Способ получения концентрата комплекса пектолитических ферментов Советский патент 1977 года по МПК C12D13/10 

Изобретение относится к ферментнсю промышленности, в частности к способу получения концешрата комплекса пектолитических ферментов. Известен способ получения концентрата комплекса пектолити11еских ферметш, предусматриваюший вакуум - выпаривание культуральной жидкости 1. Недостатком такого способа является инактивация ферментов в процессе вакуум - выпаривания. Шлью настоящего изобретения является предотвращение инактивации фермент(Ш в процессе выпаривания. Ддя достижения поставленной цели перед вакуум - выпариванием в культуральную жидкость последсжательно вводят водные растворы сернокислого аммошш, сернокислого алюмииия и фосфорнокислого титана. При этом концентрация сериокислого аммония, Сернокислого алюминня н фосфорнокислого титана в культуральной жидкости соответственно составляет 6-16 г/д;:Л-2 г/л; 0,5-1,0 г/л. Способ получения концентрата комплекса пекто литических фермеров заключается в том, что в раство содержащий комплекс пектолитических ферментов, шпрямер культуральную жидкость, полученную глубинным культивированием плесневых грибов Aspery Нlus nigsr, AspergUtus foctldus последовательно добавляют растворы сульфата аммония, сульфата алюминия и фосфорнокислого титана в тяках. количествах, чтобы содержание указанных веществ соответственно составило 6-16 г/л; 1-2 г/л; 0,5-1 г/л и полученную смесь подвергают вакуум концент{шрованию. Перед концентрированием целесообразно рН смеси установить равным 3-6,5 добавлением цитратного фосфат - цвтратного или ацетатного буфера или раствора аммиака. Предложенный способ поясняется следующим примером. Из культуральной жидкости, полученной при выращивании продуцента пектолитическнх ферментов Aspergfl lus foctidua, удаляют мицелий и определяют aKTHBHOc v4 pMeKEOB. входящих в пектолитнческий комплеЦ. AKTiiBtiOcTb культуральной жидкости (epjwi)-. энДопоЛигалактуроназа зндо-ПГ)10,5

лопи «е1илгалактуроназа(1ШП- 1.6;

экзстолнпшактуро.наэа(экзо-ПГ)- 19,0.

В указанную купьтураньную жидкость добавляют распор сульфата аммония, сульфата алншишш U фосфортсйсислого титана в таком коааекаю, ггобы содержание указанных веществ соспвектвевко составило (г/л): 8,0; 1,2; ОД Затем добавляют цитратно фосфа1ный буфф рН 4,0 и К01ше1гг жруют в 10 раз по o&beii ва вакуум вьшарной устажшке.

Получают концентрат со следующими активностями (ед/мл):

эндо- ПГ-103,0;

,0;

экзо-ПГ-30,0.

Без добавления стяб г -чаароа после вакуум концентрирования получают ксищеитрат, имеюоцй следующие активности:

эндо - ПГ- 34,0 ;

ПМГ-3,2 )

экзо- ПГ-31,0.

Формула изобретения

1.Способ получения концентрата комплекса пектошггических ферментш, предусматриваю1ций вакуум вьшариван 1е культуральной жидкости, отличающийся тем, что, с целью предотвращения инактивации ферментов в прсщессе вьшаривашш, перея вакуум - выпариванием в кулыуральную жидкость последовательно вводят водаые раствсфы с эпсислого аммония, серн(жиспого алюминия и фосф(фиокиспого титана

2.Способ по п. 1, о т л и ч а ю щ и и с я тем, что ковдштрация сернокислого аммония, сернокислого алюмишш и фосфсфнокислого титана в культуральной жидкости соответственно составляет 6-16 г/л; 1-2 г/л; 0,5-1,0 г/л.

Источники инфсфмащщ, щ)нц8гые во внимание при экспертизе:

1. Авторское свидетельство СССР № 521896, ,В 01 pi/00,19.11.74.