вавшегося гйдразона) и замеряют в фотометре вобласти 405 нм. Оценку произзводят по стандартной- кривой, прм нимая во внимание значение, полученное в контрольном опыте. Измерение также, .можно, проводить в области 546 н пос.ле добавления щелочи.
Измерение, проведенное-на типичной пробе, показало;-60 мг% свободного холбстерйна и 154 мг % общего холестерина (омыление спиртовым раствором гидроокиси калия),
Проведенное для сравнения определение по .Лиеберману и .Бурхарду дало результат i70 мг % обдёго холестерина.
Для омыления этерйфицированного холест.ерина (определение общего холестерина в сыворотке) смешива 9Т 1 мг сыворотки/ 1 мл 20%-ного раствора гидроксиполиэтоксидодекана и 5 мл 0,5 М pacTBOjia гидроокиси калия в 90%-НОМ этиловом спирте, смесь нагре вают 30 мин при 1Q°C, затем раствору дают возможность охладиться, смешивают его с 10 мл 0,1 М раствора сернокислого магния и центрифугируют. Раствор над осадком (13 ) содержит общий холестерин в свободной форме.
Для омыления этерифицированного холестерина с использованием эстеразы печени - холестеринэстеразы сыворотку выдерживают 30 мин при 37 G и рН от б до 8.
Предлагаемый реактив для определения холестерина специфичен и высокочувствителен и может найти широкое применение в медицине для диагности- чесКих целей, таккак повшйенное содержание холестерина в крови являет Ся важным показателем возникновения артериосклероза, а при высоком содержании холестерина, т.е. при гиперхолестеринемии, коронарная недостаточность и инфаркты сердца наблюдаются чаще, чем при низком содержании холе- стерйна, Гиперхолестеринемия благоприятствует возникновению артериосклероза и коронарной болезни.
Повышенное содержание холестерина также наблюдается при сахарном диабете, невротическом синдроме, гипотиреозе и при болезнях печени, например, при бйна;.;пом циррозе.
Благодаря предлагаемому реактиву анализы могут быть проведеныбыстро и дать достоверные результаты, что имеет большое значение для лечения.
Формула изобретения
Реактив для определения холестерина в общей фракций липидов, содержащий буферно-солевую среду и поверхностно-активное вещество, о т л и чающийся тем, что, с целью,повышения специфичности и чувствительности анализа, реактив дополнительно содержит холестериноксидазу, 2,4-ди нитрофенилгидразин и холестеринзстеразу при следуйщем соотношении компонентов, вес.%:
0,025-1,500 Холестериноксидаза
2,4-Динитрофенил1,000-5,000
гидразин 0,025-1,500
Холестеринзстераза
Поверхностно-актив-0,040-8,000 ное вещество
Буферно-солевая Остальное.
среда
