Способ получения антител против вируса клещевого энцефалита Советский патент 1978 года по МПК A61K35/16 

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ.АНТИТЕЛ ПРОТИВ ВИРУСА КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА является сыворотка доноров, содержащая антитела против вируса клещевого энцефалита в титре 1:4О н выше. Исходную сыворотку в количестве 5О мл смешивают с иммуносорб.ентом и инкубируют в те чение 18 ч при 4 С. Для освобождения от избытке сывороточных белков проводят четырехкратное промывание физиологическим раствором (рН 7,) .в четырехкратном объеме. Центрифугирование проводят при С и 60ОО об/мин в течение 10 мин. , Затем 1иммунсорбент, нагруженный анти телами, разводят дистиллированной водой в объеме, равном объему исходной сыворотки, рН в нем доводят до 11,0-11,1 с помощью 2 н NaOH, Эшсцию антител проводят на ледяной бане (при постоянном перемещивани в течение ЗО мин. После этого иммуносорбейт отделяют от элюата центрифугированием в течение 15 мин при 18ООО об/мин рН элюата и иммуносорбента доводит до 7 О-7 9 f,u-/,i, Нативные препараты антител (эшоаты) обладают акгивностыо 1:10-1:20 ь.-ааг глотшйрующих единиц при белке мг/% Удельная активность 0,2-0,4 на единицу белка. Эяюаты для лиофшшзашга разливают по 2О мл во флаконы емкостью 2 5О мл, Лиофилизацию проводят в аппаратах Юзефру ч сушка замораживание при в течение ч, тектература в начале су{пки - 42°С; в конце -26 28°С, вакуум .50-80 мк рт.ст. Высушенные препараты перед употрёблен ем разводят в 2 мл физиологического раствора. При этом титр раствора 1:200 при содержаний белка 0,5%. Использование предлагаемого способа получения антител человека против вируса клещевого энцефалита путем иммуносорбции и 9ЛЮЦИИ на основе геля гидрата окиси алюминия обеспечивает получение гомологичного препарата антител против вируса клеще-i вого энцефалита, обладающего высокой противовирусной активностью при низком содержании белка. Средняя удельная активность препарата 0,2-О,4 антигемагглютинируищих единиц на 1 мг белка (удельная активность в 10-20 раз выше, чем в существующем гомологичном icывopoтoчнoм препарате). Формула изобретения Способ получения антител против вируса клещевого энцефалита, отлич аю.ший- с я тем, что, с целью повышения удельной специфической активности препарата, сыворотку крови смешивают с иммуносорбентом, на основе геля гидрата окиси алюминия, полученную смесь инкубируют, отделяют балластные белки при текшературе 2-8 С, а затем антитела элюируют дистиллированной водой прирЫ il,O-li,l и температуре 2-8 С, Источники информации, принятые во внимание при экспертизе: 1.Райхер И. И. Очищенные антитоксины, выделенные из противодифтерийных и противостолбнячных сывороток с -помощью иммуносорбции, изучение перспект21Вы практического применения, докт. дйссерт. Пермь, 1973, 2.Ж. Вопросы вирусологии , 1, 1972, с. 84.