го копичесгва ангибиогика типа уЗ - пактама на единицу поверхности бумаги. Состав носитепя не имеет значения, необходима, чтобы он бып петучим, инертным и чтобы антибиотик типа д- лактама не растворяпся в нем. Носитель должен иметь температуру кипения 100 С ияи ниже при давлении 70О мм рт. ст., чтобы он легко испарился с бумаги после нанесения на нее. Нераств ряющийся носитель должен быть с темаературой точки кипения 1ОО С или ниже при давлении 760 мм рт. ст. Дисперсию антибиотика в летучем нерастворяющемся носителе приготовить образованием суспензии кристаллического антибиотика гипар-лактама к носителе. Концентрация антибиотика типа ft - лак тама в дисперсии зависит от абсорбционной способности бумаги, требуемой степени насьшдения бумаги носителем и требуемой концентрации антибиотилка типа 3 - лактама на единицу поверхности бумаги, Например, если абсорбционная способность применяемой бумаги к нерастворяющемуся носителю равна 2 (относительно веса бумаги) и сле дует насытить бумагу на 75% ее абсорбционной способности, то для бумаги весом ЗО мг/см требуется 45 мг такого носитепя на каждый квадратный сантиметр бумаг находящейся в контакте с носигепем. Суспендирующие агенты, которые не вы зывают изменения рН бумаги и не влияют на активность антибиотика типар-пактама можно добавлять к дисперсии для обеспечения гомогенности суспензии антибиотика в носителе. В качестве таких агентов ис- пользуют метилцеллюпозу и попивиниппирролидон, последний предпочтительно применяют в концентрации 1% от носителя. Применение этих агентов способствует также адгезии частиц антибиотика типарпактама к бумаге после испарения с нее носителя. При применении суспендирующего агента необходима тесная связь этого агента с носителем, т. е. агент должен растворят ся в носителе или образовывать гель. Ина че добавление такого агента ничего не дает. Хорощее отложение кристаллов антибиотика типа ft - лактама на бумаге можно получить методом непрерывного полива дисперсии антибиотика типал-лактама через порог, причем щирина потока должна быть равна щирине пропитываемого листа бумаги, а скорость потока должна соответствовать скорости движения порога над бумагой или скорости движения бумаги под порогом. Целес образно применять неподвижный порог и переметать под ним бумагу с постоянной скоростью. Порог можно применять в сочетании с ящичным распредепитепем или отдельно. Если с бумагой контактирует равномерный слой дисперсии антибиотика типа /3-лактама, нерастворяющийся носитель быстро абсорбируется бумагой, оставляя на ней отложения кристаллов. Важным является то, чтобы общее количество вводимого на бумагу носителя было менее 100% абсорбционной способности бумаги для обеспечения достаточной равномерности отложения на ней кристаллов антибиотика типа уЗ- лактама. Контакт бумаги, содержащей подложку антибиотика типа -лактама с дисперсиями этих антибиотиков, может осуществляться также набрызгом дисперсии на бумагу. Это можно осуществить перемещением бумаги с равномерной регулируемой скоростью мимо разбрызгивающего сопла, предпочтительны сэнпа лопастного типа, в которое дисперсия нагнетается под давлением. Объем подаБаем.ого в сопло потока должен соответствовать скорости движения бумаги мимо сопла. Необходимо, чтобы бумага находилась под соплом и чтобы размеры сопла могпи обеспечить ширину струи, соответствующую ширине движущейся под соплом бумаги. При этом бумага может быть закреплена неподвижно, а разбрызгивающее сопло движется с установленной постоянной скоростью над бумагой. Но этот вариант высокоэффективен в тех случаях, когда для получения дисков для проверки чувствительности к антибиотикам типа -лактама применяют отдельные листы бумаги. После контакта бумаги с дисперсией кристаллического антибиотика типа/з-лактама и абсорбции бумагой нерастворяющегг ся носителя, бумагу высущивают для удаления с нее носитепя. Это осуществляют известными способами. Например, если бумаге поступает в виде непрерывного рулона, то влалсную бумагу можно медленно перемещать через туннельную сущилку, в которой носитель испаряется и отсасывается в систему рекуперации растворителя или удаляется с отходами. Отдельные листы влажной бумаги можно подвешивать на бесконеч- ном конвейере, проходящем через туннепьную сущилку, ипи же эти листы можно помещать в камерную сушилку, к которой подводят тепло и в которой имеется устройство для удаления паров носителя и транспортирования этих паров в соответствующую систему их удаления. Для ускорения процесса испарения можно использовать вакуум. Температура сушки должна соответствовать температуре кипения носитепя при том давлении, при котором ведется сушка, и допжна быть не бопее чем на несколько градусов выше температуры кипения, но не выше 10О С. Кроме того, высушиваемая бумага должна находить ся при температуре сушки не дольше, чем требуется для полного удаления носителя, чтобы не происходило разложения антибиотиков.
Отдельные проверочные диски могут
быть изготовлены из высушенной бумаги, на которую был осажден антибиотик типа уЗ-лактама. Для этого вырезают отдельные диски специальным штампом. Размер и форма дисков должна удовлетворять правилам, относящимся к применению этих дисков. При применении проверочных дисков зоны подавления будут различными для различных антибиотиков.
Пример. Диски для прверки чувствительности к цефалотину приготавливают следуюшим образом.
Кристалл цефалотина натрия измельчают в молотковой мельнице до размера частиц, проходящих полностью через сито 100 меш (по классификации США).
Приготовленные таким образом кристаллы цефалотина натрия суспендируют в изопропаноле с концентрацией 2 мг/мл (0,2%). Обрабатывают листы альфацеллюлозной бума ги этой дисперсией в количестве приблизительно 60 мкл/см (0,О6 мл/см .
Полученную влажную бумагу сушат на проволочной сетке из нержавеющей стали в рециркуляционной воздушной сушилке при 6О С и давлении 760 мм рт. ст. в течение 4 мин. Отдельные проверочные диски проверяют на равномерность содержания цефалотина методом спектрофотометрического анализа, десять дисков показали отклонения от среднего значения менее Ь%.
Проверочные диски, приготовленные предлагаемым способом, испытывают на эффективность путем проверки чувствительности к антибиотикам у микроорганизмовKEebsifi2о| Рнекничомш.
Диски кладутся на агар как стороной, бывшей в контакте с антибиотиком, так и противоположной стороной. Наблюдают одинаковые зоны подавления независимо от того, какой стороной диск был положен на агар.
Другие диски хранят при 37°С без осушителей. Технические диски, приготовленные известным способом, хранят точно в таких же условиях.
Результаты испытаний показывают, что проверочные диски с цефалотином натрия, приготовленные предлагаемым способом, отличаются большей стабильностью при нагреве и хранении, чем технические проверочные диски, приготовленные известным способом.
ормула изобретения
Способ получения индикатора для определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам путем нанесения антибиотика в виде суспензии на поверхность абсорбента с последующим высушиванием абсорбента, отличающийся тем, что, с целью повышения стабильности индикатора, кристаллический антибиотик типа/3-лактама перед нанесением на абсорбент соединяют с носителем.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:
1 Ameh-icaM y.Ckehrrisiry Path, 45, 1966, p.493.
