биологической прокьшшеннрсти изготавливают убитую вакцину против лептоспиррза из 24-39 штаммов лептоспир, относящихся к 6 серологическим группеил, в том числе содержащую 4 штамма серологической группы Сапicol а til.
Однако эти штамки имеют низкую иммуногенную активность, получение вакцины трудоемко, так как требует использоваиия баллонного метода выращивания лептоспир.
. Цель изобретения - получение штамма лептоспир серологической группы Сап1 :о1а , обладающего высокоактивными в иммуногенном и антигенном отношении свойствс1ми, который можно
использовать для приготовления поливалентной вакцины против лептоспироза животных.
Штамм Leptospira can со la ВГНКИ-3 выделен от свиньи в Московской области в 1973 году и хранится в коллекции микроорганизмов ВГНКИ ветпрепаратов МСХ СССР под № 3. Штамм Leptospira can I cola ВГНКИ-3 характериoзуется сдедующими признаками.
Морфологические признаки. Обладает характерными для лептоспир морфологическими признакс1ми. При микроскопии в темном поле представляет
5 собой серебристо-белые плотные спирали с утолщениями в виде крючков на крнцах. Витки спирали незаметны при увеличении в 200-400 раз, но хорошо видны в электронный микроскоп.
0 Длина лептоспир 8-17 мк, диаметр 0,1-0,15 мк. Наиболее отчетливо видны лептоспиры при микроскопии в темном поле и менее отчетливо - при фазовр-контрастной микроскопии, не5видимы при обычном освещении, плохо ркрашиваю.тся анилиновыми красками, при импрегнировании серебром становятся темно-коричневыми.
Физиологические свойства. РРСТ
0 на среде, содержащей 4-5% сыворотки
баранов или кроликов с Фосфатнобуферной основой при рН 7,2-7,4. Максимум роста при .2б-27°С. На 510 день роста накопление 10x10 IGtlO лептоспир в 1 мл. В последующие сроки роста происходит лизис бактериальных клеток. В жидкой среде они подвижны, у них характерное быстрое ротационное движение вокруг оси и перемещение без полярной дифференциации.
Антигенные свойства. Штамм Leptospira ВГНКИ-3 сравнивали по , антигенным свойствам со смесью производственных штаммов: Неман, Нимфа, Дания, Собака в опыте на овцах.
Семидневную культуру лептоспир консервировали 0,5% фенола и вводи5 ли овцам внутримышечно в дозе 5,0+ 5,0 мл двукратно с интервалом 7 и 21 день. При этом установили, что антигенные свойства штамма Leptospira la ВГНКИ-3 в 3-4 раза Q выше, чем антигенные свойства сме;си производственных штаммов.
Результаты опыта приведены в табл. 1.
Таблица
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| Штамм LертосрIRа ромоNа ВГНКИ-6 | 1976 |
|
SU555665A1 |
| Способ изготовления вакцины поливалентной против лептоспироза лошадей | 2023 |
|
RU2815538C1 |
| Штамм LертоSрIRа IстеRонаемоVRнаGIаL ВГНКИ-2 | 1976 |
|
SU555807A1 |
| Способ получения поливалентной вакцины против лептоспироза животных | 1975 |
|
SU555664A1 |
| ВАКЦИНА ИНАКТИВИРОВАННАЯ КОМБИНИРОВАННАЯ ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННОГО РИНОТРАХЕИТА, ВИРУСНОЙ ДИАРЕИ И ЛЕПТОСПИРОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА | 2009 |
|
RU2395297C1 |
| ВАКЦИНА ИНАКТИВИРОВАННАЯ КОМБИНИРОВАННАЯ ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННОГО РИНОТРАХЕИТА, ВИРУСНОЙ ДИАРЕИ, РОТА-, КОРОНАВИРУСНОЙ БОЛЕЗНЕЙ И ЛЕПТОСПИРОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА | 2009 |
|
RU2395299C1 |
| ВАКЦИНА ПРОТИВ ЛЕПТОСПИРОЗА ЖИВОТНЫХ | 1990 |
|
RU2030915C1 |
| ВАКЦИНА ПРОТИВ ЧУМЫ, АДЕНОВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ, ПАРВОВИРУСНОГО И КОРОНАВИРУСНОГО ЭНТЕРИТОВ, ЛЕПТОСПИРОЗА И БЕШЕНСТВА СОБАК | 2013 |
|
RU2546247C2 |
| Новая поливалентная вакцина против лептоспироза человека и способ её получения | 2021 |
|
RU2753972C1 |
| АССОЦИИРОВАННАЯ ВАКЦИНА ПРОТИВ ЛЕПТОСПИРОЗА И ПАРВОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ СВИНЕЙ | 1987 |
|
SU1538305A1 |
-. Сап col а ВГНКИ-31:120
Смесь: Неман, Ним1:40
фа, Дания, Собака
