Питательная среда для культивирования продуцентов пектолитических ферментов Советский патент 1977 года по МПК C12B3/00 C12D13/10 

1

Изобретение относится к области микробиологии.

Известна питательная среда для культивирования продуцентов пектолитических ферментов, содержащая экстракт свекловичного жома, экстракт солодовых ростков, автолизат мицелия, сернокислый аммоний, однозамещенный фосфорнокислый калий и сернокислый магний. Однако такая питательная среда при выращивании продуцентов пектолитических ферментов имеет невысокую активность глубинной культуры (200-280 ед/мл) i.

С целью поБЫщения выхода пектиназы и интенсификации биосинтеза пектолитических ферментов предлагаемая питательная среда дополнительно содержит соединения титана при следующем соотнощении ко.мпонентов,

%:

вес.

Экстракт свекловичного

жома80-85,05

Экстра-кт солодовых

ростков8,0-10,0

Автолизат мицелия3,0- 4,0

Сернокислый аммоний0,6- 0,7

Однозамещенный фосфорнокислый калий0,05- 0,1

Сернокислый магний0,01- 0,05

Соединения титана0,01-0,1

Из соединений титана используют фосфорнокислый титан и окись титана.

Пример 1. Свекловичный жом в количестве 6 кг заливают 100 л водопроводной воды

и нагревают в течение 2 ч при 125-130°С при постоянном перемещивании. Затем суспензию охлаждают до 45°С и экстракт отделяют от твердой фазы. РН доводят до 4,0 и добавляют ферментный раствор пектиназы в количестве

5 ед/мл экстракта. Ферментативный гидролиз проводят в течение 12 ч при 45°С и рН субстрата 4,0. По истечении указанного выше времени к экстракту добавляют, %; вытяжку из солодовых ростков 10, автолизат мицелия

4,0, сернокислый аммоний 0,7, однозамещенный фосфорнокислый калий 0,1, сернокислый магний 0,05 и фосфорнокислый титан 0,15. Приготовленную питательн ю среду стерилизуют и подают в стерильный ферментер.

На этой среде культивируют продуцент пектиназы. Для этого производят посев водной суспензией спор плесевого гриба Aspergillius awamori, выращенных известны.м способом, в количестве 50 г на 1 м питательной среды.

Добавляют пеногаситель марки АС-50 в количестве 0,01% от объема питательной среды. Культивирование проводят при удельной аэрации 1 . Давление в ферментере 0,2-

0,3 ати. Скорость вращения мешалки 300 об./мин, время культивирования 52 ч. Культуральную жидкость отделяют от биомассы на автоматическом камерном фильтр-прессе. Пектолитическая активность культуральной жидкости составляет 360 ед/мл (иодометрический метод) или 1 ед/мл (интерферометрический метод).

Пример 2. Питательную среду, включающая, %: 85,15 прогидролизованного экстракта свекловичного жома, 10 вытяжки солодовых ростков, 4 автолизата мицелия, 0,7 сернокислого аммония, 0,1 однозамещенного фосфорнокислого калия, 0,5 матния сернокисло-го и 0,08 окиси титана, стерилизуют в установке непрерывного действия и подают в стерильный ферментер. Производят посев водной суспензией спор Aspergillius awamori.

Культивирование проводят при удельной аэрации 1 , давление в ферментере 0,3 ати, скорость вращения мешалки 300 об/мин.

Время культивирования 52 ч. Биомассу отделяют от культуральной жидкости на автоматическом камерном фильтр-црессе. Пектолитическая активность культуральной жидкости составляет 370 ед/мл (йодометрический метод).

Применение предлагаемой питательной среды на строящемся Ладыжинском заводе ферментных препаратов (пуск в 1976 г.) позволяет вместо запроектированных 120 усл. т в год выпускать 150-160 усл. т в год ферментов. Ожидаемый экономический эффект более 2 млн. рублей в год.

Формула изобретения

1. Питательная среда для культивирования продуцентов пектолитических ферментов, например Aspergillius awamori 16, содержащая экстракт свекловичного жома, экстракт солодовых ростков, автолизат мицелия, сернокислый аммоний, однозамещенный фосфорнокислый калий, сернокислый магний и воду, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода пектиназы и интенсификации биосинтеза пектолитических ферментов, она дополнительно содержит соединения титана при следующем соотношении компонентов, вес. %;

Экстракт свекловичного жома80-85,05

Экстракт солодовых

ростков8,0-10,0

Автолизат мицелия3,0- 4,0

Сернокислый аммоний0,6- 0,7

Однозамещенный фосфорно0,05- 0,1

кислый калий Сернокислый магний

0,01- 0,05 Соединения титана

0,01- 0,1

Остальное Вода

2.Питательная среда по п. 1,

отличающаяся тем, что из соединений титана используют фосфорнокислый титан.

3.Питательная среда по п. 1, отличающаяся тем, что из соединений титана используют окись титана.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1. Авторское свидетельство № 345198, кл. С12Д 13/10, 1972.