Способ выделения одноклеточных микроорганизмов Советский патент 1978 года по МПК C12B1/26 

2

1,15

0,65

0,17

0,045

0,068

кт

0,25

вода

1 л.

Источником углерода служит нефтяная фракция, содержащая смесь Н-парафинов, имеющих 11-24 углеродных атомов в молекуле. Температура культивационного бульона 30° С. Величина рН 5,5 поддерживается добавлением аммиака, служащим также и источником азота.

Скорость подачи питательных веществ в бульо регулируют таким образом, чтобы сохранить скорость разведения 0,1 ч. Бульон энергично перемешивают. Скорость аэрации 0,5 об/мин.

Температура сгущенной фракции, подвергаемой центрифугированию, °С

32 65

70

80

Пример 2. Штамм дрожжей Candida tropical is. использующий углеводород, выращивают в бульоне при непрерывном режиме работы с перемепшванием струей воздуха в ферментере, имеющем рабочий объем 12 м .

Основу бульона составляет водная среда, содержащая следующие компоненты:

Фосфор0,23

Калий .0,30

Марганец0,003

Железо0,01

Магний0,02

Цинк0,018

Водопроводная вода1л.

Источником углерода служит нефтяная фракция, состоящая из смеси углеводородов газойля с содержанием нормальных парафинов 11-18%. Н-парафины имеют 14-28 атомов углерода в молекуле.

Температуру бульона поддер 1а1вают 30° С и рН 4,0-4,2, путем добавления аммиака, который служит и источником азота.

Скорость подачи водной питательной среды и газойля в бульоне регулируют так, чтобы сохранить скорость разведения 0,. Бульон энергичч лл е/. „„.

Бульон, с содержанием твердых веществ 1,5% по Ьесу пропускают через центрифугу насадочного типа со скоростью 20 при 5500 об/мин. рН бульона в центрифуге равна 5,5.температура 30 С

Крем, содержащий 15% твердых веществ отбирают из центрифуги со скоростью 2,0 м /ч. Затем температуру увеличивают до 65° С путем пропускания пара, рН повышается до 6,5. Подогретую сгущенную фракцию - крем пропускают через вторую центрифугу насадочного типа Вестфалия SCOY 205 со скоростью 9200 об/мин, скорость пропускания 100 л/ч. Время пребывания подогретого крема 2 мин.

Полученная сгущенная фракция содержит 22% твердых веществ по весу.

В таблице показано влияние температуры на содержание твердых веществ в целевом продукте.

Вес оставшейся воды, отнесенной на единицу веса сухого вещества, кг

4,55

18,0 3,54 22,0

3,15

24,1 2,85 26,0

Бульон, содержащий 0,5-1% по весу твер-. дых веществ, пропускают через декантатор, где под действием силы тяжести происходит разделение фаз на верхнюю насыщенную воздухом, состоящую из эмульсии углеводорода дрожжей и некоторого количества водной питательной среды и нижнюю фазу, состоящую из воды, которую затем удаляют.

К эмульсии добавляют поверхностно-активное вещество эмилин в количестве 0,05% по отношению к эмульсии.

Эмульсию пропускают через дегазационный насос и затем через центрифугу Альфа Лаваль Н V АХ насадочного типа, где происходит разделение на сгущенную фракцию - крем с содержанием твердых веществ 2,5% по весу и температурой 32° С и жидкую фракцию.

Скорость работы центрифуги 6000 об/мин. рН эмульсии 5,6-5,8.

После этого крем пропускают без нагревания через центрифугу Альфа Лаваль НУАХ. Получают сгущенную фракцию с содержанием 15% сухих веществ. Температура крема, выходящего

.ж., lTeuTnHlflvni.l.S С. оН 6.0. Затем крем пропускают через пластинчатый теплообменник для нагревания его до 80° С, т.е. температуру увеличивают на 45° С. Нагретую сгущенную фракщоо вновь подвергают центрифугированию и получает сгущенную фракцию с содержанием твердых веществ до 24% по весу. Для сравнения вышеуказанную процедуру повт ряют за исключением того, что сгущенную фракцию не нагревают перед пропусканием через третью центрифугу. Крем из третьей центрифуги содержит 15% твердых веществ по весу. В третьей центрифуге не наблюдают увеличения содержания твердь1Х веществ в креме. Формула изобретения 1. Способ выделения одноклеточных микроорганизмов из культуральной жидкости, преимущественно дрожжей, выращенных на углеводородах путем центрифугирования кутитуральной жидкости с получением сгущенной фракции, содержащей микроорганизмы, отличающийся тем, что, с целью повыщения содержания микроорганизмов в целевом продукте, сгущенную фракцию нагревают, а затем вновь подвергают центрифугированию. 2.Способ по П.1, отличающийся тем, что температуру при нагревании повыщают на 5-70° С. 3.Способ по П.1, отличающийся тем, что сгущенную фракцию нагревают пропусканием пара. 4.Способ по П.1, отличающийся тем, что рН нагретой сгущенной фракции поддерживают в пределах от 3,0 до 8,0. Источники информации, принятые во внимание при зкспергизе; 1. Патент Англии № 1062005, кл. С 6 F, 1967