Антигенные свойства изучали также в опыте накроликах. Семидневную культуру ,лептоспир доводили сывороточной средой до концентрации 75000 лептоспир в 1 мл, консервировали фенолом до 0,5% концентрации и вводили четырем кроликам весом 2,5 кг внутривенно по 1 мл. Через 7, 14, 21 и 28 дней после введения культуры у кроликов брали кровь и исследовали сыворотку в реакции микроагглютинации лизиса. При этом сравниваL. Canicola ВГНКИ-3
Смесь: Неман, Нимфа, Дания, Собака
Как видно из таблиц 1 и 2, штамм Leptospira Canicola ВГНКИ-3 отличается от смеси производственных штаммов более активными антигенными свой-ствами,65
1:640
1:40
1:120
1:10 1:240
1:10
1:40
ли титр антител кроликов, которым вводили культуру штамма Leptospira can col а ВГНКИ-3 и смесь производственных штаммов: Неман, Нимфа, Дания Собака. Установлено, что антигенная активность смеси производственных штаммов в 3-4 раза ниже антигенной активности штамма Leptospira canicola ВГНКИ-3.
Результаты опыта приведены в табл. 2.
Таблица 2.
1:2500+500
1:830+170
1:830+170
1:250+50
Из шести селекционированных штам.мов лептоспир, в том числе Leptospira Canicola .ВГНКИ-3, (были приготовлены опытные серии поливалентной вакцины, иммуногенные свойства которой изучали на сельскохозяйственных животных в сравнении с вакциной, приготовленной из смеси производственных штаммов, Уствновлено, что вакцинаj изготовленная из шести селекционированных штаммов, содержащая в том числе штамм Canicola ВГНКИ создает в 2-5 раз более напряженный иммунитет, чем вакцина, приготовлен нал из смеси производственных штаммов лептоспир. йГспользование предлагаемого ма вместо применяемых в настоящее время.4 штаммов лептоспир дает также возможность заменить при изготовлении вакцины крайне трудоемкий баллонный метод выращивания лептоспир (в 10-12 литровых объемах) реа торным методом,выращивания {в объем 1-2 тыс.л), что значительно упрощает и удешевляет изготовление вакцин Формула изобретения Штамм Leptospira Canicola ВГНКИ-3, используемый для приготовления вакцин, против лептоспироза сельскохозяйственных и промысловых животных. Хранится в коллекции микроорганизмо Всесоюзного государственного научно контрольного института ветеринарных препаратов. Морфологические признаки. При микроскопии в темном поле представл ет, собой серебристо-белые плотные спирали с утолщениями в виде крючков на концах. Витки спирали незаметны при увеличении в 200-400 раз и хорошо видны в электронный ми роскоп. Длина лептоспир 8-17 мк, ди аметр 0,1-0,15 мк. Наиболее--хорошо видны лептоспиры при гликроскопии в темном пол и менее отчетливо при разово-контрастной микроскопии, невидимы при обычном освещении. Плохо окрашиваются анилиновыми красками. При импрегнирований серебром становятся темно-корнчневыми. Физиологические свойства. Растет на среде, содержащей 4-5% сыворотки барабанов или кроликов на фосфатно-буферной основе при рН 7,27,4. Максимум роста при 26-27с. На 5-10 день роста накопление 10x10 16 10 лептоспир в 1 мл,. В последующие сроки роста наступает лизис бактериальных клеток. В ЖИДКОЙ среде клетки очень подвижны, у них характерное быстрое ротационное движение вокруг оси и перемещение без полярг ной дифференциации. Антигенные свойства. Антигенные свойства штамма Canicola ВГНКИ-3 в 3-4 раза выше, чем антигенные свойства смеси производственных шталвюв серогруппы Canicofa: Неман, Нимфа, Дания, Собака (опыты на овцах и кроликах ). Иммуногенная активность. Поливалентная вакцина, изготовленная из данного штамма с использованием пяти других селекционированных штаммов, имела в 2-5 раз выше иммуногенную активность, чем вакцина, приготовленная из 39 -производственных штаммов лептоспир.. Источники информации принятые во внимание при экспертизе 1. Инструкция по изготовлению и контролю поливалентной вакцины против лептоспироза сельскохозяйственных и прокысловых животных. Утверждена Главветупром МСХ СССР 27 мая 1968, с. 6.
