Способ дифференциальной диагностики туберкулезного менингита Советский патент 1977 года по МПК A61B10/00 

1

Изобретение относится к области медицины и касается диагностики туберкулезного менингита.

Известен способ дифференциальной диагностики туберкулезного менингита, включающий культивирование лимфоцитов сиинномозговой жидкости в присутствии агента, вызывающего бласттрансформацию, фиксацию, окрашивание и подсчет бластных фор1М лимфоцитов в культуре .

Однако известный способ не обеспечивает точной диагиостики стертых форм туберкулезиого менингита от других форм серозных менингитов нетуберкулезиого происхождения.

Целью изобретения является уточнение этиологии заболевания.

Эта цель достигается тем, что лимфоциты культивируют со специфическим аитигеномтуберкулином в течеиие 3-6 сут и по наличию в культуре 10-20% бластных форм лимфоцитов выявляют заболевание.

Сиособ осуществляют следующим образом.

У больных мениигоэнцефалитом делают люмбальную пункцию, для максимального сохранения иммуиологических свойств и функции лимфоидных клеток вытекающую каплями церебросцинальиую жидкость через иункционную иглу с соблюдеушем асептических условий иаправляют непосредственно в заранее приготовленные стерильные пробирки из

2

иейтральиого стекла с питательной средой 199.

Затем добавляют антиген для стимуляцпп и для подбора коице)гграции клеток - лейкоцитов в иитателыюй среде. Коицеитрацию клето ои 1еделяют в каждом обычиым иодсчетом количества лейкоцитов в цереброспинальной жидкости. Концентрация лейкоцитов составляет от 100 до 1000 клеток в

В каждую нробирку добавляют 2 мл

1

ликвора. Для стимуляции лимфоцитов используют аитпгепы туберкулииа в концентрациях, иодобранных опытным путем (в дозе 6 мкг/мл, концентрация 30-150 мкг/мл вызывает чаще разрушенне клеток ликвора, редко угнетение бласттрансформацни), и сухой фитогемаггмотинин (ФГА Wellcome), который разводят но инструкции непосредствеиио перед каждым опытом и добавляют в культнвирзвмые клетки по 200 .мкг/мл. Лпмфопдные клеткн цереброснинальной жидкости культивируют в термостате при темнературе 35-37°С в течение 3-6 сут. По окончании культивирования (срок его может быть разлнчным) на третьи сутки культуры лпмфоидиых клеток, стимулированные ФГА, и на щестые с)тки культ ры, стимулированные туберкулином, центрифугируют со скоростью достаточной для того, чтобы осадить клетктг,

обычно 500 об/мни.

Из клеточного осадка готовят мазки на предметных стеклах, фиксируют метанолом ii окрашивают по Романовскому-Гнмза.

В нрепаратах подсчитывают траисфо)мированпые IV.TCTKH на 100-300 лнмфондных клеток н выражают в процентах.

Проведенные нммунологнческие исследования цереброспинальной жндкостн у 30 больных с серозным менингнтом и менннгоэнцефалнтом (нз них 16 туберкулезного характера, 14 нетуберкулезного ироисхождеиия - вирусной и невыясненной этиологни) показали, что из обследованных 16 больных туберкулезным меиингнтом ирн стимуляцнн культур ФГА бласттрансформация лимфоцитов наблюдалась у 15 больных. Интенсивность реакции бласттрансформацпи колебалась от 30 до 50% и только в одном случае имело место угнетение трансформации лимфоцитов. Под влиянием туберкулина у 11 больных количество трансформированных лимфоцитов составляло 10-20%, у трех больных наблюдалось угнетение реакции бласттрансформации и у двух больных клетки в культуре были разрушены.

У всех 14 больных с серозным менингитом нетуберкулезпого происхождения при стимуляции ФГА наблюдалась реакция бласттрансформации, нитенсивность которой также, как и у больных с туберкулезным менингитом, колебалась от 30 до 50%, в то время как под влиянием туберкулина ироцент трансформированных лнмфоцитов не нревышал 5.

Предлагаемый способ позволяет более точно дифференцировать туберкулезный менингит от других форм серозных менингитов нетуберкулезного нроисхождения.

Формула изобретения

Снособ дифференциальной днагностики туберкулезного менингита, включающий культивнрование лимфоцитов спинномозговой жидкости в присутствии агента, вызывающего бласттрансформацию, фиксацию, окрашивание н подсчет бластных форм лимфоцитов в культуре, отличающийся тем, что, с целью уточнения этнологии заболевания, лимфоциты культивируют со специфическим антигеном - туберкулином в течение 3-6 сут и по наличию в культуре 10-20% бластных форм лимфоцитов выявляют заболевание.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1. Lancet, 1973, 1, 319.